抗体、连接子、负载物、缀合物及其应用制造技术

技术编号：41832435 阅读：18 留言：0更新日期：2024-06-27 18:16

本申请涉及一种用于靶向分子‑药物缀合物的抗体、负载物和连接子分子，以及其相应缀合物、制备和用途。

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本申请涉及生物制药领域，具体地说，涉及制备靶向分子-药物缀合物的抗体、负载物和连接子，以及其相应缀合物、制备方法和用途。

技术介绍

1、trop2是一种跨膜蛋白并且已发现，它在包括子宫内膜癌、前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、胃癌、口腔癌、神经胶质瘤在内的若干癌症类型中过表达，使其成为开发靶向疗法的天然候选物。trop2充当细胞自我更新、增殖和转化中的调控因子。实验显示，trop2可以促进肿瘤生长，而当trop2基因被敲除时，肿瘤细胞增殖会受到干扰。trop2的有限组织表达将降低治疗的毒性，这也是靶向trop2的疗法的优点。已经提出多种靶向trop2的adc，如ds-1062、trodelvy、bat8003。这些治疗剂显著提高trop2阳性癌症患者的存活率。

2、ds-1062是第一三共公司(daiichi sankyo)使用其专有的dxd adc技术开发的抗体缀合物。它是由连接至dxd的靶向trop2蛋白质的单克隆抗体构成。包括较多nsclc患者的数据显示，ds-1062展现出良好的剂量依赖性抗癌活性。随着剂量增加，越来越多的nsclc患者的肿瘤缩小。trodelvy是首个获fda批准的专门用于复发性或难治性转移性tnbc的adc，还是首个获fda批准的抗trop2 adc。它由连接至sn-38的靶向trop2的抗体组成，sn-38是化学治疗药物伊立替康(irinotecan)的活性代谢物。

3、然而，对于靶向trop2的新颖adc药物的需求量仍然很大，并且高安全性adc仍是新颖药物的一个开发方向。

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技术实现思路

1、在第一方面，提供一种式(i)化合物：

2、

3、其中

4、w是氢、lkb或-c2h4-(peg)t-(co)nh2；

5、y是氢或是lka-lkb；

6、条件是，w和y不同时是氢；

7、每个lka独立地选自opsu是或其混合物；

8、每个lkb独立地是l2―l1―b；

9、每个b独立地是端基r10，或以下1)、2)和3)的组合：1)自切除间隔子sp1；2)化学键，或选自以下的二价基团中的一者或者两者或更多者的组合：-cr1r2-、c1-10亚烷基、c4-10亚环烷基、c4-10亚杂环基和-(co)-；以及3)端基r10；

10、r10是氢，或是当与负载物中的基团反应时可离去的基团；

11、l1是包含可以被酶切割的氨基酸序列的可切割序列1，并且可切割序列1包含1-10个氨基酸；

12、l2是化学键；或是c2-20亚烷基，其中所述亚烷基中的一个或多个-ch2-结构任选地被-cr3r4-、-o-、-(co)-、-s(＝o)2-、-nr5-、-n⊕r6r7-、c4-10亚环烷基、c4-10亚杂环基、亚苯基置换；其中所述亚环烷基、亚杂环基和亚苯基各自独立地未被取代或被至少一个取代基取代，所述取代基选自卤素、-c1-10烷基、-c1-10卤烷基、-c1-10亚烷基-nh-r8和-c1-10亚烷基-o-r9；

13、ld2和每个ld1独立地是化学键；或选自-nh-c1-20亚烷基-(co)-、-nh-(peg)i-(co)-，或是天然氨基酸或聚合度为2-10的低聚天然氨基酸，所述天然氨基酸或低聚天然氨基酸独立地未被取代或其侧链被-(peg)j-r11取代；

14、-(peg)t-、-(peg)i-和-(peg)j-各自是peg片段，所述peg片段包含指定数量的连续-(o-c2h4)-结构单元或连续-(c2h4-o)-结构单元，所述结构单元在一端处具有可选的额外c1-10亚烷基；

15、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9各自独立地选自氢、卤素、-c1-10烷基、-c1-10卤烷基、c4-10亚环烷基；或

16、r1和r2与其所连接的碳原子一起形成3-6元环烷基；或

17、r3和r4与其所连接的碳原子一起形成3-6元环烷基；

18、r11是c1-10烷基；

19、m是1至3的任何整数；

20、n是2至20的任何整数；

21、d是0，或是1至6的任何整数；每个i独立地是0至100的整数，优选是0至20的整数；优选地，每个ⅰ独立地是0至12的整数；更优选是0至8的整数；具体地说是4；

22、每个j独立地是1至100的整数，优选是1至20的整数；优选地，每个j独立地是1至12的整数；更优选是8至12的整数；具体地说是8或12；

23、每个t独立地是1至100的整数，优选是1至20的整数；优选地，每个t独立地是1至12的整数；更优选是8至12的整数；具体地说是8或12。

24、在第二方面，提供一种具有式(ii)结构的化合物：

25、

26、其中

27、q是氢、-c2h4-(peg)t-(co)nh2或lkb―p；

28、m是氢或lka-lkb―p；

29、条件是，q和m不同时是氢；

30、p是负载物，所述负载物连接至式(i)化合物的b部分或l1部分；

31、n、d、ld1、ld2、t、lka和lkb如式(i)中所定义；

32、优选地，m是氢或lka-l2―l1―b―p；其中每个b独立地不存在，或是以下1)和2)的组合：1)自切除间隔子sp1；和2)化学键，或选自以下的二价基团中的一者或者两者或更多者的组合：-cr1r2-、c1-10亚烷基、c4-10亚环烷基、c4-10亚杂环基和-(co)-；

33、优选地，sp1选自pabc、缩醛、杂缩醛(heteroacetal)及其组合；更优选地，sp1是缩醛、杂缩醛或pabc；进一步优选地，所述杂缩醛选自n,o-杂缩醛；更优选地，sp1是-o-ch2-u-或-nh-ch2-u-；其中所述-o-或所述-nh-连接至可切割序列1，并且u不存在，或是o、s或nh，优选是o或s。

34、在第三方面，提供一种抗trop2抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)，其中

35、所述vh包含

36、(i)包含氨基酸序列s x1agmn的hcdr1，其中x1是n或a；

37、(ii)包含氨基酸序列wintdsgeptytddfkg(seq id no:10)或wintytgeptytddfkg(seq id no:8)的hcdr2；和

38、(iii)包含氨基酸序列ggfgssywyfdv(seq id no:11)的hcdr3；和/或

39、所述vl包含：

40、(i)包含氨基酸序列kasqdvsiava(seq id no:13)或kasqdvstava(seq id no:14)的lcdr1；

41、(ii)包含氨基酸序列sasyryt本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种具有式(III)的结构的缀合物：

2.根据权利要求1所述的缀合物，其中

3.根据权利要求1或2所述的缀合物，其中

4.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其中

5.根据权利要求1至4中任一项所述的缀合物，其中

6.根据权利要求5所述的缀合物，其中L1*选自C1-6直链亚烷基、C1-6分支链亚烷基、C3-6环状亚烷基和C3-4环状烷基-C1-2直链亚烷基，其中所述亚烷基和所述环状亚烷基各自独立地未被取代或被一个选自卤素、-OH和-NH2的取代基取代；优选地，L1*选自C1-4亚烷基，其中所述亚烷基未被取代或被一个选自卤素、-OH和-NH2的取代基取代；更优选地，L1*选自-CH2-、-C2H4-、其各自独立地未被取代或被至少一个选自卤素、-OH和-NH2的取代基取代；最优选地，L1*选自-CH2-、其中“#”标记与羰基连接的位置。

7.根据权利要求5至6中任一项所述的缀合物，其中a*是0。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的缀合物，其中R1*选自C1-6烷基、卤素；优选地，R1*是甲基或Cl。

9.根据权利要求5至8中任一项所述的缀合物，其中R2*选自C1-6烷基、卤素；优选地，R2*是F。

10.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其中所述负载物选自

11.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其中所述缀合物选自

12.根据权利要求1所述的缀合物，其中所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中

13.根据权利要求12所述的缀合物，其中

14.根据权利要求12或13所述的缀合物，其中所述VH包含与SEQ ID NO:21至25的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或

15.根据权利要求12至14中任一项所述的缀合物，其中所述抗体或抗原结合片段包含：重链恒定结构域(CH)，所述CH包含与SEQ ID NO:28的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或

16.根据权利要求12至15中任一项所述的缀合物，其中所述抗体或抗原结合片段以约0.5nM至约20nM的平衡解离常数(KD)结合至TROP2。

17.根据权利要求12所述的缀合物，其中所述抗体或抗原结合片段包含：重链，所述重链包含与SEQ ID NO:30至33的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或轻链，所述轻链包含与SEQ ID NO:34或SEQ ID NO:35的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列。

18.根据权利要求17所述的缀合物，其中所述抗体或所述抗原结合片段包含所述重链的C末端修饰和/或所述轻链的C末端修饰，由此使所述抗体、Sp和连接酶供体底物的识别序列依序连接；Sp是选自GA、GGGGS、GGGGSGGGGS和GGGGSGGGGSGGGGS的间隔子序列；所述连接酶供体底物的识别序列是LPXTGJ，其中X可以是任何单一天然或非天然氨基酸；J不存在，或是包含1-10个氨基酸的氨基酸片段。

19.根据权利要求18所述的缀合物，其中经过修饰的抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:30至33的重链和/或SEQ ID NO:40或SEQ ID NO:41的轻链；

20.根据权利要求1所述的缀合物，其中所述缀合物具有的药物与抗体比(DAR)是1至19的整数或非整数。

21.一种抗TROP2抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中

22.根据权利要求21所述的抗体或抗原结合片段，其中所述VH包含与SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:24的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或

23.根据权利要求21所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含：重链恒定结构域(CH)，所述CH包含与SEQ ID NO:28的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或

24.根据权利要求21所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段以约0.5nM至约20nM的平衡解离常数(KD)结合至TROP2。

25.根据权利要求21所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含：重链，所述重链包含与SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:32的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或轻链，所述轻链包含与SEQ ID NO:34或SEQ ID NO:35的氨基...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种具有式(iii)的结构的缀合物：

2.根据权利要求1所述的缀合物，其中

3.根据权利要求1或2所述的缀合物，其中

4.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其中

5.根据权利要求1至4中任一项所述的缀合物，其中

6.根据权利要求5所述的缀合物，其中l1*选自c1-6直链亚烷基、c1-6分支链亚烷基、c3-6环状亚烷基和c3-4环状烷基-c1-2直链亚烷基，其中所述亚烷基和所述环状亚烷基各自独立地未被取代或被一个选自卤素、-oh和-nh2的取代基取代；优选地，l1*选自c1-4亚烷基，其中所述亚烷基未被取代或被一个选自卤素、-oh和-nh2的取代基取代；更优选地，l1*选自-ch2-、-c2h4-、其各自独立地未被取代或被至少一个选自卤素、-oh和-nh2的取代基取代；最优选地，l1*选自-ch2-、其中“#”标记与羰基连接的位置。

7.根据权利要求5至6中任一项所述的缀合物，其中a*是0。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的缀合物，其中r1*选自c1-6烷基、卤素；优选地，r1*是甲基或cl。

9.根据权利要求5至8中任一项所述的缀合物，其中r2*选自c1-6烷基、卤素；优选地，r2*是f。

10.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其中所述负载物选自

11.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其中所述缀合物选自

12.根据权利要求1所述的缀合物，其中所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl)，其中

13.根据权利要求12所述的缀合物，其中

14.根据权利要求12或13所述的缀合物，其中所述vh包含与seq id no:21至25的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或

15.根据权利要求12至14中任一项所述的缀合物，其中所述抗体或抗原结合片段包含：重链恒定结构域(ch)，所述ch包含与seq id no:28的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或

16.根据权利要求12至15中任一项所述的缀合物，其中所述抗体或抗原结合片段以约0.5nm至约20nm的平衡解离常数(kd)结合至trop2。

17.根据权利要求12所述的缀合物，其中所述抗体或抗原结合片段包含：重链，所述重链包含与seq id no:30至33的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列；和/或轻链，所述轻链包含与seq id no:34或seq id no:35的氨基酸序列具有至少约90％序列同一性的氨基酸序列。

18.根据权利要求17所述的缀合物，其中所述抗体或所述抗原结合片段包含所述重链的c末端修饰和/或所述轻链的c末端修饰，由此使所述抗体、sp和连接酶供体底物的识别序列依序连接；sp是选自ga、ggggs、ggggsggggs和ggggsggggsggggs的间隔子序列；所述连接酶供体底物的识别序列是lpxtgj，其中x可以是任何单一天然或非天然氨基酸；j不存在，或是包含1-10个氨基酸的氨基酸片段。

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【专利技术属性】
技术研发人员：杨冬，胡明宇，孙亚军，宋鎬英，徐涵文，秦刚，
申请(专利权)人：启德医药科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：

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