【技术实现步骤摘要】
本专利技术总体上涉及wnt信号传导通路激动剂分子、组合物以及所述wnt信号传导通路激动剂分子、组合物的使用方法。此类分子可用于例如调节wnt信号传导通路。
技术介绍
1、wnt(“无翅相关整合位点”或“无翅和int-1”或“无翅-int”)配体和其信号在控制许多基本器官和组织(包含骨、肝、皮肤、胃、肠、肾、中枢神经系统、乳腺、味蕾、卵巢、耳蜗和许多其它组织)的发育、内稳态和再生中发挥了关键作用(例如，由clevers、loh和nusse综述，2014；346:1248012)。对wnt信号传导通路的调节具有治疗变性疾病和组织损伤的潜力。
2、将调节wnt信号传导作为治疗的挑战之一是存在多种wnt配体和wnt受体、卷曲蛋白1-10(fzd1-10)，其中许多组织表达多种fzd和重叠的fzd。典型的wnt信号还涉及作为共受体的低密度脂蛋白(ldl)受体相关蛋白5(lrp5)或低密度脂蛋白(ldl)受体相关蛋白6(lrp6)，除了fzd之外，所述共受体也在各种组织中广泛表达。因此，在本领域中显然需要与一种或多种fzd、lrp5或lrp6特异性结合以调节wnt信号传导通路的结合部分。本专利技术解决了此需要。
技术实现思路
1、在各个实施例中，本专利技术提供了wnt替代分子和其相关用途。
2、在一个实施例中，本公开内容提供了一种可溶性二价双特异性wnt替代分子，其中所述wnt替代分子包括：(i)与一种或多种卷曲蛋白(fzd)受体特异性结合的一个或多个区(fzd结合区)
3、在特定实施例中，所述wnt替代分子包括两个或更多个fzd结合区以及两个或更多个lrp5/6结合区。在特定实施例中，一个或多个fzd结合区包括抗体的一个或多个抗原结合片段。在特定实施例中，一个或多个抗原结合片段选自由以下组成的组：igg、scfv、fab和vhh或sdab。
4、在特定实施例中，fzd抗原结合片段中的任一个fzd抗原结合片段包括：(i)针对表1a或1b的抗体中的任何抗体所示的cdrh1、cdrh2和cdrh3序列；和/或(ii)针对表1a或1b的抗体中的任何抗体所示的cdrl1、cdrl2和cdrl3序列；或所述fzd结合区的变体，所述变体包括一个或多个氨基酸修饰，其中所述变体在所述cdr序列中包括少于8个氨基酸取代。在特定实施例中，所述fzd结合区中的任一个fzd结合区包括与seq id no:1-65或129-132中所示的序列中的任一个序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或其抗原结合片段。
5、在特定实施例中，所述fzd结合区中的任一个fzd结合区与以下中的一种或多种结合：卷曲蛋白1(fzd1)、卷曲蛋白2(fzd2)、卷曲蛋白3(fzd3)、卷曲蛋白4(fzd4)、卷曲蛋白5(fzd5)、卷曲蛋白6(fzd6)、卷曲蛋白7(fzd7)、卷曲蛋白8(fzd8)、卷曲蛋白9(fzd9)和卷曲蛋白10(fzd10)。在特定实施例中，所述fzd结合区中的任一个fzd结合区与以下中的两种或更多种结合：卷曲蛋白1(fzd1)、卷曲蛋白2(fzd2)、卷曲蛋白3(fzd3)、卷曲蛋白4(fzd4)、卷曲蛋白5(fzd5)、卷曲蛋白6(fzd6)、卷曲蛋白7(fzd7)、卷曲蛋白8(fzd8)、卷曲蛋白9(fzd9)和卷曲蛋白10(fzd10)。在特定实施例中，所述fzd结合区中的任一个fzd结合区与以下结合：(i)fzd1、fzd2、fzd7和fzd9；(ii)fzd1、fzd2和fzd7；(iii)fzd5和fzd8；(iv)fzd5、fzd7和fzd8；(v)fzd1、fzd4、fzd5和fzd8；(vi)fzd1、fzd2、fzd5、fzd7和fzd8；(vii)fzd4和fzd9；(viii)fzd9和fzd10；(ix)fzd5、fzd8和fzd10；或(x)fzd4、fzd5和fzd8；fzd1、fzd5、fzd7和fzd8。
6、在特定实施例中，所述替代分子中的任一种替代分子包括一个或多个lrp5/6结合区，所述一个或多个lrp5/6结合区包括抗体的一个或多个抗原结合片段。在特定实施例中，所述一个或多个抗原结合片段选自由以下组成的组：igg、scfv、fab和vhh或sdab。在特定实施例中，所述一个或多个lrp5/6结合区或抗原结合片段中的任一个包括：(i)针对表2的抗体中的任何抗体所示的cdrh1、cdrh2和cdrh3序列；和/或(ii)针对表2的抗体中的任何抗体所示的cdrl1、cdrl2和cdrl3序列；或所述lrp5/6结合区的变体，所述变体包括一个或多个氨基酸修饰，其中所述变体在所述cdr序列中包括少于8个氨基酸取代。在特定实施例中，所述一个或多个lrp5/6结合区中的任一个lrp5/6结合区包括与seq id no:66-88或133中所示的序列中的任一个序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或其抗原结合片段。
7、在所述wnt替代分子中的任一种wnt替代分子的特定实施例中，所述fzd结合区包括fab并且所述lrp5/6结合区包括vhh或sdab。在特定实施例中，fab存在于包括轻链和重链的完整免疫球蛋白(ig)，任选地igg内。在特定实施例中，所述lrp5/6结合区与所述重链的n端或c端融合。在特定实施例中，所述lrp5/6结合区与所述轻链的n端或c端融合。在某些实施例中，所述lrp5/6结合区与所述完整ig的所述重链的n端或所述完整ig的所述轻链的n端融合。在某些实施例中，所述lrp5/6结合区与所述完整ig的所述重链的c端或所述完整ig的所述轻链的c端融合。在某些实施例中，所述lrp5/6结合性fab的可变轻链区与所述完整ig的可变重链区的n端融合。在某些实施例中，所述lrp5/6结合性fab的可变轻链区与所述完整ig的可变重链区的n端融合，并且所述lrp5/6结合性fab的可变重链区与所述完整igg的可变轻链区的n端融合。在特定实施例中，所述lrp5/6结合区中的任一个lrp5/6结合区通过一个或多个接头部分与所述重链或所述轻链融合。
8、在所述wnt替代分子中的任一种wnt替代分子的某些实施例中，所述fzd结合区包括vhh或sdab，并且所述lrp5/6结合区包括fab。在特定实施例中，所述fab存在于包括轻链和重链的完整免疫球蛋白(ig)，任选地igg内。在某些实施例中，所述fzd结合区与所述重链的n端或c端融合。在某些实施例中，所述fzd结合区与所述轻链的n端或c端融合。在一些实施例中，所述fzd结合区与所述完整ig的所述重链的n端或所述完整ig的所述轻链的n端融合。在一些实施例中，所述fzd结合区与所述完整ig的所述重链的c端或所述完整ig的所述轻链的c端融合。在一些实施例中，所述fzd结合性fab的可变轻链区与所述完整ig的可变重链区的n端融合。在一些本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.可溶性多价多特异性Wnt替代分子，其中所述Wnt替代分子包括：
2.根据权利要求1所述的可溶性多价多特异性Wnt替代分子，其中所述Wnt替代分子包括：
3.根据权利要求2所述的Wnt替代分子，其中所述Wnt替代分子包括：(a)两个Fzd结合区，其中每个Fzd结合区包括一个或多个抗体或其抗原结合片段，其中所述一个或多个抗体或其抗原结合片段包括：SEQ ID NO:248的CDRH1、SEQ ID NO:600的CDRH2、SEQ ID NO:757的CDRH3、SEQ ID NO:1098的CDRL1、SEQ ID NO:1175的CDRL2和SEQ ID NO:1372的CDRL3；以及
4.根据权利要求3所述的Wnt替代分子，其中所述抗原结合片段选自由以下组成的组：IgG、scFv、Fab和VHH或单结构域抗体(sdAb)。
5.根据权利要求4所述的Wnt替代分子，其中所述Fzd结合区包括Fab，并且所述LRP5/6结合区包括VHH或sdAb或scFv。
6.根据权利要求5所述的Wnt替代分子，其中所述Fab存在于
7.根据权利要求6所述的Wnt替代分子，其中所述LRP5/6结合区与所述轻链的N端融合。
8.根据权利要求7所述的Wnt替代分子，其中所述LRP5/6结合区通过一个或多个接头部分与所述轻链融合。
9.根据权利要求8所述的Wnt替代分子，其中所述IgG包括两条轻链和两条重链，并且所述LRP5/6结合通过接头部分与每条轻链的N端融合。
10.分离的多核苷酸，其对多肽序列进行编码，所述多肽序列包括权利要求1到9中任一项所述的Wnt替代分子的所述Fzd结合区和所述LRP5/6结合区。
11.表达载体，其包括权利要求10所述的分离的多核苷酸。
12.分离的宿主细胞，其包括权利要求11所述的表达载体。
13.药物组合物，其包括生理学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂以及治疗有效量的权利要求1到9中任一项所述的Wnt替代分子。
14.药物组合物，其包括生理学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂以及治疗有效量的权利要求10所述的多核苷酸、权利要求11所述的表达载体或权利要求12所述的宿主细胞。
15.抗Fzd抗体或其抗原结合片段，其包括，
16.抗LRP抗体或其抗原结合片段，其包括，
...【技术特征摘要】
1.可溶性多价多特异性wnt替代分子，其中所述wnt替代分子包括：
2.根据权利要求1所述的可溶性多价多特异性wnt替代分子，其中所述wnt替代分子包括：
3.根据权利要求2所述的wnt替代分子，其中所述wnt替代分子包括：(a)两个fzd结合区，其中每个fzd结合区包括一个或多个抗体或其抗原结合片段，其中所述一个或多个抗体或其抗原结合片段包括：seq id no:248的cdrh1、seq id no:600的cdrh2、seq id no:757的cdrh3、seq id no:1098的cdrl1、seq id no:1175的cdrl2和seq id no:1372的cdrl3；以及
4.根据权利要求3所述的wnt替代分子，其中所述抗原结合片段选自由以下组成的组：igg、scfv、fab和vhh或单结构域抗体(sdab)。
5.根据权利要求4所述的wnt替代分子，其中所述fzd结合区包括fab，并且所述lrp5/6结合区包括vhh或sdab或scfv。
6.根据权利要求5所述的wnt替代分子，其中所述fab存在于包括轻链和重链的完整免疫球蛋白(ig)，任选地igg内。
7.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：李阳，袁之邺，亚伦·肯·佐藤，叶文琛，克劳迪娅·伊冯·贾达，特里斯坦·威廉·福勒，海琳·巴里博，赖国宝，谢力勤，兰德尔·J·布列斯基，鲁成钢，
申请(专利权)人：瑟罗泽恩奥普瑞汀公司，
类型：发明
国别省市：
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