【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程，特别是涉及ghxth22基因在棉花抗冷胁迫中的应用和获取方法。
技术介绍
1、棉花是全球必不可少的作物，它已经种植了数千年，为纺织工业提供最大比例的天然纤维，且享有“白金”的美誉。棉花的纤维，用于制造纺织品、服装和其他产品；从棉花植物的种子中提取的棉籽油也用于烹饪、化妆品和其他行业。各种极端的环境胁迫可能会影响棉花正常的生长和生理代谢，导致植物受损甚至死亡。近年来，随着棉花种植逐步向西北内陆等地区的迁移，春寒秋霜的天气对棉花的影响越来越严重。因此，鉴定棉花耐寒相关基因，阐明其调控机制，并创制耐冷棉优异种质资源是当前棉花遗传改良面临的重要任务。
2、许多研究表明，xth在应对多种非生物胁迫方面发挥重要作用。据报道，xth17和xth31调节拟南芥根的铝毒性耐受性。xth31通过调控细胞壁木葡聚糖的含量和与铝结合的能力，从而影响铝的敏感性。bes1作用于xth19和xth23上游调控基因的表达，促进侧根发育，从而影响增强盐胁迫的适应。此外，在低温环境下，xth19通过调控木葡聚糖的浓度，从而影响植物细胞壁重塑，负调节耐寒性。xth22在低硼条件下能够通过调节细胞壁的稳态进而控制植物生长。芥菜中，随着土壤中镉浓度由10-50mg/kg逐渐上升，xth18、xth22和xth23下调，但pme17和pme14上调，这可能有助于细胞壁完整性的维持。总之，上述发现提示逆境条件下xth可能在植物细胞壁的结构修改中发挥作用，能够改善植株结构适应性，提高植株抗逆能力。
3、现有技术中还未有关于ghx
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了ghxth22基因在棉花抗冷胁迫中的应用和获取方法，ghxth22基因在棉花中响应冷胁迫。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、本专利技术提供了ghxth22基因在棉花抗冷胁迫中的应用。
4、优选的，所述ghxth22基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
5、优选的，所述ghxth22基因的氨基酸序列如seq id no.2所示。
6、优选的，所述冷胁迫的温度为-8℃～4℃。
7、本专利技术还提供了一种耐冷拟南芥植株的获取方法，包括以下步骤：
8、1)将上述技术方案中的ghxth22基因连接到pbi121载体中，得到植物表达载体；
9、2)将所述步骤1)得到的植物表达载体转化大肠杆菌，得到大肠杆菌转化菌；
10、3)将所述步骤2)得到的大肠杆菌转化菌转化根癌农杆菌，得到根癌农杆菌转化菌；
11、4)将所述步骤3)得到的根癌农杆菌转化菌侵染拟南芥花序，成熟后收获拟南芥种子；
12、5)将所述步骤4)得到的拟南芥种子种植后在-8℃～4℃春化2d，培养得到耐冷拟南芥植株。
13、优选的，所述步骤1)扩增ghxth22基因使用的上游引物的核苷酸序列如seq idno.3所示，下游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示。
14、优选的，所述步骤1)连接的条件包括：温度为37℃，时间为30min；
15、所述pbi121载体经xbai和saci双酶切。
16、优选的，所述步骤2)大肠杆菌包括大肠杆菌dh5α。
17、优选的，所述步骤3)根癌农杆菌包括根癌农杆菌gv3101，采用冻融法转化根癌农杆菌。
18、优选的，所述步骤4)侵染的次数为2次，间隔时间为7d，每次侵染的时间为60s。
19、本专利技术的有益效果为：
20、本专利技术对ghxth22基因在棉花冷敏感品种ym21和棉花耐冷品种h5594℃胁迫处理0、1、3、6、12、24和48小时后叶片中的表达模式进行分析，结果显示该基因在耐冷品种的表达水平随着处理时间的延长相较于ym21显着增加。为进一步研究ghxth22对植物抗逆方面的作用，本专利技术在拟南芥中异源表达ghxth22得到的转基因植株。对野生型以及过表达拟南芥进行冷胁迫处理，发现相比于野生型，过表达株系生长状态更好，表明ghxth22基因在棉花中响应冷胁迫。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.GhXTH22基因在棉花抗冷胁迫中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述GhXTH22基因的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述GhXTH22基因的氨基酸序列如SEQID No.2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述冷胁迫的温度为-8℃～4℃。
5.一种耐冷拟南芥植株的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的获取方法，其特征在于，所述步骤1)扩增GhXTH22基因使用的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
7.根据权利要求5所述的获取方法，其特征在于，所述步骤1)连接的条件包括：温度为37℃，时间为30min；
8.根据权利要求1所述的获取方法，其特征在于，所述步骤2)大肠杆菌包括大肠杆菌DH5α。
9.根据权利要求1所述的获取方法，其特征在于，所述步骤3)根癌农杆菌包括根癌农杆菌GV3101，采用冻融法转化
10.根据权利要求1所述的获取方法，其特征在于，所述步骤4)侵染的次数为2次，间隔时间为7d，每次侵染的时间为60s。
...【技术特征摘要】
1.ghxth22基因在棉花抗冷胁迫中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述ghxth22基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述ghxth22基因的氨基酸序列如seqid no.2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述冷胁迫的温度为-8℃～4℃。
5.一种耐冷拟南芥植株的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的获取方法，其特征在于，所述步骤1)扩增ghxth22基因使用的上游引物的核苷酸序列如...
【专利技术属性】
技术研发人员：马亮，吴洪梅，杨永林，魏恒玲，王寒涛，付小康，芦建华，喻晓云，
申请(专利权)人：中国农业科学院棉花研究所，
类型：发明
国别省市：
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