【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医学诊断，具体涉及一种代谢标志物在制备鉴定急性心肌梗死产品中的应用。
技术介绍
1、急性心肌梗死(acute myocardial infarction，ami)是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死，同样也是心源性猝死的主要原因。随着生活节奏的加快，饮食、生活习惯的改变，以及心理等因素的影响，急性心肌梗死的发病率逐年上升。许多患者在ami发生仅数小时之内，即可发生死亡。而ami超急性期或急性期引起的死亡，难以通过传统病理学方式进行鉴别，因此急性心肌梗死的鉴定是目前法医病理学鉴定的重点和难点。实现对急性心肌梗死的鉴别，在判断案件性质、划分责任等级方面起到了重要的作用，是法医领域的重要组成部分，有助于复杂案件更高效、严明、公正的处理。
2、目前法医学中已有的急性心肌梗死死因鉴别的方法，如四种标志物连用的免疫组化方法，该方法使用标志物较多、检测方法复杂；he染色等病理学方法，该方法判读结果通过观察得到，主观性较强；新兴的血管造影方法，该方法对样本完整性要求较高。因此，关于一种灵敏度高、所需样本量少、成本低、误差率低等优势的急性心肌梗死的鉴定目前并未有相关报道。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种代谢标志物在制备鉴定急性心肌梗死产品中的应用，该代谢标志物结合代谢组学具有灵敏度高、所需样本量少、成本低、误差率低等优势。
2、为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供一种代谢标志物在制备鉴定急性心肌梗死
4、优选的，利用所述代谢标志物构建的鉴别公式为：logit(p)＝22.278-0.778×a+53.630×b，其中a为dl-3,4-二羟基苯基二醇的相对表达量，b为his-lys的相对表达量。
5、优选的，利用所述鉴别公式的判定方式为：若logit(p)≥0.5，判定为非急性心肌梗死样本；logit(p)＜0.5，判定为急性心肌梗死样本。
6、优选的，所述dl-3,4-二羟基苯基二醇的相对表达量和his-lys的相对表达量是通过lc-ms/ms分析样本心肌组织代谢物和z-score标准化处理得到。
7、本专利技术提供一种以非疾病诊断目的的利用所述的代谢标志物鉴别急性心肌梗死的方法，包括如下步骤：(1)提取样本心肌组织代谢物，得样品提取物；(2)利用lc-ms/ms在负离子模式下分析样品提取物，获取dl-3,4-二羟基苯基二醇和his-lys的相对峰值强度；(3)使用z-score标准化处理dl-3,4-二羟基苯基二醇和his-lys的相对峰值强度，将标准化的dl-3,4-二羟基苯基二醇和his-lys相对表达量带入鉴别公式：logit(p)＝22.278-0.778×a+53.630×b，计算logit(p)；其中a为z-score标准化处理的dl-3,4-二羟基苯基二醇的相对表达量，b为z-score标准化处理的his-lys的相对表达量；(4)当logit(p)≥0.5，判定为非急性心肌梗死样本，logit(p)＜0.5，判定为急性心肌梗死样本。
8、优选的，lc-ms/ms在负离子模式下分析方法包括：(1)hilic分离：使用2.1mm×100mmacquy uplc beh 1.7μm柱分析样品提取物，同时以标准品qc为标品，在负离子模式中，流动相为a＝25mm乙酸铵水溶液和25mm氢氧化铵水溶液以及b＝乙腈；洗脱梯度为：85％b持续1min，并在11min内线性降低至65％，然后在0.1min内降低至40％并保持4min，然后在0.1min内增加至85％，并采用5min的重新平衡期；洗脱梯度的流速为0.5ml/min，柱温保持在25℃；(2)rplc分离：使用2.1mm×100mmacquy uplc hss t31.8μm柱分析样品提取物，同时以标准品qc为标品，在负离子模式下，流动相为a＝0.5mm的氟化铵水溶液和b＝乙腈；洗脱梯度为：1％b持续1.5min，在11.5min内线性增加至99％并保持3.5min。然后在0.1min内降低至1％，并采用3.4min的再平衡期；洗脱梯度的流速为0.3ml/min，柱温保持在25℃；(3)采用ab triple tof 6600质谱仪进行样本一级、二级谱图的采集，采用esi负离子模式进行检测，得dl-3,4-二羟基苯基二醇的相对峰值强度和his-lys的相对峰值强度。
9、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
10、本专利技术采用所述代谢标志物结合代谢组学的检测方式，具有所需样本量少、成本低的优势。相较于转录组、蛋白质组等组学而言，代谢组学具有较为完善的实验分析流程，其成本远低于其他组学，单个样本均需约200元。
11、本专利技术相较于目前法医学中已有的急性心肌梗死死因鉴别的方法，如四种标志物连用的免疫组化方法，本方法仅需要两种代谢物指标；相较于he染色等病理学方法，本方法采用二分类的逻辑回归算法；相较于染色结果的主观判读，本方法具有客观阈值线；相较于目前新兴的血管造影等方法，本方法检测心脏组织在发生急性心肌梗死后的代谢物，仅需要50mg心肌组织样本，对尸体完整性无明确要求。综上，本专利技术采用代谢标志物结合代谢组学的检测方法相较于目前已有方法更简便、精确，具有广泛应用场景、操作便捷、敏感度高等优点。
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1.一种代谢标志物在制备鉴定急性心肌梗死产品中的应用，其特征在于，所述代谢标志物包括DL-3,4-二羟基苯基二醇和His-Lys。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，利用所述代谢标志物构建的鉴别公式为：logit(P)＝22.278-0.778×a+53.630×b，其中a为DL-3,4-二羟基苯基二醇的相对表达量，b为His-Lys的相对表达量。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，利用所述鉴别公式的判定方式为：若logit(P)≥0.5，判定为非急性心肌梗死样本；logit(P)＜0.5，判定为急性心肌梗死样本。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述DL-3,4-二羟基苯基二醇的相对表达量和His-Lys的相对表达量是通过LC-MS/MS分析样本心肌组织代谢物和Z-score标准化处理得到。
5.一种以非疾病诊断目的的利用如权利要求1中所述的代谢标志物鉴别急性心肌梗死的方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，LC-MS/MS在负离子模式下分析方法包括：
【技术特征摘要】
1.一种代谢标志物在制备鉴定急性心肌梗死产品中的应用，其特征在于，所述代谢标志物包括dl-3,4-二羟基苯基二醇和his-lys。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，利用所述代谢标志物构建的鉴别公式为：logit(p)＝22.278-0.778×a+53.630×b，其中a为dl-3,4-二羟基苯基二醇的相对表达量，b为his-lys的相对表达量。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，利用所述鉴别公式的判定方式为：若logit(p)≥0.5，判定为非急...
【专利技术属性】
技术研发人员：方晨，熊若彤，周鹏，严江伟，孙文平，张佳，王俞杰，李敏，孟德萍，王昕宇，赵财成，王嘉慧，许晓群，于春江，魏然，
申请(专利权)人：山东第一医科大学山东省医学科学院，
类型：发明
国别省市：
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