本发明专利技术公开了一种青稞中β－葡聚糖提取和纯化工艺。按以下步骤顺次进行：ａ）取青稞粉碎过６０目筛；ｂ）８５℃干燥灭酶２小时，按料水比１∶２２加水，ｃ）加碳酸钠调ｐＨ８．０，８０℃提取１．５ｈ，放冷，离心，得上清液。ｄ）调上清液ｐＨ值为６．０，按４ｕ／ｇ加入耐高温ａ－淀粉酶，水浴温度为９０－９５℃进行酶解去淀粉３０ｍｉｎ，碘液检查不含淀粉为止，冷却至室温。ｅ）调ｐＨ为４．５，冷藏过液，离心，得上清液。ｆ）调ｐＨ８．０，加０．２５ｇ胰酶（溶解后加入），４７℃酶解２．５ｈ，离心得上清液。ｇ）上清液调ｐＨ为７．０，加入乙醇至含醇量为７０％，冷藏过夜。ｈ）过滤得沉淀，沉淀加５０倍水溶解，加入乙醇至含醇量为７５％，冷藏过夜。ｉ）过滤得沉淀，冷冻干燥。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物成分的提取方法，特别是青稞中β-葡聚糖提取和纯化工艺。
技术介绍
青稞是禾本科大麦属的一种禾谷类作物，因其内外颖壳分离，籽粒裸露，故又称裸大麦、元麦、米大麦。青稞具有丰富的营养价值和特殊功效，青稞是世界上麦类作物中β一葡聚糖最高的作物，据检测青稞β-葡聚糖平均含量为6.57％，优良品种青稞25可8.6％，是小麦平均含量的50倍。β-葡聚糖通过减少肠道粘膜与致癌物质的接触和间接抑制致癌维生物作用来预防结肠癌；通过降血脂和降胆固醇的合成预防心血管疾病通过控制血糖防治糖尿病。具有提高机体防御能力、调节生理节律的作用。 本专利技术从青稞中提取具有丰富的营养价值和特殊功效β-葡聚糖，确定了先碱提后酶解淀粉的提取和纯化工艺。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种青稞中β-葡聚糖提取和纯化工艺，以使青稞中β-葡聚糖提取率和纯度更高，符合工业大生产要求。 本专利技术的目的通过以下技术方案实现一种青稞中β-葡聚糖提取和纯化工艺，按以下步骤顺次进行a)、取青稞粉碎过60目筛；b)、85℃干燥灭酶2小时，按料水比1∶22加水，c)、加碳酸钠调PH8.0，80℃提取1.5h，放冷，离心，得上清液。d)、调上清液PH值为6.0，按4u/g加入耐高温a-淀粉酶，水浴温度为90-95℃进行酶解去淀粉30min，碘液检查不含淀粉为止，冷却至室温。e)、调PH为4.5，冷藏过液，离心，得上清液。f)、调PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h，离心得上清液。g)、上清液调PH为7.0，加入乙醇至含醇量为70％，冷藏过夜。h)、过滤得沉淀，沉淀加50倍水溶解，加入乙醇至含醇量为75％，冷藏过夜。i)、过滤得沉淀，冷冻干燥。 本专利技术以理论为依据，以实验为基础，并经实验反复验证，本工艺的青稞中β-葡聚糖提取率相对较高，且满足工业大生产要求，可以直接应用在工业生产中。 具体实施例方式 青稞中β-葡聚糖的制备工艺按以下步骤顺次进行a)、取青稞粉碎过60目筛；b)、85℃干燥灭酶2小时，按料水比1∶22加水，c)、加碳酸钠调PH8.0，80℃提取1.5h，放冷，离心，得上清液。d)、调上清液PH值为6.0，按4u/g加入耐高温a-淀粉酶，水浴温度为90-95℃进行酶解去淀粉30min，碘液检查不含淀粉为止，冷却至室温。e)、调PH为4.5，冷藏过液，离心，得上清液。f)、调PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h，离心得上清液。g)、上清液调PH为7.0，加入乙醇至含醇量为70％，冷藏过夜。h)、过滤得沉淀，沉淀加50倍水溶解，加入乙醇至含醇量为75％，冷藏过夜。i)、过滤得沉淀，冷冻干燥。 具体实验研究如下 1材料与方法 1.1主要试剂 95％乙醇(分析纯)；碳酸钠(分析纯)；盐酸(分析纯)；氢氧化钠(分析纯)；耐高温a-淀粉酶；胰酶；果胶酶。 1.2主要试验仪器 水浴锅；离心机；紫外分光光度计；PH酸度计；旋转蒸发仪；恒温振摇床。 1.3试验方法 1.3.1考察是否粉碎对提取的而影响 取青稞粒、青稞粉各两份，编号分别为1、2；3、4，每份80g，按料水比1∶22加水，并调PH8.0，提取1.5h，放冷，离心。得上清液。新配制100u/ml耐高温a-淀粉酶液，调上清液PH值为6.0，水浴温度为90-95℃，加入新配制的耐高温a-淀粉酶液5ml，去淀粉30min，碘液检查不含淀粉为止，冷却至室温。调PH为4.5，冷藏过液，离心，得上清液。调PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h。离心得上清液。上清液调PH为7.0，加入乙醇至含醇量为70％，冷藏过夜。干燥沉淀，测定含量并记录测定结果。 1.3.2烘烤、干燥灭酶方法比较 取其中90g分成均匀3份，用微波炉高火档分别烘烤灭酶5min、15min、30min，观察效果。100g粉碎过3号筛后置烘箱(80℃)干燥灭酶2h。随时观察效果。 1.3.3考察是否搅拌对提取的影响 取4份日喀则青稞粉，每份40g，编号为1、2、3、4，按料水比1∶22加水，并调PH8.0，1、2水浴提取(不搅拌)1.5h，3、4搅拌提取(搅拌器)提取1.5h，放冷，离心。得上清液。新配制100u/ml耐高温a-淀粉酶液，调上清液PH值为6.0，水浴温度为90-95℃，加入新配制的耐高温a-淀粉酶液5ml，去淀粉30min，碘液检查不含淀粉为止，冷却至室温。调PH为4.5，冷藏过液，离心，得上清液。调PH8.0，加0.25g胰酶(溶解后加入)，47℃酶解2.5h。离心得上清液。上清液调PH为7.0，加入乙醇至含醇量为70％，冷藏过夜。干燥沉淀，测定含量并记录测定结果。 1.3.4考察加热回流灭酶方法 本次实验考察青稞提取前经95％乙醇加热回流处理对葡聚糖提取效果影响。 称取青稞粉适量，按1∶6倍量加95％乙醇加热回流2h，所得青稞渣挥乙醇后干燥，分成三份，每份30g。按料液比1∶22加水，20％碳酸钠溶液调PH为8.0，于70℃水浴提取1.5h，离心得上清液。调PH为6.0，按4u/g加入耐高温a-淀粉酶，于90～95℃水浴酶解30min。所得提取液加水至600ml，调PH为7.0。 分别精密量取1ml至25ml容量瓶，加适量水，于70℃水浴溶解完全，放置室温后加水至刻度，至冰箱冷藏。精密量取1ml至10ml量瓶，加水补至2ml，加4ml刚果红溶液反应10min，测最大吸收峰，545nm下吸收度。计算β-葡聚糖含量。 1.3.5考察青稞中β-葡聚糖的超声提取和煎煮水提方法 取青稞适量拣选除杂，适当破碎，称取两份，各100g，各加600ml95％乙醇浸渍过夜。倾浸渍液，取青稞加95％乙醇加热回流三次，每次1小时。滤出青稞，挥乙醇后干燥。两份分别为A 94g；B 93.1g。取A份，加1000mlPH8.5碳酸钠溶液，加入1/150倍的淀粉酶0.627g，于超声机(60℃～70℃)超声三次，每次1h。纱布过滤，冷藏。加稀盐酸调PH至4.5，加0.3g糖化酶，60℃水浴酶解40分钟。离心。取B份，加1000mlPH8.5碳酸钠溶液，加入1/150倍的淀粉酶0.627g，水提煎煮三次，每次1小时。纱布过滤，冷藏。加稀盐酸调PH至4.5，加0.3g糖化酶，60℃水浴酶解40分钟。离心。醇沉A、B至含醇量60％，静置过夜，过滤，取沉淀溶解月5倍量水，加20％硫酸铵，反应6小时，离心。所得沉淀用2倍量异丙醇洗涤2次，60℃真空干燥。 1.3.6考察水浴碱提和旋转碱提 取青稞适量拣选除杂，适当破碎，过2号筛，得215g青稞粉。加800ml80％乙醇，搅拌均匀，再加100ml80％乙醇，加热回流2小时。挥乙醇，得青稞粉，干燥。各取50g青稞粉共两份，分别加15倍水，调PH至8，80℃提取两次，每次1.5h，一份为水浴加热，一份旋转加热。纱布过滤，得滤液A、B。分别调PH为6，加1.69g淀粉酶65℃水浴0.5h，浓缩至250ml，再醇沉至含醇量75％，过夜。回收乙醇，沉淀真空干燥。 1.3.7考察耐高温α-淀粉酶加入量 称取青稞约1000g，拣选除杂。粉碎过3号筛后置烘箱(85℃)干燥灭酶1h，粉碎过本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种青稞中β－葡聚糖提取和纯化工艺，其特征是：按以下步骤顺次进行： ａ）、取青稞粉碎过６０目筛； ｂ）、８５℃干燥灭酶２小时，按料水比１∶２２加水； ｃ）、加碳酸钠调ＰＨ８．０，８０℃提取１．５ｈ，放冷，离心，得上清液； ｄ）、调上清液ＰＨ值为６．０，按４ｕ／ｇ加入耐高温ａ－淀粉酶，水浴温度为９０－９５℃进行酶解去淀粉３０ｍｉｎ，碘液检查不含淀粉为止，冷却至室温； ｅ）、调ＰＨ为４．５，冷藏过液，离心，得上清液。 ｆ）、调ＰＨ８．０，加０．２５ｇ胰酶（溶解后加入），４７℃酶解２．５ｈ，离心得上清液； ｇ）、上清液调ＰＨ为７．０，加入乙醇至含醇量为７０％，冷藏过夜； ｈ）、过滤得沉淀，沉淀加５０倍水溶解，加入乙醇至含醇量为７５％，冷藏过夜。 ｉ）、过滤得沉淀，冷冻干燥。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴志华，严冬，
申请(专利权)人：吴志华，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。