【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物检测，具体地说，涉及一种用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针及其应用。
技术介绍
1、神经性毒剂是一类剧毒的有机磷酸酯类化合物，包括塔崩(tabun)、沙林(sarin)、梭曼(soman)和维埃克斯(vx)。由于上述毒剂毒性较大，一般实验中使用氯磷酸二乙酯(dcp)来代替神经性毒剂。神经性毒剂主要通过抑制乙酰胆碱酯酶的活性，引起突触间隙乙酰胆碱酯酶蓄积，进一步使神经系统过度兴奋，最后引起人员死亡。全身性毒剂又称为氰化物，每年全世界有数十亿吨的氰化物用于工业生产，因此，快速检测神经性毒剂和氰化物对于维护公共安全、保障人民健康具有重要意义。
2、当前实际检测操作中，仍采用传统的分析方法，主要有质谱法、滴定法、色谱法、电化学法等。上述方法需要大型仪器支持，相关仪器不便携，很难满足常规防毒检测需求，例如在公共场合，如车站、机场等人员密集场所实现实时、快速的防毒检测，同时其检测限高，检测精度有限，且检测时间较长，难以在实际操作中推广。
3、近年来，小分子荧光探针技术的迅速发展让快速、灵敏的检测神经性毒剂和氰化物成为可能。近年来引起了广大研究者的兴趣，被广泛用于医药、化学及生物科学等领域，逐渐成为医学诊断、生命科学、环境科学领域不可或缺的研究手段。但是目前已报道的小分子荧光探针只能检测神经性毒剂或全身性毒剂，无法同时检测这两种速杀性毒剂。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针。
2、
3、为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
4、本专利技术的第一方面，提供了一种用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，结构通式如式i所示：
5、
6、其中，r1选自氢、c1～c5烷基；
7、r2选自氢、c1～c5烷基、
8、r3选自氢、c1～c5烷基；
9、或，r2与r1、c、n组成六元环；且r2与r3、c、n组成六元环。
10、较优选的，所述双靶标荧光探针中，
11、其中，r1选自氢、甲基、乙基；
12、r2选自氢、甲基、乙基、
13、r3选自氢、甲基、乙基；
14、或，r2与r1、r3组成的结构为以下基团：虚线表示连接位置。
15、最优选的，所述用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针的结构选自以下结构的一种：
16、
17、本专利技术的第二方面，提供了一种所述双靶标荧光探针在制备神经性毒剂荧光法检测试剂和/或氰化物荧光法检测试剂中的应用。
18、本专利技术的双靶标荧光探针不仅可以检测生物样本和环境样本中神经性毒剂和氰化物，还可以用于活细胞中神经性毒剂和氰化物浓度的检测。
19、所述应用中双靶标荧光探针作为神经性毒剂荧光法检测试剂，包括以下步骤：
20、将所述双靶标荧光探针溶液加入到待检样品溶液中，使所述双靶标荧光探针的终浓度为20μm，共孵育1min后，使用365nm激发，在582nm或596nm条件下记录溶液的荧光强度，以双靶标荧光探针溶液作为空白对照，如待检样品中含有神经性毒剂，在582nm或596nm条件下的荧光强度与空白对照比减弱，如待检样品中不含有神经性毒剂，在582nm或596nm条件下的荧光强度与空白对照比保持不变。
21、所述应用中双靶标荧光探针作为氰化物荧光法检测试剂，包括以下步骤：
22、将所述双靶标荧光探针溶液加入到待检样品溶液中，使所述双靶标荧光探针的终浓度为20μm，共孵育1min后，使用365nm激发，记录溶液在582nm、405nm处的荧光强度，或记录溶液在596nm、403nm处的荧光强度；
23、以双靶标荧光探针溶液作为空白对照，如待检样品中含有氰化物，在582nm条件下的荧光强度与空白对照比减弱，在405nm处的荧光强度增强；如待检样品中不含有氰化物，在582nm条件下的荧光强度与空白对照比保持不变，在405nm处的荧光强度与空白对照比保持不变；
24、或，以双靶标荧光探针溶液作为空白对照，如待检样品中含有氰化物，在596nm条件下的荧光强度与空白对照比减弱，在403nm处的荧光强度增强；如待检样品中不含有氰化物，在596nm条件下的荧光强度与空白对照比保持不变，在403nm处的荧光强度与空白对照比保持不变。
25、所述待检样品选自含有神经性毒剂的有机溶剂(如乙腈、二甲基亚砜、甲醇等)、含有神经性毒剂的土壤或含有神经性毒剂的生物活细胞。
26、所述神经性毒剂选自沙林、梭曼、塔崩、氯磷酸二乙酯、氰基磷酸二乙酯等。
27、所述待检样品选自含有氰化物的溶剂(如甲醇、水)、含有氰化物的土壤或含有氰化物的生物活细胞。
28、所述氰化物选自kcn。
29、本专利技术的第三方面，提供了一种所述双靶标荧光探针在制备神经性毒剂荧光法检测元件或氰化物荧光法检测元件中的应用。
30、所述神经性毒剂荧光法检测元件或氰化物荧光法检测元件选自荧光试纸条或试剂盒，所述荧光试纸条用于进行定性检测，所述试剂盒用于进行定量检测。
31、由于采用上述技术方案，本专利技术具有以下优点和有益效果：
32、本专利技术的双靶标荧光探针灵敏度高，对神经性毒剂的检测限达到5.5μm，对氰化物的检测限达到9.6nm。
33、本专利技术的双靶标荧光探针反应速度快，与神经性毒剂可以在10s内完成反应，与氰化物可以在1min内完成反应。
34、本专利技术的双靶标荧光探针选择性好，仅与神经性毒剂和氰化物进行反应，不与其他常见化学毒剂，如芥子气、路易斯剂等发生反应。
35、本专利技术的双靶标荧光探针能够同时对神经性毒剂和氰化物进行检测，且反应速率快。本专利技术的双靶标荧光探针与神经性毒剂反应后可显著淬灭荧光；本专利技术的双靶标荧光探针与氰化物反应后可引起荧光蓝移。
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1.一种用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，其特征在于，结构通式如式I所示：
2.根据权利要求1所述的用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，其特征在于，所述双靶标荧光探针中，
3.根据权利要求2所述的用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，其特征在于，所述用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针的结构选自以下结构的一种：
4.一种权利要求1至3任一项所述的双靶标荧光探针在制备神经性毒剂荧光法检测试剂和/或氰化物荧光法检测试剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用中双靶标荧光探针作为神经性毒剂荧光法检测试剂，包括以下步骤：
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用中双靶标荧光探针作为氰化物荧光法检测试剂，包括以下步骤：
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述待检样品选自含有神经性毒剂的有机溶剂、含有神经性毒剂的土壤或含有神经性毒剂的生物活细胞。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述待检样品选自含有氰化物的溶剂、含有氰化物的土壤或
9.一种权利要求1至3任一项所述的双靶标荧光探针在制备神经性毒剂荧光法检测元件或氰化物荧光法检测元件中的应用。
10.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述神经性毒剂荧光法检测元件或氰化物荧光法检测元件选自荧光试纸条或试剂盒。
...【技术特征摘要】
1.一种用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，其特征在于，结构通式如式i所示：
2.根据权利要求1所述的用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，其特征在于，所述双靶标荧光探针中，
3.根据权利要求2所述的用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针，其特征在于，所述用于检测神经性毒剂和氰化物的双靶标荧光探针的结构选自以下结构的一种：
4.一种权利要求1至3任一项所述的双靶标荧光探针在制备神经性毒剂荧光法检测试剂和/或氰化物荧光法检测试剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用中双靶标荧光探针作为神经性毒剂荧光法检测试剂，包括以下步骤：
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：孟文琪，张鑫月，肖凯，孙铭学，徐庆强，裴志鹏，毛冠超，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：
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