靶向BCMA的工程化免疫细胞及其用途制造技术

技术编号：41715049 阅读：2 留言：0更新日期：2024-06-19 12:42

本发明专利技术提供了靶向BCMA的工程化免疫细胞及其用途。具体地，本发明专利技术提供了一种特异性靶向BCMA的CAR，其包含的抗原结合结构域为S来源的scFv，具有SEQ ID NO:9所示的抗体重链可变区，和SEQ ID NO:10所示的抗体轻链可变区。本发明专利技术还提供了包含该CAR的CAR‑T细胞，以及包含S来源的scFv的双CAR和CAR T细胞及其相关应用。与利用其他scFv所构建的CAR‑T细胞相比，本发明专利技术构建的CAR‑T细胞具有更高的杀伤效果和肿瘤清除能力。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫治疗领域，更具体地涉及一种靶向bcma的工程化免疫细胞及其用途。

技术介绍

1、多发性骨髓瘤(mm)是一种恶性浆细胞肿瘤，其肿瘤细胞起源于骨髓中的浆细胞，而浆细胞是b淋巴细胞发育到最终功能阶段的细胞。多发性骨髓瘤基本是一个无法治愈的疾病，具有高发病率及高致死率的特征。在2017年的统计数据中，美国有3万例新诊断出来的多发性骨髓瘤患者，而可能12000例将面临死亡。目前多发性骨髓瘤常见疗法有细胞毒药物治疗，蛋白酶抑制剂(硼替佐米等)、来那度胺、单克隆抗体及皮质类固醇等。但是都是部分有效，不能持久缓解，复发的几率很大。因此，多发性骨髓瘤疗法的改进就显得尤为重要。

2、因此，本领域急切地需要一种有效、复发机率小且安全的多发性骨髓瘤疗法。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种靶向bcma的工程化免疫细胞及其用途。

2、本专利技术的另一目的是提供一种同时靶向cd19和bcma的工程化免疫细胞及其用途。

3、在本专利技术的第一方面，提供了一种嵌合抗原受体(car)或tcr，所述car或tcr的抗原结合结构域(scfv)包括seq id no:9所示的抗体重链可变区，和seq id no:10所示的抗体轻链可变区。

4、在另一优选例中，所述scfv还包含位于重链可变区和轻链可变区之间的连接肽。

5、在另一优选例中，所述scfv如下式a或式b所示：

6、vh-vl,(a)；vl-vh,(b)

7、式中，vh为所述抗体重链可变区；vl为所述抗体轻链可变区；“-”为连接肽或肽键。

8、在另一优选例中，所述的vh和vl之间的连接肽为1-4个连续的seq id no:7(ggggs)所示的序列，较佳地1-4个，更佳地3-4个。

9、在另一优选例中，所述car的结构如下式i所示：

10、l-scfv-h-tm-c-cd3ζ(i)

11、式中，

12、各“-”独立地为连接肽或肽键；

13、l为无或信号肽序列；

14、h为无或铰链区；

15、tm为跨膜结构域；

16、c为共刺激信号分子；

17、cd3ζ为源于cd3ζ的胞浆信号传导序列。

18、在本专利技术的第二方面，提供了一种双特异性car或tcr，所述双特异性car或tcr靶向bcma和第一靶点，

19、其中，所述双特异性car中的靶向bcma的抗原结合结构域(scfv)包括seq id no:9所示的抗体重链可变区，和seq id no:10所示的抗体轻链可变区。

20、并且，所述的第一靶点选自下组：

21、cd138、kappa light chain、nkg2d-ligands、taci、gprc5d、cd2、cd3、cd4、cd5、cd7、cd8、cd19、cd20、cd22、cd25、cd28、cd30、cd33、cd38、cd40、cd44v6、cd47、cd52、cd56、cd57、cd58、cd79b、cd80、cd86、cd81、cd123、cd133、cd137、cd151、cd171、cd276、cll1、b7h4、bcma、vegfr-2、egfr、gpc3、pmsa、ceacam6、c-met、egfrviii、erbb2/her2、erbb3、her-2、her3、erbb4/her-4、epha2、igf1r、gd2、o-acetyl gd2、o-acetyl gd3、ghrhr、ghr、flt1、kdr、flt4、flt3、cea、ca125、ctla-4、gitr、btla、tgfbr1、tgfbr2、tgfbr1、il6r、gp130、lewis、tnfr1、tnfr2、pd1、pd-l1、pd-l2、psca、hvem、mage-a、msln、ny-eso-1、psma、rank、rorl、tnfrsf4、tweak-r、ltpr、lifrp、lrp5、muc1、muc16、tcrα、tcrβ、tlr7、tlr9、ptch1、wt-1、robol、frizzled、ox40、notch-1-4、april、cs1、mage3、claudin 18.2、folate receptorα、folate receptorβ、gpc2、cd70、baff-r、trop-2、或其组合。在另一优选例中，所述双特异性car或tcr中包含靶向cd19的抗原结合结构域。

22、在另一优选例中，所述的第一靶点为cd19，并且所述双特异性car中的靶向cd19的抗原结合结构域(scfv)包括seq id no:11所示的抗体重链可变区，和seq id no:12所示的抗体轻链可变区。

23、在另一优选例中，所述的第一靶点为cd19，并且所述双特异性car中的靶向cd19的抗原结合结构域(scfv)包括seq id no:21-30中任一所示的抗体重链可变区，和seq idno:31-36中任一所示的抗体轻链可变区。

24、具体序列如下所示

25、seq id no:21所示的cd19抗体重链可变区(h9)

26、qvqlqesgpglvkpsetlsltctvsgvslpdygvswirqppgkglewlgviwgsettyynsalksrltiskdtsksqvslklssvtaadtavyycakhyyyggsyamdywgqgtlvtvss

27、seq id no:22所示的cd19抗体重链可变区(h1)

28、qvqlqesgpglvkpsqtlsltctvsgvslpdygvswirqppgkglewigviwgsettyynsalksrvtisvdtsknqfslklssvtaadtavyycarhyyyggsyamdywgqgttvtvss

29、seq id no:23所示的cd19抗体重链可变区(h8)

30、qvklqesgpglvkpsetlsltctvsgvslpdygvswirqppgkglewigviwgsettyynsalksrvtiskdtsksqvflklssvtaadtavyycakhyyyggsyamdywgqgtlvtvss

31、seq id no:24所示的cd19抗体重链可变区(h10)

32、qvklqesgpglvkpsetlsltctvsgvslpdygvswirqppgkglewlgviwgsettyynsalksrltiskdtsksqvflklssvtaadtavyycakhyyyggsyamdywgqgtlvtvss

33、seq id no:25所示的cd19抗体重链可变区(h2)

34、qvqlqesgpglvkpsqtlsltctvsgvslpdygvswirqppgkglewigviwgse本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于，所述CAR的抗原结合结构域(scFv)包括SEQID NO:9所示的抗体重链可变区，和SEQ ID NO:10所示的抗体轻链可变区。

2.如权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述scFv如下式A或式B所示：

3.一种双特异性CAR，其特征在于，所述双特异性CAR靶向BCMA和第一靶点，

4.如权利要求3所述的双特异性CAR，其特征在于，所述的第一靶点为CD19，并且所述双特异性CAR中的靶向CD19的抗原结合结构域(scFv)包括SEQ ID NO:11、21-30中任一所示的抗体重链可变区，和SEQ ID NO:12、31-36中任一所示的抗体轻链可变区。

5.如权利要求3所述的双特异性CAR，其特征在于，所述双特异性CAR的结构如下式II所示：

6.如权利要求3所述的双特异性CAR，其特征在于，所述双特异性CAR的结构如下式III或III’所示：

7.一种核酸分子，所述核酸分子编码权利要求1所述的CAR或权利要求3所述的双特异性CAR。

8.一种载

9.一种工程化的免疫细胞，所述的免疫细胞含有权利要求8所述的载体、或染色体中整合有外源的权利要求7所述的核酸分子、或表达权利要求1所述的CAR或权利要求3所述的双特异性CAR。

10.一种工程化的免疫细胞，所述免疫细胞含有外源的第一表达盒和第二表达盒，其中所述第一表达盒用于表达靶向第一靶点的第一CAR，所述第二表达盒用于表达靶向BCMA的第二CAR；

11.一种制剂，所述制剂含有权利要求1所述的CAR、权利要求3所述的双特异性CAR、或权利要求9或10所述的工程化的免疫细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

12.一种权利要求1所述的CAR、权利要求3所述的双特异性CAR、或权利要求9或10所述的工程化的免疫细胞的用途，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。

13.如权利要求12所述的用途，其特征在于，所述的药物或制剂通过杀伤具有克隆增值能力的肿瘤细胞治疗癌症或肿瘤。

14.如权利要求13所述的用途，其特征在于，所述的具有克隆增值能力的肿瘤细胞包括克隆形成细胞、肿瘤细胞前体细胞、肿瘤祖细胞。

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【技术特征摘要】

1.一种嵌合抗原受体(car)，其特征在于，所述car的抗原结合结构域(scfv)包括seqid no:9所示的抗体重链可变区，和seq id no:10所示的抗体轻链可变区。

2.如权利要求1所述的car，其特征在于，所述scfv如下式a或式b所示：

3.一种双特异性car，其特征在于，所述双特异性car靶向bcma和第一靶点，

4.如权利要求3所述的双特异性car，其特征在于，所述的第一靶点为cd19，并且所述双特异性car中的靶向cd19的抗原结合结构域(scfv)包括seq id no:11、21-30中任一所示的抗体重链可变区，和seq id no:12、31-36中任一所示的抗体轻链可变区。

5.如权利要求3所述的双特异性car，其特征在于，所述双特异性car的结构如下式ii所示：

6.如权利要求3所述的双特异性car，其特征在于，所述双特异性car的结构如下式iii或iii’所示：

7.一种核酸分子，所述核酸分子编码权利要求1所述的car或权利要求3所述的双特异性car。

8.一种载体，所述的载体含有权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张华，石欢，沈连军，曹卫，
申请(专利权)人：亘喜生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：

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