一种HPLC法分析分离盐酸依伐布雷定中间体光学异构体的方法技术

本发明专利技术公开了一种盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体分析与分离测定方法，采用纤维素类手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶剂为流动相的正相色谱法室温条件下进行分离，用该方法可以快速的分离分析盐酸依伐布雷定中间体以及含盐酸依伐布雷定中间体制剂的光学异构体杂质。

A HPLC method for the analysis and separation of optical isomers of the intermediate hydrochloride hydrochloride

The invention discloses a ivabradine hydrochloride intermediate and its optical isomers analysis and separation and determination method using cellulose chiral column, by adding a certain proportion of amine is mixed solvent as mobile phase of normal phase chromatography at room temperature were separated in the separation and analysis of ivabradine hydrochloride fast thunder fixed intermediate and optical isomer containing the ivabradine hydrochloride intermediate preparation of impurities by this method.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属涉及一种高效液相色谱法，尤其是一种分析分离盐酸依伐布雷定中 间体及其光学异构体的高效液相色谱法。
技术介绍
盐酸依伐布雷定为一种抗心绞痛药，有良好的抗心绞痛和抗心肌缺血作用， 中间体的分子式为C H15N(VHC1，化学名为(R)- (4,5-二甲氧基苯并环丁烷-1-基)甲胺盐酸盐，结构式为NH7 HCI该分子中含1个手性碳原子，在通过定向合成目标化合物盐酸依伐布雷定的过程 中需要控制其光学异构体的含量。对于盐酸依伐布雷定中间体的光学异构体杂质，在药物合成过程当中是需要 进行质量控制的。含手性碳原子的光学异构体的分离一直是手性药物合成和制剂 过程中质量控制的难点，实现盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体的分离在盐 酸依伐布雷定药物的合成和制剂过程的质量控制方面具有现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种分析分离盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构 体杂质的高效液相色谱方法，从而实现盐酸依伐布雷定中间体与其光学异构体杂 质的分离测定。申请人发现，以纤维素类手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶剂为流动 相低温条件下，可以将盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体进行有效分离，从 而可以准确控制盐酸依伐布雷定中间体的质量。本专利技术的方法能简单、快速、准确地分析分离盐酸依伐布雷定中问体及其光学异构体杂质。进一步地，选用纤维素类手性柱OJ-H (Daicel， 250mmx4.6mm' 5pm)，可 以获得更好的分析分离效果。OJ-H (Daicel， 250mmx4.6mm， 5pm)纤维素类手性柱是以对甲苯基甲酸酯键合纤维素为填料。进--歩地，本专利技术的正相溶剂选用正己烷和无水乙醇的混合溶剂。本专利技术时方法中的流动相选用体积比为50 :50~90 : io正己烷和异丙醇的混合溶剂。本专利技术的方法中的流动相中的胺选用二乙胺。 本专利技术所述的分析分离方法，可按照以下方法实现(1) 取盐酸依伐布雷定样品适量，用无水乙醇溶解样品，配制成每lml含盐 酸依伐布雷定0.1mg 0.5mg的样品溶液。(2) 设置流动相流速为0.4 1.2ml/min，最佳检测波长为288nm，色谱柱柱 温的最佳温度为室温。(3) 取(l)的样品溶液2-50pl注入液相色谱仪，完成盐酸依伐布雷定中间体 及其光学异构体的分析与分离。其中高效液相色谱仪岛津lC-10ATvp， SPD-M10Avp， SCl-10Avp， DGU-12A; 色谱柱OJ-H (Daicel， 4.6mmx250mm， 5pm)纤维素手性色谱柱；流动相正己烷-异丙醇-二乙胺=80 : 20 : 0.2;检测波长288nm; 流速1.0ml/min; 进样体积1(^1。本专利技术采用纤维素类OJ-H (Daicel， 4.6mmx250mm， 5nm)手性色谱柱， 能够有效的分析分离盐酸依伐布雷定及其光学异构体(杂质)；选择流动相溶解 样品，确保了溶液的稳定性；选择进样体积10nl，柱温为室温，提高了色谱峰的 对称性。本专利技术解决了含盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体的原料及制剂的 分析与分离问题，从而确保了盐酸依伐布雷定中间体及其制剂的质量可控。附图说明图1实施例1，正己烷-异丙醇-二乙胺=70 : 30 : 0.2的HPLC图；图2实施例2，正己烷-异丙醇乙胺=80 : 20 : o.i的hplc图;图3实施例3，正己垸-异丙醇-二乙胺=90 : 10 : 0.1的HPLC图; 图4实施例4，正己垸-异丙醇-二乙胺=50 : 50 : 0.2的HPLC图。具体实施例方式-实施例1仪器与条件高效液相色谱仪岛津lC-10ATvp， SPD-M10Avp， SCl-10Avp， DGU-12A; 色谱柱OJ-H (Daicel， 4.6mmx250mm， 5nm);流动相正己垸-异丙醇-二乙胺=70 :30 : 0.2;流速1.0ml/min; 检测波长288ran;进样体积10nl。实验步骤分别称取盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，置于25ml容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取盐酸 依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，分别置于2个25ml容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为盐酸依伐布雷定中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下盐酸依伐布雷定中间体主峰可以和异构体完全分离开 来，且盐酸依伐布雷定中间体主峰在8.3min左右。实施例2仪器与条件高效液相色谱仪岛津lC-10ATvp， SPD-M10Avp， SCl-10Avp， DGU-12A;色谱柱OJ-H (Daicel， 4.6mmx250mm， 5pm);流动相正己垸-异丙醇-二乙胺=80 : 20 : o.i;流速1.0ml/min; 检测波长288nm;进样体积1(^1。实验歩骤分别称取盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，置于25ml容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取盐酸 依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，分别置于2个25ml容量瓶中，加无 水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为盐酸依伐布雷定中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下盐酸依伐布雷定主峰可以和异构体完全分离开来，且盐 酸依伐布雷定中间体主峰在11.2min左右。实施例3仪器与条件高效液相色谱仪岛津lC-10ATvp， SPD-M10A甲，SCl-10Avp， DGU-12A; 色谱柱OJ陽H (Daicel, 4.6腿x250mm， 5pm);流动相正己烷-异丙醇-二乙胺=90 : io : o.i;流速1.0ml/min; 检测波长288nm;进样体积10^1。实验步骤分别称取盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，置于25ml容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取盐酸 依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，分别置于2个25ml容量瓶中，加无 水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为盐酸依伐布雷定中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下盐酸依伐布雷定主峰可以和异构体完全分离开来，且盐 酸依伐布雷定中间体主峰在21.7min左右。实施例4仪器与条件高效液相色谱仪岛津lC-10ATvp， SPD-M10Av; ， SCl-10Avp， DGU-12A;色谱柱OJ-H (Daicel， 4.6mmx250mm， 5,);流动相正己垸-异丙醇-二乙胺=50 :50 : 0.2;流速1.0ml/min; 检测波长288nm;进样体积10^1。实验步骤 '分别称取盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，置于25ml容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取盐酸 依伐布雷定中间体及其光学异构体各5mg，分别置于2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高效液相色谱法分析分离盐酸依伐布雷定中间体及其光学异构体的方法，其特征在于采用以纤维素类手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶剂为流动相，低温条件下进行分离。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：牟淑慧，
申请(专利权)人：北京德众万全药物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]