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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于鉴定检测领域,具体涉及一种基于实时定量pcr对小麦品种抗旱性进行鉴定的方法。
技术介绍
1、小麦是我国主要粮食作物,其生产量及品质受干旱影响显著。小麦抗旱性表现是由自身的遗传效应和环境因素共同制约的,作物在不同生长发育阶段对生物和非生物因素的敏感性不同,现有的抗旱性研究方法存在局限性,往往无法提供一个直接且准确的小麦抗旱性评价。目前,小麦抗旱性鉴定的方法有很多,主要包括田间鉴定法、人工模拟鉴定法、生理指标法、分子生物学鉴定法等。其中田间鉴定法是在不同的生长发育时期对作物生长形态进行鉴定,但也存在着环境因素(天气变化、土壤异质性等)、耗时耗力、收集处理数据复杂等多方面的制约;人工模拟鉴定法是指在人为控制条件下如温室、气候箱或实验室的环境中通过设置干旱条件来考察小麦的生长发育、生理过程或者产量结果,此方法无法完全复制自然环境中的干旱情况,且空间成本高,往往只能处理有限数量的样本影响到实验结果的普遍性和代表性;生理生化指标鉴定是指通过测量植物的生理和生化反应来评估其抗旱性,包括叶绿素含量、脯氨酸积累、抗氧化酶活性等,但是,这些理化指标的测定可能受到生长环境和生育阶段的影响,同时也可能因试剂使用和操作差异引入误差;而分子生物学鉴定法主要通过分子标记构建遗传图谱来定位小麦的抗旱基因,但抗旱性是由多个基因控制的复杂性状,尽管近些年研究了许多抗旱性qtl,但标记的多态性频率很低,单一qtl对表型的影响较小,且上位性效应难以评估,这使得基于分子标记的辅助选择需要进一步研究。因此,迫切需要开发新技术、发现新的标记物来解决这些问题。<
...【技术保护点】
1.一种基于实时定量PCR对小麦品种抗旱性进行鉴定的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述干旱胁迫处理时间为10天。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述干旱胁迫是控制育苗盘中培养基质的含水量低于18%。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用Trizol试剂提取小麦植株顶部叶片的总RNA。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用实时荧光定量PCR对提取的总RNA中TaNF-YA9基因表达量进行检测。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述实时荧光定量PCR进行检测时,所采用的反应体系每25μl中包括以下组分:12.5μlKOD FX PCR缓冲液、5μldNTPs、每10pmol正引物和反向引物各0.75μl、2.5μl模板cDNA、3μlddH2O和0.5μlKOD FX。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将提取的总RNA合成第一链cDNA;然后以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR检测。
【技术特征摘要】
1.一种基于实时定量pcr对小麦品种抗旱性进行鉴定的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述干旱胁迫处理时间为10天。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述干旱胁迫是控制育苗盘中培养基质的含水量低于18%。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用trizol试剂提取小麦植株顶部叶片的总rna。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用实时荧光定量pcr对提取的总...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵颖佳,张经廷,吕丽华,翟立超,张丽华,郑孟静,崔永增,董志强,姚艳荣,
申请(专利权)人:河北省农林科学院粮油作物研究所,
类型:发明
国别省市:
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