【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物分析，具体涉及一种高效液相色谱法分离、测定产泰膏并检测其质量的方法。
技术介绍
1、产泰膏由川芎、当归、黄芪、炮姜、制何首乌5味中药制成，具有补虚扶正、益气养血、化瘀生新、促进产褥复旧等功效。主要用于治疗产后血性恶露不绝、流产后出血之气虚血瘀证。对妇女月经不调、痛经等症也有一定疗效。
2、产泰膏的现行质量标准中，采用薄层色谱法分别对三味药材及主要组分进行鉴别，采用蒸发光测定了黄芪甲苷的含量。然而中药多成分的复杂性决定了单一成分难以准确表达中药的内在质量，现有质量标准难以全面反映中药所含成分，无法从整体上表征中药产品的质量。且现有技术中也无相关专利或文献资料公开了对产泰膏中所有中药成分进行检测的方法。因此，为使该制剂的检测手段更严密和科学，有必要对产泰膏的检测方法展开新的探索。
3、指纹图谱能全面反映中药所含成分，可从整体上表征中药产品的质量，是一种理想的分析中药成分的方法，能够更全面有效地控制产泰膏的质量。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提出了一种分离产泰膏中1-9种组分的方法、一种产泰膏指纹图谱检测方法，以及一种检测产泰膏质量是否合格的方法。本专利技术方法能够更加全面有效地控制产泰膏的质量，为进一步评价和研究制剂的质量提供科学依据。
2、本专利技术的目的之一在于提供一种利用高效液相色谱法分离产泰膏中1-9种组分的方法，该方法可以在65分钟内或大于65分钟的时间实现产泰膏中9种已知组分的分离，为后续产品的质量评价提供了技
3、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
4、利用高效液相色谱法分离产泰膏中1-9种组分的方法，所述组分包括毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷、洋川芎内酯i、洋川芎内酯h、6-姜辣素、洋川芎内酯a、大黄素、藁本内酯中的任一种或多种；所述高效液相色谱法的色谱柱是采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填料，流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为磷酸溶液，流动相b为乙腈；通过线性梯度洗脱将产泰膏中任一种或多种组分进行分离。
5、产泰膏由川芎、当归、黄芪、炮姜、制何首乌5味中药组成，其中，黄芪中含有毛蕊异黄酮葡萄糖苷；当归及川芎中含有阿魏酸、洋川芎内酯i、洋川芎内酯h和洋川芎内酯a、藁本内酯；制何首乌中含有2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷和大黄素；炮姜中含有6-姜辣素。
6、进一步，各组分洗脱顺序为：毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷、洋川芎内酯i、洋川芎内酯h、6-姜辣素、洋川芎内酯a、大黄素、藁本内酯。
7、进一步，根据上述洗脱顺序，可以对各组分进行定性。
8、进一步，分离时间为65分钟。
9、进一步，所述梯度洗脱的程序设置如下：
10、0～5min内，流动相a的体积分数为85％～95％，流动相b的体积分数为15％～5％；
11、5～24min内，流动相a的体积分数为95％～75％，流动相b的体积分数为5％～25％；
12、24～30min内，流动相a的体积分数为85％～65％，流动相b的体积分数为15％～35％；
13、30～65min内，流动相a的体积分数为80％～5％，流动相b的体积分数为20％～95％。
14、作为优选，所述梯度洗脱的程序设置如下：
15、0～5min内，流动相a的体积分数为90％，流动相b的体积分数为10％；
16、5～24min内，流动相a的体积分数为90％～79％，流动相b的体积分数为10％～21％；
17、24～30min内，流动相a的体积分数为79％～73％，流动相b的体积分数为21％～27％；
18、30～65min内，流动相a的体积分数为73％～10％，流动相b的体积分数为27％～90％。
19、进一步，所述磷酸溶液的浓度为0.03-0.08vol％，优选为0.05vol％。
20、进一步，流动相流速为0.5-1.5ml/min，优选为1.0ml/min；柱温为25-35℃，优选为30℃。
21、作为优选，色谱柱采用中谱科技rd-c18色谱柱。
22、作为优选，色谱柱长度为250mm，色谱柱内径为4.6mm，填料粒径为5μm。
23、作为优选，进样量为20μl。
24、本专利技术的目的之二在于提供一种产泰膏指纹图谱的检测方法，该方法可以对产泰膏中多种组分进行定性，为后续产泰膏的质量评价提供了技术支持。
25、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
26、产泰膏指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：
27、(1)配制样品溶液和参照物溶液；
28、(2)采用前述分离方法分别分析步骤(1)配制的样品溶液和参照物溶液；分离后采用检测波长为260nm-300nm的检测器进行检测，并得到色谱图。
29、作为优选，检测波长为280nm。
30、进一步，样品配制溶剂为浓度为70vol％的甲醇溶液。
31、作为优选，待测溶液配制方法如下：
32、(1)待测样品溶液：取产泰膏样品，混匀，精密称定如1g-2g，置具塞锥形瓶中，精密加入70vol％甲醇如25ml，称重，超声处理30-60min，放冷，用70vol％甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即为样品溶液。
33、(2)参照物溶液：参照物溶液为每1ml分别含10μg阿魏酸和50μg2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷的70vol％甲醇溶液。
34、进一步，各组分保留时间由短到长依次为：毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷、洋川芎内酯i、洋川芎内酯h、6-姜辣素、洋川芎内酯a、大黄素和藁本内酯。
35、可以根据保留时间的先后对各组分进行定性。
36、进一步，将所述参照物溶液和样品溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经全谱峰匹配，得到样品溶液的指纹图谱；所述指纹图谱包括11个共有峰；经与对照品比对，指认出其中9个指标性成分，分别为：2号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，3号峰为阿魏酸，4号峰为2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷，5号峰为洋川芎内酯i，6号峰为洋川芎内酯h，8号峰为6-姜辣素，9号峰为洋川芎内酯a，10号峰为大黄素，11号峰为藁本内酯。
37、进一步，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷为参照峰，其出峰时间与对照品的保留时间保持一致；相对保留时间在0.843～1.031的是毛蕊异黄酮葡萄糖苷；相对保留时间在0.866～1.058的是3号峰为阿魏酸；相对保留时间在1.149～1.405的是5号峰为洋川芎内本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.利用高效液相色谱法分离产泰膏中1-9种组分的方法，其特征在于，所述组分包括毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、6-姜辣素、洋川芎内酯A、大黄素、藁本内酯中的任一种或多种；所述高效液相色谱法的色谱柱是采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填料，流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为磷酸溶液，流动相B为乙腈；通过线性梯度洗脱将产泰膏中任一种或多种组分进行分离。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序设置如下：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸溶液的浓度为0.03-0.08vol％。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相流速为0.5-1.5mL/min；柱温为25-35℃。
5.产泰膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，样品配制溶剂为浓度为70vol％的甲醇溶液。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将所述参照物溶液和样品溶液
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β
9.检测产泰膏质量是否合格的方法，其特征在于，包括如下步骤：
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述对照指纹图谱是通过将多个批次的待测样品溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经全谱峰匹配后，用平均数法生成计算产泰膏对照指纹图谱；所述平均数法采用的时间窗为0.1min。
...【技术特征摘要】
1.利用高效液相色谱法分离产泰膏中1-9种组分的方法，其特征在于，所述组分包括毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-d-葡萄糖苷、洋川芎内酯i、洋川芎内酯h、6-姜辣素、洋川芎内酯a、大黄素、藁本内酯中的任一种或多种；所述高效液相色谱法的色谱柱是采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填料，流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为磷酸溶液，流动相b为乙腈；通过线性梯度洗脱将产泰膏中任一种或多种组分进行分离。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序设置如下：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸溶液的浓度为0.03-0.08vol％。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相流速为0.5-1.5ml/min；柱温为25-35℃。
5.产泰膏指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，样品配制溶剂为浓度为70vol％的甲醇...
【专利技术属性】
技术研发人员：李红亮，罗盛，罗诗遂，彭涛，董自亮，刘世琪，万荣国，原欢欢，官柳，安太勇，
申请(专利权)人：太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，
类型：发明
国别省市：
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