本发明专利技术涉及一种精氨酸基纳米递送平台的制备方法及其产品与应用，生物医学技术领域。精氨酸基纳米递送平台包括内层纳米复合物和外层肠溶聚合物；所述内层纳米复合物为OVA<subgt;257‑264</subgt;、anti‑PD‑L1抗体和精氨酸聚酯酰胺的纳米复合物。本发明专利技术基于精氨酸聚酯酰胺正电理化特性，构建聚酯酰胺纳米口服递送体系，并筛选出性能最佳精氨酸聚酯酰胺材料实现了蛋白药物高负载、高保护及可控释放。其制备过程不引入任何有机溶剂，有利于保持蛋白生物活性，且制备工艺易于大批量生产，具备转化潜力。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及纳米药物，尤其涉及一种精氨酸基纳米递送平台及其制备方法与应用。
技术介绍
1、近年来，针对难治愈恶性肿瘤的免疫药物研究增加，基于检查点抑制剂、免疫调节剂、癌症疫苗等免疫药物的疗法让肿瘤疾病患者们看到了治愈或增加生存率的新曙光。目前免疫药物的代表药物包括抗体类药物和抗原类药物，其中抗体类药物包括pd-1抗体药物(如pembrolizumab等)、pd-l1抗体药物(如medi4736、nivolumab)、ctla-4抗体(如medi6469、tremelimumab等)；抗原类药物如cea、muc1也已在多类型肿瘤治疗中得到应用。而相关免疫疫苗产品则包括imprime pgg、dcvax、avx701及her2疫苗等。
2、针对上述免疫药物，目前临床上主要采用的给药途径主要为注射方式。虽然注射方式能够直接的进行药物递送，但是容易引起机体全身性免疫反应，且不可避免会产生免疫毒副作用。由于免疫药物注射给药导致的严重相关不良反应(immune-related adverseevents，iraes)包括免疫相关性肺炎、免疫相关性心肌炎、免疫相关性神经毒性以及致死性腹泻等，危及患者的生命安全；另一方面，通过静脉注射抗原抗体的方式特异性并不高，尤其是针对消化道的末端及相邻组织的肿瘤，注射给药途径不如口服途径针对性强(例如结直肠癌)，因此，实现非侵入性同时避免引起非必要器官免疫反应十分重要。相比之下，口服免疫药物针对消化道的肿瘤治疗可能更具备优势，其易于实施，患者顺应性强，可极大提高患者的生活质量，减轻治疗痛苦。</p>3、目前，由于免疫药物(如治疗性抗原抗体)主要为蛋白样药物分子，具备较为复杂的结构及大分子量，难以逃避胃肠消化道的酸、酶攻击，其口服给药途径存在一定难度。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种具有高负载、高保护及可控释放的精氨酸基纳米递送平台的制备方法及其产品与应用。
2、为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
3、第一方面，本专利技术提供了一种精氨酸基纳米递送平台，所述精氨酸基抗原抗体共递送纳米平台包括内层纳米复合物和外层肠溶聚合物；所述内层纳米复合物为蛋白肽类药物和精氨酸聚酯酰胺材料的纳米复合物。
4、作为本专利技术产品的优选实施方式，所述精氨酸聚酯酰胺材料的分子结构如下式所示：
5、
6、其中y＝2-6，n＝14-24。
7、进一步地，所述精氨酸聚酯酰胺材料中，y＝2,3或6；优选的，所述精氨酸聚酯酰胺材料的分子式中y＝6。不同碳链长度的精氨酸聚酯酰胺(2ays，y＝2,3,6)具备不同的正电特性，正电范围在7-12mv；无论是碳链长较短(2a2s)、碳链长中等(2a3s)及碳链长较长(2a6s)的精氨酸聚合物材料均可与不同性质的蛋白/肽复合形成纳米粒，粒径分布在约150nm-600nm内不等。随碳链长度增长，精氨酸聚酯酰胺2a6s对于更大分子量蛋白(如anti-pd-l1抗体)的复合能力更强，可形成粒径范围更小，电荷凝聚更强的复合物，表明精氨酸聚酯酰胺2a6s聚合物可能更适用于作为多种蛋白/肽的通用结合平台，可应用于蛋白/肽类药物的多样化递送。
8、进一步地，所述精氨酸聚酯酰胺2a6s聚合物的分子式如下式所示:
9、其中n＝14-24。
10、
11、精氨酸聚酯酰胺的聚合度对纳米粒子载药性能有重要影响：包载药物需要一定长度的聚合物材料以充分包裹药物分子，若分子量太小即聚合度过低的材料不易载药；而对于聚合度过高的材料而言会影响其自身刚性，刚性对于和蛋白质进行复合是有一定需求的，聚合度过大可能影响其复合。随着y比例的升高，2ays的分子量会增大。本专利技术通过制备的精氨酸聚酯酰胺材料的聚合度n在14-24范围内的2ays聚合物，其分子量约在12000-19000范围内，在该范围下，能够获得载药能力佳的精氨酸聚酯酰胺材料。
12、作为本专利技术产品的优选实施方式，所述蛋白肽类药物包括胰岛素、牛血清白蛋白、抗炎肽、ova257-264或anti-pd-l1抗体中的至少一种。
13、优选的，所述蛋白肽类药物为ova257-264和anti-pd-l1抗体的组合。所述精氨酸聚酯酰胺材料与单一或组合蛋白肽药物、外层肠溶聚合物制备出粒径范围在1×102nm-1×105nm的精氨酸基纳米递送平台。
14、进一步地，所述ova257-264和anti-pd-l1抗体的浓度比为1.0mg/ml：(1.5-2.0)mg/ml；优选的，所述ova257-264和anti-pd-l1抗体的浓度比为ova257-264：anti-pd-l1抗体＝5.0mg/ml:8.0mg/ml，溶剂为pbs缓冲液。
15、作为本专利技术产品的优选实施方式，所述外层肠溶聚合物为聚丙烯酸树脂。优选地，所述外层肠溶聚合物为eudragit l100。所述eudragit l100为一种药用聚丙烯酸树脂，其结构中含有羧基，在水中很容易与碱生成盐而溶解。eudragit l100在ph大于6的溶液中溶解，因此在口服给药后能够在ph值较低的胃部环境中保持稳定。一旦到达肠道可以逐渐去除外层肠溶聚合物，包裹的内层纳米复合物最终抵达目标消化道环境(例如结肠)，实现免疫蛋白肽类药物的口服有效递送。
16、作为本专利技术所述产品优选实施方式，所述精氨酸聚酯酰胺材料为精氨酸聚酯酰胺2a6s聚合物；本专利技术选用精氨酸聚酯酰胺2a6s聚合物具有与抗原抗体复合最佳的能力，可作为通用的递送载体用于共载口服治疗。进一步地，选用的蛋白肽药物为ova257-264和anti-pd-l1抗体的组合与精氨酸聚酯酰胺2a6s聚合物、外层肠溶聚合物协同所制备的精氨酸基纳米递送平台命名为el@2a6s@anti-pd-l1/ova。
17、所述el@2a6s@anti-pd-l1/ova选择2a6s作为载体材料，其具备的正电特性与其他链长精氨酸聚酯酰胺材料相似，可有效促进口服给药的黏液层渗透，ova257-264抗原及anti-pd-l1抗体复合后，el@2a6s@anti-pd-l1/ova，有利于口服后消化道癌细胞高效摄取；与不经过肠溶聚合物修饰的纯内层纳米复合物相比，经肠溶衣修饰后可减少药物在胃部环境下的释放。
18、第二方面，本专利技术提供了一种精氨酸基纳米递送平台的制备方法，包括以下步骤：
19、(1)制备精氨酸聚酯酰胺材料水溶液，并将所述精氨酸聚酯酰胺材料水溶液与蛋白肽类药物于室温下混合后涡旋，进行静电力自组装，得到内层纳米复合物悬浮液；
20、(2)将步骤(1)所述内层纳米复合物悬浮液滴入连续搅拌的外层肠溶聚合物溶液中，室温下静置平衡后，得到精氨酸基纳米递送平台。
21、精氨酸聚酯酰胺(arg-peas)是一类基于l-精氨酸、脂肪二酸和二醇，通过缩聚反应形成的具有功能性酯键和酰胺键的生物可降解聚合物，由于其结本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述精氨酸基纳米递送平台包括内层纳米复合物和外层肠溶聚合物；所述内层纳米复合物为蛋白肽类药物和精氨酸聚酯酰胺材料的纳米复合物。
2.如权利要求1所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述精氨酸聚酯酰胺材料的分子式如下式所示：
3.如权利要求1所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述蛋白肽类药物包括胰岛素、牛血清白蛋白、抗炎肽、OVA257-264或anti-PD-L1抗体中的至少一种。
4.如权利要求3所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述蛋白肽类药物为OVA257-264和anti-PD-L1抗体的组合。
5.如权利要求1所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述外层肠溶聚合物为聚丙烯酸树脂。
6.一种精氨酸基纳米递送平台的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述精氨酸聚酯酰胺材料水溶液与蛋白肽类药物的质量比例为精氨酸聚酯酰胺材料水溶液：蛋白肽药物＝100：1。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述内层纳米复合物悬浮液：外层肠溶聚合物溶液的体积比为内层纳米复合物悬浮液：外层肠溶聚合物溶液＝1：5。
9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述精氨酸聚酯酰胺材料水溶液的制备方法包括以下步骤：
10.权利要求1-5任一项所述的精氨酸基纳米递送平台在制备肿瘤口服药物中的应用，其特征在于，所述肿瘤为肠癌。
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【技术特征摘要】
1.一种精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述精氨酸基纳米递送平台包括内层纳米复合物和外层肠溶聚合物；所述内层纳米复合物为蛋白肽类药物和精氨酸聚酯酰胺材料的纳米复合物。
2.如权利要求1所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述精氨酸聚酯酰胺材料的分子式如下式所示：
3.如权利要求1所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述蛋白肽类药物包括胰岛素、牛血清白蛋白、抗炎肽、ova257-264或anti-pd-l1抗体中的至少一种。
4.如权利要求3所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述蛋白肽类药物为ova257-264和anti-pd-l1抗体的组合。
5.如权利要求1所述的精氨酸基纳米递送平台，其特征在于，所述外层肠溶聚...
【专利技术属性】
技术研发人员：苗聪秀，吴钧，庄雅利，
申请(专利权)人：长治医学院，
类型：发明
国别省市：
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