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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种新型的蛋白质脱酰胺酶。
技术介绍
1、蛋白质脱酰胺酶是催化作用于作为高分子的蛋白质而脱酰胺化的反应的酶。蛋白质脱酰胺酶通过将蛋白质中的谷氨酰胺残基脱酰胺化而产生负电荷的羧基,因此针对蛋白质引起各种特性变化。例如,由蛋白质的等电点降低引起的水合力的增加和静电斥力的上升会使蛋白质间的相互作用降低(即,使缔合性降低),因此使蛋白质的可溶性和水分散性增大。另外,由于蛋白质的高级结构变化引起的内部疏水性区域的外露对蛋白质赋予表面活性,因此使蛋白质的乳化力、乳化稳定性、起泡性、泡沫稳定性提高。蛋白质脱酰胺酶能够如此使蛋白质的特性大幅变化,因此使蛋白质的用途显著增大。因此,蛋白质脱酰胺酶的有用性非常高,在该
受到了高的关注。
2、最初发现的蛋白质脱酰胺酶是2000年从解朊金黄杆菌(chryseobacteriumproteolyticum)中发现的蛋白质谷氨酰胺酶(非专利文献1)。然而,蛋白质谷氨酰胺酶,尽管其具有高实用性和被高度关注,但在此后约20年的长时间内没有新的发现,也是非常特殊的酶。在约20年后,从溃疡拟杆菌(bacteroides helcogenes)中发现了蛋白质谷氨酰胺酶(非专利文献2),但在2021年11月现在,产业利用的蛋白质谷氨酰胺酶仅来自解朊金黄杆菌(c.proteolyticum)。
3、现有技术文献
4、非专利文献
5、非专利文献1:a novel protein-deamidating enzyme from chryseobacteriu
6、非专利文献2:a novel protein glutaminase from bacteroides helcogenes-characterization and comparison,applied microbiology and biotechnology(2020)104:187-199
技术实现思路
1、专利技术所要解决的技术问题
2、作为本领域技术人员的一般技术常识,因为在报告了来自解朊金黄杆菌(c.proteolyticum)的蛋白质谷氨酰胺酶之后的长年时间内没有发现,因此认定具有蛋白质谷氨酰胺酶活性的蛋白质脱酰胺酶是自然界中几乎不存在的特殊的酶,在常规的筛选中无法得到。发现除了来自解朊金黄杆菌(c.proteolyticum)的蛋白质谷氨酰胺酶以外的具有蛋白质谷氨酰胺酶活性的蛋白质脱酰胺酶的例子仅一例,即,来自溃疡拟杆菌(b.helcogenes)的蛋白质谷氨酰胺酶,本领域技术人员对该酶的认识依然受到上述技术常识的约束。
3、其中,本专利技术的目的在于特意发现新的蛋白质脱酰胺酶。
4、用于解决技术问题的技术方案
5、本专利技术人为了发现新的蛋白质脱酰胺酶而进行了深入研究,但从与公知的蛋白质脱酰胺酶序列一致性高的候选中,完全没有发现具有蛋白质脱酰胺化活性的酶。然而,本专利技术人通过独特的方法进行了筛选,结果发现,尽管是与公知的蛋白质脱酰胺酶序列一致性低的蛋白质,但存在具有蛋白质脱酰胺化活性的酶。另外,在这样新发现的具有蛋白质脱酰胺化活性的酶中,还判明存在具有非常特殊的序列结构的酶,其构成活性中心的氨基酸残基之一不是半胱氨酸残基而是丝氨酸残基。本专利技术是基于这些见解而完成的。
6、即,本专利技术提供下述揭示的方式的专利技术。
7、项1.一种蛋白质脱酰胺酶,其包含下述(i)~(iii)中任一项所示的多肽:
8、(i)多肽,其包含(a)序列号1所示的氨基酸序列、或者(b)序列号1的第1位~第221位的氨基酸序列、(c)序列号1的第36位~第231位的氨基酸序列、或(d)序列号1的第36位~第221位的氨基酸序列;
9、(ii)多肽,其包含在所述氨基酸序列(a)~(d)中替换、添加、插入或缺失1个或多个氨基酸而成的氨基酸序列,且具有催化将蛋白质的谷氨酰胺残基脱酰胺化的反应的活性;
10、(iii)多肽,其包含相对于所述氨基酸序列(a)~(d)的序列一致性为70%以上的氨基酸序列,且具有催化将蛋白质的谷氨酰胺残基脱酰胺化的反应的活性。
11、项2.一种dna,其编码项1所述的蛋白质脱酰胺酶。
12、项3.一种表达盒或重组载体,其包含项2所述的dna。
13、项4.一种转化体,其是使用项3所述的表达盒或重组载体转化宿主而得到的。
14、项5.一种蛋白质脱酰胺酶的制造方法,其包含培养项4所述的转化体的工序。
15、项6.一种酶制剂,其包含项1所述的蛋白质脱酰胺酶。
16、项7.根据项6所述的酶制剂,其为含有蛋白质的饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原材料的改性剂。
17、项8.一种谷氨酰胺残基被脱酰胺化的蛋白质的制造方法,其包含使项1所述的蛋白质脱酰胺酶作用于蛋白质的工序。
18、项9.根据项8所述的制造方法,其中,在饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原材料中含有所述蛋白质。
19、项10.一种改性的饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原材料的制造方法,其包含使项1所述的蛋白质脱酰胺酶作用于含有蛋白质的饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原材料的工序。
20、专利技术效果
21、根据本专利技术,提供一种新的蛋白质脱酰胺酶。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种蛋白质脱酰胺酶,其特征在于,包含下述(I)~(III)中任一项所示的多肽:
2.一种DNA,其特征在于,编码权利要求1所述的蛋白质脱酰胺酶。
3.一种表达盒或重组载体,其特征在于,包含权利要求2所述的DNA。
4.一种转化体,其特征在于,是使用权利要求3所述的表达盒或重组载体转化宿主而得到的。
5.一种蛋白质脱酰胺酶的制造方法,其特征在于,包含培养权利要求4所述的转化体的工序。
6.一种酶制剂,其特征在于,包含权利要求1所述的蛋白质脱酰胺酶。
7.根据权利要求6所述的酶制剂,其中,所述酶制剂为含有蛋白质的饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原材料的改性剂。
8.一种谷氨酰胺残基被脱酰胺化的蛋白质的制造方法,其特征在于,包含使权利要求1所述的蛋白质脱酰胺酶作用于蛋白质的工序。
9.根据权利要求8所述的制造方法,其中,在饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原材料中含有所述蛋白质。
10.一种改性的饮食品或饮食品用原材料、产业用原材料、或者医药用原
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种蛋白质脱酰胺酶,其特征在于,包含下述(i)~(iii)中任一项所示的多肽:
2.一种dna,其特征在于,编码权利要求1所述的蛋白质脱酰胺酶。
3.一种表达盒或重组载体,其特征在于,包含权利要求2所述的dna。
4.一种转化体,其特征在于,是使用权利要求3所述的表达盒或重组载体转化宿主而得到的。
5.一种蛋白质脱酰胺酶的制造方法,其特征在于,包含培养权利要求4所述的转化体的工序。
6.一种酶制剂,其特征在于,包含权利要求1所述的蛋白质脱酰胺酶。
7.根据权利要求6所述的酶制剂,其中,所述...
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