【技术实现步骤摘要】
本申请涉及核酸提取裂解液，更具体地说，尤其涉及一种直裂法核酸提取试剂盒、应用、方法。
技术介绍
1、核酸提取纯化的方法有传统的酚—氯仿法、盐析法、滤膜离心柱法等。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，是生命的最基本物质之一，是作为一切分子生物学研究的基础，它可以帮助现代生命科学了解分析基础研究和疾病研究中的基因表达、识别新物种并深入了解进化过程、对人类动物和植物中引起传染病暴发的病原体进行监测和分类、诊断疾病如基因疾病-癌症-免疫学缺陷和跟踪对药物治疗的反应如在抗病毒治疗期间和之后监测病毒滴度。
2、开启生物学研究的第一步就是核酸提取，核酸提取是指利用物理、化学等方法将核酸从样品中分离出来的过程，分离得到高质量的核酸是分子生物学研究的关键步骤。核酸提取是生命科学研究、生物及时应用及基因诊断中非常重要的一项技术。目前，主流的核酸提取方法有硅胶膜吸附柱法、抗dna单克隆抗体的免疫亲和法、自动化平台广泛应用的磁珠法核酸提取方法等等，传统的核酸提取试剂盒提取的步骤繁复、时间长且成本高，不能满足实际的提取需求，无法做到高效提取核酸的效果。
3、现有的常见磁珠法和柱提法进行核酸提取的方法虽然取得了进步，但仍存在较多缺陷：
4、首先，磁珠法和柱提法提取核酸普遍使用的裂解液中通常含有蛋白酶k(如：cn105420229b、cn111206073b等)。
5、其次，现有技术的磁珠法核酸提取操作中，往往将样本的裂解和磁珠与dna的结合分步进行；而柱提法利用离心柱上有硅胶滤膜，在高盐低ph条件下，
6、磁珠法和柱提法提取核酸相对应的试剂盒往往包括独立分装的裂解液和结合液，而且对设备还有较高要求，这不仅使得核酸提取过程复杂需要多次转管，而且很大程度上增加了核酸污染的机率。
7、而传统的核酸提取裂解液提取率低，特别的，对于粪便、唾液、口腔粘膜等杂质较多的样本，很难获得高得率的核酸，且核酸质量难以满足后续相关检测所需。因此开发一种具有高效、污染少、操作简单方便、提取效率高等优势的核酸快速提取的裂解液及裂解方法对核酸的检测、研究和发展等具有重大意义。
技术实现思路
1、本申请旨在针对磁珠法和柱提法的转管多、设备要求高、成本高、操作复杂等缺点，针对传统的核酸提取裂解液核酸得率低、样本类型单一等不足，本申请克服上述现有技术的不足，提供一种直裂法核酸提取试剂盒。
2、本申请的另一目的在于提供一种核酸提取方法。
3、本申请的又一目的在于提供一种直裂法核酸提取试剂盒在提取dna中的应用。
4、本申请的技术方案是：
5、一种直裂法核酸提取试剂盒，所述直裂法核酸提取试剂盒包括裂解液；
6、所述裂解液包括以下组分：tris-hcl、二硫苏糖醇、吐温20、辛基苯基-聚乙烯二醇(np40)、triton x-100、gelatin a型明胶、chelex-100、ph调节剂及溶剂；
7、其中，所述tris-hcl浓度为0.2-2m；
8、其中，所述二硫苏糖醇浓度为100-500mm；
9、其中，所述吐温20的体积百分比含量为1％-5％；
10、其中，所述辛基苯基-聚乙烯二醇(np40)的体积百分比含量为0.5％-5％；
11、其中，所述triton x-100的体积百分比含量为1-3％；
12、其中，所述gelatin a型明胶的体积百分比含量为0.1％-2.0％；
13、其中，所述chelex-100的质量百分比含量为5％-15％；
14、其中，所述ph调节剂为盐酸；
15、其中，所述溶剂为无酶无菌水。
16、进一步的，所述裂解液ph为7-8。
17、一种前述的直裂法核酸提取试剂盒在生物样本中提取dna中的应用。
18、进一步的，所述生物样本为粪便或者唾液中的细胞。
19、一种直裂法核酸提取试剂盒的使用方法，包括如下步骤：
20、s1，往装有50ul-100ul样本悬液的1.5ml离心管中加入150ul-300ul本申请直裂法核酸提取裂解液，震荡混匀，室温反应5min；
21、s2，孵育结束，静置2min，小心吸取上清50-100ul至新的1.5ml离心管，得到裂解好的核酸能够直接用于下游实验。
22、本申请的有益效果在于：
23、第一，本申请提供的一种直裂法核酸提取试剂盒，在使用时，提取裂解液裂解过程操作简单快速无需加热，仅需在室温下反应5-10min内就可完成，且试剂中的非离子表面活性剂具有优异的渗透性和增溶性，可加强核酸的从蛋白上的解离。
24、第二，比较实施例一、二比较可知：本申请提供的直裂法核酸提取试剂盒核酸得率高于商用磁珠法提取试剂盒，本申请裂解液能够释放核酸，裂解液中gelatin a型明胶对裂解释放出来的核酸结合起到很好的保护作用，提取获得的核酸质量更好，且不会影响核酸提取结果，本专利技术所提取的核酸可应用于下游实验。本专利技术试剂盒稳定性高，操作便捷提取时间快，不仅节约时间成本减少污染同时还降低了对实验设备的要求。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种直裂法核酸提取试剂盒，所述直裂法核酸提取试剂盒包括裂解液；其特征在于，所述裂解液包括以下组分：Tris-HCl、二硫苏糖醇、吐温20、辛基苯基-聚乙烯二醇(NP40)、Triton X-100、Gelatin A型明胶、Chelex-100、pH调节剂及溶剂；
2.根据权利要求1所述的一种直裂法核酸提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液pH为7-8。
3.如权利要求1或2所述的一种直裂法核酸提取试剂盒在生物样本中提取DNA中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述生物样本为粪便或者唾液中的细胞。
5.如权利要求1或2所述的一种直裂法核酸提取试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种直裂法核酸提取试剂盒，所述直裂法核酸提取试剂盒包括裂解液；其特征在于，所述裂解液包括以下组分：tris-hcl、二硫苏糖醇、吐温20、辛基苯基-聚乙烯二醇(np40)、triton x-100、gelatin a型明胶、chelex-100、ph调节剂及溶剂；
2.根据权利要求1所述的一种直裂法核酸提取试剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：何东华，唐续，欧楚欣，刘怡，聂晶，
申请(专利权)人：广州雅睿生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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