【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，具体涉及全人源的抗bcma抗体或其抗原结合片段及其制备方法和应用。
技术介绍
1、bcma(b cell maturation antigen，b细胞成熟抗原)是肿瘤坏死因子受体(tnf-receptor)超家族的成员，由184个氨基酸残基组成，能够与b细胞激活因子baff(b-cellactivating factor belong to tnf family)或增殖诱导配体(aproliferation inducedligand，april)两种配体相结合。bcma主要表达于成熟的b淋巴细胞和浆细胞表面，在其他的正常组织细胞中均不表达。但研究发现，bcma高度表达于多发性骨髓瘤细胞系，对骨髓瘤细胞的恶性增生起了重要的促进作用，这使得bcma作为治疗多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，mm)的靶点，以开发单抗、抗体偶联药物、双特性抗体、car-t等疗法。
2、多发性骨髓瘤是一种常见的恶性血液疾病，其主要病状是骨髓内成熟浆细胞无限度的恶性增殖，进而导致骨骼破坏、骨髓衰竭和肾脏损伤。目前多发性骨髓瘤为血液系统第二大恶性肿瘤，占血液系统恶性肿瘤的10％，其发病率也随年龄的增长逐年增高。针对mm的治疗，传统的治疗方法如蛋白酶抑制剂和免疫调节剂虽表现出了很好的疗效，但依旧没有解决病患复发率高和药物有效清除率低等问题。因此开发治疗该疾病的新疗法至关重要。
3、抗体作为靶向治疗药物在治疗肿瘤及自身免疫系统疾病中已被证明是一种可靠及有效的选择。而作为小分子抗体的代表，单链抗体(sin
4、因此，开发一种新型的抗bcma的单链抗体或单域抗体，对多发性骨髓瘤的治疗具有重要意义。此外，将抗体应用于制备嵌合抗原受体，在制备预防和/或治疗和/或诊断肿瘤的药物领域具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
技术实现思路
1、本专利技术通过构建全人源噬菌体展示文库，筛选并鉴定出全人源特异性的靶向bcma的抗体，并制备得到对应的抗bcma的vh抗体和/或单链抗体，其不仅具备与抗原优异的结合能力，同时避免了动物免疫而造成的排斥反应，更适应于人体内环境从而有利于其最大化的发挥作用。与单克隆抗体相比，本专利技术制备的靶向bcma的抗体具有分子量小、组织穿透性好、免疫原性低、不需要糖基化修饰即可形成有功能的抗体分子、易于基因工程改造和抗体融合蛋白表达等优点；与现有抗体相比，本专利技术制备的抗bcma抗体或其抗原结合片段特异性强，可与bcma抗原蛋白特异性结合，并具有优异的亲和力；能够有效结合bcma阳性靶细胞，可进一步应用于bcma相关肿瘤或病症的诊断、治疗和预防中，尤其多发性骨髓瘤的治疗或早期诊断试剂的开发。
2、本专利技术的第一方面，提供了一种抗bcma抗体或其抗原结合片段，所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段包含重链可变区的cdr-h1～cdr-h3和/或轻链可变区的cdr-l1～cdr-l3。
3、所述的cdr-h1～cdr-h3包含seq id no：1-3、seq id no：4-6、seq id no：7-9、seqid no：10-12、seq id no：13-15或seq id no：16-18，或包含与seq id no：1-3、seq id no：4-6、seq id no：7-9、seq id no：10-12、seq id no：13-15或seq id no：16-18具有至少80％同一性的氨基酸序列。
4、所述的cdr-l1～cdr-l3包含seq id no：19-21、seq id no：22-24或seq id no：25-27，或包含与seq id no：19-21、seq id no：22-24或seq id no：25-27具有至少80％同一性的氨基酸序列。
5、优选的，所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段为重链可变区单域抗体(heavychain variable domain，vh)或单链抗体scfv(single chain variable fragment，scfv)。
6、优选的，所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段还包含如fab、fab’、fab’-sh、fv、scfv、(fab’)2、单结构域抗体、双抗体(dab)或线性抗体的片段。
7、本专利技术的第二方面，提供了一种抗bcma抗体或其抗原结合片段，该抗bcma抗体或其抗原结合片段为vh抗体，所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段包含重链可变区的cdr-h1～cdr-h3。
8、优选的，所述的cdr-h1～cdr-h3包含seq id no：1-3、seq id no：4-6或seq idno：7-9，或包含与seq id no：1-3、seq id no：4-6或seq id no：7-9具有至少80％同一性的氨基酸序列。
9、进一步优选的，所述的cdr-h1～cdr-h3为seq id no：1-3或与seq id no：1-3具有至少80％同一性的氨基酸序列。
10、进一步优选的，所述的cdr-h1～cdr-h3为seq id no：4-6或与seq id no：4-6具有至少80％同一性的氨基酸序列。
11、进一步优选的，所述的cdr-h1～cdr-h3为seq id no：7-9或与seq id no：7-9具有至少80％同一性的氨基酸序列。
12、优选的，所述重链可变区的氨基酸序列包含seq id no：28、29或30所示，或包含与seq id no：28、29或30具有至少80％同一性的氨基酸序列。
13、进一步优选的，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no：28、29或30所示，或与seq id no：28、29或30具有至少80％同一性的氨基酸序列。
14、在本专利技术的一个具体实施方式中，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no：28所示。
15、在本专利技术的一个具体实施方式中，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no：29所示。
16、在本专利技术的一个具体实施方式中，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no：30所示。
17、优选的，所述的抗bcma抗体本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗BCMA抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段包含重链可变区的CDR-H1～CDR-H3和/或轻链可变区的CDR-L1～CDR-L3，所述的CDR-H1～CDR-H3包含SEQ ID NO：1-3、SEQ ID NO：4-6、SEQ ID NO：7-9、SEQ ID NO：10-12、SEQID NO：13-15或SEQ ID NO：16-18，或包含与SEQ ID NO：1-3、SEQ ID NO：4-6、SEQ IDNO：7-9、SEQ ID NO：10-12、SEQ ID NO：13-15或SEQ ID NO：16-18具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的CDR-L1～CDR-L3包含SEQ ID NO：19-21、SEQ ID NO：22-24或SEQ ID NO：25-27，或包含与SEQ ID NO：19-21、SEQ ID NO：22-24或SEQ ID NO：25-27具有至少80％同一性的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列包含SEQ
3.根据权利要求1-2任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述轻链可变区的氨基酸序列包含SEQ ID NO：34、35或36所示，或包含与SEQ ID NO：34、35或36具有至少80％同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段还包含柔性连接肽，所述的重链可变区与轻链可变区通过柔性连接肽连接。
5.根据权利要求1-4任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列包含SEQ ID NO：28、29、30、37、38或39所示，或包含与28、29、30、37、38或39具有至少80％同一性的氨基酸序列。
6.一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述的嵌合抗原受体的胞外结构域包含权利要求1-5任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段。
7.一种免疫细胞，其特征在于，所述的免疫细胞表达权利要求6所述的嵌合抗原受体。
8.一种CAR-T细胞，其特征在于，所述的CAR-T细胞包含权利要求1-5任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段。
9.权利要求1-5任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段、权利要求6所述的嵌合抗原受体、权利要求7所述的免疫细胞或权利要求8所述的CAR-T细胞在制备诊断、预防和/或治疗与BCMA表达相关的疾病的产品中的应用；
10.一种检测BCMA的方法，其特征在于，所述的方法包括将待检测样品与权利要求1-5任一所述的抗BCMA抗体或其抗原结合片段接触，然后检测BCMA与抗BCMA抗体或其抗原结合片段形成的复合物。
...【技术特征摘要】
1.一种抗bcma抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段包含重链可变区的cdr-h1～cdr-h3和/或轻链可变区的cdr-l1～cdr-l3，所述的cdr-h1～cdr-h3包含seq id no：1-3、seq id no：4-6、seq id no：7-9、seq id no：10-12、seqid no：13-15或seq id no：16-18，或包含与seq id no：1-3、seq id no：4-6、seq idno：7-9、seq id no：10-12、seq id no：13-15或seq id no：16-18具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述的cdr-l1～cdr-l3包含seq id no：19-21、seq id no：22-24或seq id no：25-27，或包含与seq id no：19-21、seq id no：22-24或seq id no：25-27具有至少80％同一性的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列包含seq id no：28、29、30、31、32或33所示，或包含与seq id no：28、29、30、31、32或33具有至少80％同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1-2任一所述的抗bcma抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述轻链可变区的氨基酸序列包含seq id no：34、35或36所示，或包含与seq i...
【专利技术属性】
技术研发人员：龙飞，
申请(专利权)人：广州因明生物医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。