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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于水产养殖领域,具体涉及一种杂色鲍hd-dmbt1基因及其在制备杂色鲍病理检测试剂中的应用。
技术介绍
1、杂色鲍俗称九孔鲍、九子螺,肉味鲜美,具有很高的营养价值,被称为海产“八珍之冠”,国内外市场紧俏,价格一直看好,也供不应求。杂色鲍是我国海水养殖的重要品种,目前鲍产量尚不能满足国内外市场的需求,市场潜力很大。但是近年来杂色鲍暴发性病害越来越多,造成巨大经济损失。许多杂色鲍养殖场的鲍苗发生大规模急性死亡脱落现象,导致多家养殖场颗粒无收。近年来,福建、广东养殖的杂色鲍经常出现“肌肉萎缩症”和“脓疱病”,死亡率达到80%以上,给杂色鲍养殖带来了巨大损失,目前广东、海南、广西等地养殖面积和规模大为缩小。现阶段,关于杂色鲍病害缺乏有效的监测方法和防控手段。因此,亟需开发杂色鲍病害监测技术,阻断病害爆发与传播,促进杂色鲍产业健康发展。
2、deleted in malignant brain tumors-1protein(dmbt1)属于富含半胱氨酸(srcr)清道夫受体的蛋白质超家族,关于杂色鲍dmbt1基因功能并不清楚,研究杂色鲍dmbt1基因功能有助于提高杂色鲍养殖病害监测与预防能力,增加养殖产量,提高养殖效益。
技术实现思路
1、本专利技术的第一个目的是提供一种杂色鲍hd-dmbt1蛋白。
2、所述的杂色鲍hd-dmbt1蛋白,其氨基酸序列如seq id no.2所示。
3、本专利技术的第二个目的是提供编码上述杂色鲍hd-dmbt1
4、优选,所述的杂色鲍hd-dmbt1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
5、本专利技术的第三个目的是提供上述杂色鲍hd-dmbt1基因作为生物标志物在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。
6、优选,是检测杂色鲍hd-dmbt1基因表达量的试剂在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。
7、优选,所述的检测杂色鲍hd-dmbt1基因表达量的试剂是定量pcr试剂。
8、优选,所述的定量pcr试剂,其定量引物是:hd-dmbt1-f:5’-gacccatccatctcgacgac-3’,hd-dmbt1-r:5’-tggtctgttgttgctggtgt-3’。
9、本专利技术的第四个目的是提供一种评价水产动物健康状态的病理检测试剂,含有检测上述杂色鲍hd-dmbt1基因表达量的试剂。
10、本专利技术的第五个目的是提供降低杂色鲍成活率的制剂,其含有降低杂色鲍hd-dmbt1基因表达的试剂。
11、所述的降低杂色鲍hd-dmbt1基因表达的试剂是hd-dmbt1基因的干扰dsrna。
12、所述的干扰dsrna,其沉默引物是hd-dmbt1-t7-f:taatacgactcactatagggaccaacgtcacgtacaacg和hd-dmbt1-t7-r:taatacgactcactataggtcgtacccaacaaacgtgaa。
13、所述的水产动物是杂色鲍。
14、本专利技术从杂色鲍中克隆到杂色鲍hd-dmbt1基因,该基因在外套膜、足、头、鳃、肝胰腺、肠道中都有表达,在不同胚胎发育期间均有表达,在面盘幼虫期表达量最大。在病原菌哈维弧菌感染后,hd-dmbt1基因表达量显著上调,与对照组相比,干扰杂色鲍hd-dmbt1后血细胞的吞噬活性显著下降。对hd-dmbt1进行干扰后再注射哈维弧菌活菌,杂色鲍血细胞对哈维弧菌的清除效率显著下降。与对照组相比,干扰杂色鲍hd-dmbt1后,存活率显著降低。hd-dmbt1基因可以反映机体健康情况,在杂色鲍病害监测中有重要的应用价值。
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1.杂色鲍Hd-DMBT1蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.编码权利要求1所述的杂色鲍Hd-DMBT1蛋白的杂色鲍Hd-DMBT1基因。
3.根据权利要求1所述的基因,其特征在于,所述的杂色鲍Hd-DMBT1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.权利要求2或3所述的杂色鲍Hd-DMBT1基因作为生物标志物在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,是检测杂色鲍Hd-DMBT1基因表达量的试剂在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的检测杂色鲍Hd-DMBT1基因表达量的试剂是定量PCR试剂。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的定量PCR试剂,其定量引物是:Hd-DMBT1-F:5’-GACCCATCCATCTCGACGAC-3’,Hd-DMBT1-R:5’-TGGTCTGTTGTTGCTGGTGT-3’。
8.一种评价水产动物健康状态
9.一种降低杂色鲍成活率的制剂,其特征在于,含有降低权利要求2或3所述的杂色鲍Hd-DMBT1基因表达的试剂。
10.根据权利要求9所述的制剂,其特征碍于,所述的降低杂色鲍Hd-DMBT1基因表达的试剂是Hd-DMBT1基因的干扰dsRNA;优选,所述的干扰dsRNA,其沉默引物是Hd-DMBT1-T7-F:TAATACGACTCACTATAGGGACCAACGTCACGTACAACG和Hd-DMBT1-T7-R:TAATACGACTCACTATAGGTCGTACCCAACAAACGTGAA。
...【技术特征摘要】
1.杂色鲍hd-dmbt1蛋白,其特征在于,氨基酸序列如seq id no.2所示。
2.编码权利要求1所述的杂色鲍hd-dmbt1蛋白的杂色鲍hd-dmbt1基因。
3.根据权利要求1所述的基因,其特征在于,所述的杂色鲍hd-dmbt1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4.权利要求2或3所述的杂色鲍hd-dmbt1基因作为生物标志物在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,是检测杂色鲍hd-dmbt1基因表达量的试剂在制备评价水产动物健康状态的病理检测试剂中的应用。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的检测杂色鲍hd-dmbt1基因表达量的试剂是定量pcr试剂。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的定量pcr试剂,其定量引物是:hd-d...
【专利技术属性】
技术研发人员:姚托,叶灵通,卢洁,付胜利,程长洪,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院南海水产研究所,
类型:发明
国别省市:
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