【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及黑曲霉培养，具体为一种黑曲霉固态培养及其制备方法。
技术介绍
1、固态发酵在生产工艺上更为简单，省去了部分预处理、回收纯化等步骤，整个生产过程中没有废水、废气产生，属于低投资、耗能低且高产的一种发酵方式。黑曲霉属丝孢目丛梗孢科曲霉属，是丛梗孢科中的一个常见种，具有发酵周期短、产酶量大、不产毒素等优点。因其能产生多种酶如纤维素酶、木聚糖酶、糖化酶等，使其成为工业微生物中常见的菌种之一。
2、目前制备黑曲霉麸曲的培养基采用单一的小粗麦麸皮，其培养基水分大约控制在65-70重量％左右，ph值大约在6.3-6.5之间，培养黑曲霉的周期较长，且液态产品发酵后，菌丝悬浮在液体培养基表面。另一类常见发酵形式为固态发酵，而现阶段固态发酵培养基成本较高，部分固态发酵过程中，菌种难以耐受烘干及后期低水分保存，从而菌量难以提高。为此，本专利技术提供了一种黑曲霉固态培养及其制备方法。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种黑曲霉固态培养及其制备方法，具备降低成本、效率高和存活时间长等优点，解决了培养黑曲霉的周期较长，且液态产品发酵后，菌丝悬浮在液体培养基表面。另一类常见发酵形式为固态发酵，而现阶段固态发酵培养基成本较高，部分固态发酵过程中，菌种难以耐受烘干及后期低水分保存，从而菌量难以提高的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，所述培养液分别取马铃薯180-220g、红薯190-230g，白
3、优选地，所述培养基的ph值为5.5-6。
4、优选地，所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间48h-96h，含水量30％-50％，营养液为白菜液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1-1:2。
5、优选地，所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间72h，含水量30％-50％，营养液为豆芽液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1-1:2。
6、优选地，所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间96h，含水量40％，营养液为马铃薯液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1-1:2。
7、优选地，所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间72h，含水量40％，营养液为马铃薯液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1.5。
8、一种黑曲霉固态培养方法，包括采用培养液和培养基进行黑曲霉固态培养的方法，所述培养方法具体如下：
9、1)菌种活化及扩培
10、黑曲霉接种于pda斜面培养基，置于30℃恒温培养箱培养3～5d至菌丝铺满整个斜面，利用磷酸缓冲液冲洗孢子制成孢子悬液，血球计数板调整孢子悬液浓度至1×108cfu/ml，备用；
11、2)固态培养
12、将马铃薯和红薯去皮，白菜、黄豆芽洗净，在分别称取200g的马铃薯、红薯、白菜和黄豆芽，切碎加水煮沸30min，之后采用双层纱布过滤，补水定容至1l，高压蒸汽灭菌后分别制作成马铃薯培养液、红薯培养液、白菜培养液和豆芽培养液，无菌操作加入10％的孢子悬液、培养液10ml、粗麦麸10g。在30℃培养箱培养3d，定时翻料。
13、优选地，所述固态培养完成之后进行菌种固态培养优化单因素试验；
14、采用单因素试验，分别考察培养液、粗麦麸/细米糠添加比例、含水量和培养时间对菌种固态培养后活菌数影响，确定单因素试验最佳水平。
15、优选地，所述固态培养完成之后进行正交试验设计；
16、在单因素试验的基础上，以培养时间(a)、含水量(b)、培养液(c)和粗麦麸/细米糠添加比例(d)为考察因素，以培养后活菌数变化值为指标，设计4因素3水平l9(34)的正交优化试验，以确定菌种固态培养的条件。
17、优选地，所述固态培养完成之后测定指标及方法；
18、采用平板计数法测量培养过程中活菌数，取1g样品、9ml生理盐水于试管中为10-1稀释液，稀释到一定倍数后，取100μl涂布平板计数。
19、与现有技术相比，本申请的技术方案具备以下有益效果：
20、1、本专利技术使用低廉的原料，简单的工艺方法，具有发酵菌量高、产品保存期长等特点。
21、2、本专利技术在研究培养基中，以廉价的农副产品简单的原料按一定的配比进行黑曲霉的培养配方简单，且价格便宜。
22、3、本专利技术在进行配方的研究中进行了一系列的实验，最后得出了最适合培养黑曲霉的配方，应用该培养基所得发酵菌量高、产物干燥后发酵菌的存活时间长等特点，同时培养简便易行、经济效果显著。
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1.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述培养液分别取马铃薯180-220g、红薯190-230g，白菜180-200g、黄豆芽200-240g制备成马铃薯液、红薯液、白菜液和豆芽液，所述培养基采用固态培养，铺设粗麦麸5-20g、细米糠8-30g，所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间48-96h，含水量30-50％，营养液为白菜液、马铃薯液和豆芽液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1、1:1.5和1:2，真空4℃保存60d。
2.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述培养基的pH值为5.5-6。
3.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间48h-96h，含水量30％-50％，营养液为白菜液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1-1:2。
4.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间72h，含水量30％-50％，营养液为豆芽液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1-1:2。
5.一种黑曲霉固态培养，包括培养
6.一种黑曲霉固态培养方法，包括采用权利要求1-5任一项所述培养液和培养基进行黑曲霉固态培养的方法，其特征在于：所述培养方法具体如下：
7.根据权利要求6所述的一种黑曲霉固态培养方法，其特征在于：所述固态培养完成之后进行菌种固态培养优化单因素试验；
8.根据权利要求7所述的一种黑曲霉固态培养方法，其特征在于：所述固态培养完成之后进行正交试验设计；
9.根据权利要求8所述的一种黑曲霉固态培养方法，其特征在于：所述固态培养完成之后测定指标及方法；
...【技术特征摘要】
1.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述培养液分别取马铃薯180-220g、红薯190-230g，白菜180-200g、黄豆芽200-240g制备成马铃薯液、红薯液、白菜液和豆芽液，所述培养基采用固态培养，铺设粗麦麸5-20g、细米糠8-30g，所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间48-96h，含水量30-50％，营养液为白菜液、马铃薯液和豆芽液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1、1:1.5和1:2，真空4℃保存60d。
2.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述培养基的ph值为5.5-6。
3.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征在于：所述黑曲霉固态培养的适宜条件为培养时间48h-96h，含水量30％-50％，营养液为白菜液，细米糠与粗粗麦麸比例分别为1:1-1:2。
4.一种黑曲霉固态培养，包括培养液和培养基，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：张蓉，陈超，朱二鹏，王开功，周碧君，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：
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