本发明专利技术属于生物技术和医学领域，公开了一种胃癌标志基因Ｓ１００Ａ２及其用途，其可作为检测胃癌或胃癌组织转移的标志物。本发明专利技术还公开了检测胃癌标志基因的试剂或试剂盒及其用途。本发明专利技术首次发现并证实Ｓ１００Ａ２基因与胃癌或胃癌组织转移的密切相关性，并开发了可用于临床的试剂和试剂盒，从而为胃癌或胃癌组织转移的诊断或治疗提供了新的途径。
Molecular detection method and kit for gastric cancer and gastric cancer tissue metastasis
The invention belongs to the technical field of biology and medicine, and discloses a gastric cancer marker gene S100A2 and the use thereof, which can be used as a marker for detecting the metastasis of gastric cancer or gastric cancer tissue. The invention also discloses a reagent or reagent box for detecting gastric cancer marker gene and its use. The present invention is first found and confirmed the close relationship between S100A2 gene and gastric cancer or gastric cancer metastasis, and the development of reagents and kits can be used for clinical, provides a new way for the diagnosis or treatment of gastric cancer and gastric cancer metastasis.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术和医学领域；更具体的，本专利技术涉及一种胃癌标志基 因及其用途，检测胃癌标志基因的试剂或试剂盒及其用途。
技术介绍
在所有恶性肿瘤中，每年全世界胃癌死亡人数约650， 000人，致死率仅次于 肺癌，居于恶性肿瘤第二位。在中国，胃癌发病率和死亡率均居消化系统恶性肿瘤 的首位，每年死于胃癌者约36万人，占世界同期胃癌死亡人数的40%，五年生存 率仅5%-15%。目前中国临床诊断中多为症状性筛选，即出现腹部不适、隐痛、泛酸、嗳气 或消痩、黑便等症状后进行内镜、胃钡餐等检查，最终检出的胃癌绝大部分为进展 期胃癌。现有的诊断方法如血清学免疫检测通常使用的标志物如CEA、CA系列抗原， 普遍存在灵敏度低、特异性差，尤其是对早期胃癌检出率、有效性都很低。常用的 细胞学检测虽然低廉简便，灵敏度同样偏低，而影像学检测仅对有较大占位的恶变 肿瘤有很高的诊断率。中国是发展中的人口大国，经济条件欠发达，开展全民性的 胃癌普査筛选困难重重。目前临床最有效的诊断方法是胃镜结合病理的方法，具有较高的胃癌诊断率。 但由于绝大多数胃癌患者早期并无明显症状，约70%的病人就诊初期往往只有胃炎 症状而被接受质子泵抑制剂的抑酸疗法，这种疗法容易使病变边缘正常细胞增生并 掩盖恶变细胞，导致胃镜和胃镜取样组织后病理的观察存在较大的误诊/漏诊率。 日本等国因此规定胃镜下活检病理报告为中度不典型增生及以上患者，需重复多 次胃镜及活检为免延误诊断。这种方法既费人力、财力又增加患者的痛苦，难以在 中国推广。更重要的是，目前常规的胃镜检査和病理学诊断均基于形态学的判断， 对于操作人员的经验技术有较高的要求。在实际应用中，这种非客观、非标准化的 检测发生漏诊和误诊的现象不是少数，而且对有不典型增生、早期胃癌、胃癌进展 期等组织学特征进行的区分，目前尚难以有明确的界限。对于早期胃癌的判断标准， 临床上还是以手术切除后进行病理检查发现癌细胞为标准，缺乏在手术前的依据，这在很大程度上依赖与胃镜检查的医生的经验，难以做到标准化。客观上需要有在 胃镜下取材进行病理学检查时的辅助手段或指标，能够帮助医生进行胃癌尤其是早 期胃癌的判断，提高诊断的准确率，减少漏诊。其次，由于多数癌症患者临床确诊 时已属中晚期，如何用分子诊断方法进行手术后病人预后的监测和有效治疗方法的 选择，是改善预后的有效方法。发展具有高灵敏性、特异性强的胃癌分子诊断技术和产品，是提高中国胃癌 早期检出率、改善患者预后的关键之一。S100A2是EF-手性钙结合蛋白S100超家 族成员。Sl00蛋白是一组分子量10 12kD的钙结合蛋白，氨基酸序列在脊椎动物 中高度保守，目前共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位的可以调节细 胞内和细胞外Ca的S100蛋白。S100蛋白家族成员具有广泛的生物学活性，通过 钙离子信号转导、影响激素分泌和抑制微管蛋白的组装及抑制蛋白激酶C介导的磷 酸化等途径，在细胞增殖、分化、肌肉收縮、基因表达、分泌、及细胞凋亡中发挥 重要作用。多个S100家族成员被发现和人类癌症的发生发展相关，其中S100A2 在肿瘤中的作用和临床意义仍然存在一些争议。在乳腺癌S100A2通常下调表达， 以致被描述为潜在的肿瘤抑制基因。也有报道认为肺癌中S100A2下调或检测不到， 而其它一些研究认为肺癌中S100A2 mRNA和蛋白水平均呈现过表达，且和预后相关。 多项研究发现在宫颈癌、黑色素瘤、淋巴瘤、膀胱癌及皮肤上皮瘤中S100A2过表 达。S100A2在胰腺癌中过表达已发现和肿瘤进展、预后不良密切相关。综上，尽管已知然S100A2在某些肿瘤中有异常表达，然而本领域目前对 于S100A2在肿瘤中的作用仍然存在争议，且其在不同种类肿瘤中的作用也应 该是不同的，因此本领域迫切需要深入细致地研究和大规模验证S100A2与特 定肿瘤的相关性，并开发出可临床应用的检测试剂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种S100A2基因的用途，其可作为胃癌和胃癌组织 转移的标志基因。本专利技术的另一目的在于提供检测胃癌标志基因的试剂或试剂盒。在本专利技术的第一方面，提供一种S100A2基因的用途，用于制备检测胃癌或 胃癌组织转移的试剂或试剂盒。一种用于检测胃癌或胃癌组织转移的试剂(或材料)，所述的试剂选自下组4(1) S100A2基因或转录本的特异性引物；和/或(2) S100A2基因或转录本的特异性识别探针或表面固定有所述探针的芯片。 在另一优选例中，所述的试剂是引物，所述的引物是针对S100A2外显子的引物。在另一优选例中，所述的引物是针对S100A2基因的外显子2(Exon2)和外 显子3 (Exon3)的特异性引物(即扩增产物跨越外显子2和外显子3);或所述的引物是针对S100A2基因的外显子l(Exonl)和外显子2(Exon2)的特 异性引物(即扩增产物跨越外显子l和外显子2);或所述的引物是针对S100A2基因的外显子l(Exonl)和外显子3(Exon3)的特 异性引物(即扩增产物跨越外显子1和外显子3)。优选的，所述的引物是针对S100A2基因的外显子2和外显子3的特异性 引物。在另一优选例中，所述的特异性引物是具有SEQ ID NO: 1和SEQ ID NO: 2 所示的序列的引物对。在本专利技术的第二方面，提供前面任一所述的试剂(或材料)的用途，用于制备 检测胃癌或胃癌组织转移的试剂盒。在本专利技术的第三方面，提供一种检测胃癌或胃癌组织转移的试剂盒，所述的 试剂盒中含有前面任一所述的试剂。在另一优选例中，所述的试剂盒中还含有正常组织表达的S100A2基因或转 录本(优选mRNA)的参照品。在另一优选例中，所述的试剂盒中还含有核酸提取试剂；聚合酶联反应(PCR)试剂；或描述检测胃癌或胃癌组织转移的方法的说明书。在另一优选例中，所述的试剂装于容器中。在本专利技术的第四方面，提供一种检测受试者(优选体外检测)是否存在胃癌或 胃癌组织转移的方法，所述方法包括检测受试者组织样品中S100A2基因或转录 本(优选mRNA)的表达，若表达量在统计学上高于(如高2倍以上，优选高5倍以上，5更优选高10倍以上，最优选高30倍以上)正常水平，则该受试者存在胃癌或胃癌 组织转移。在另一优选例中，所述的组织样品选自外周血、骨髓、淋巴结、腹腔清洗 液、胃壁细胞或胃液。本专利技术的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而 易见的。附图说明图1显示了生物标记基因S100A2的序列，该基因包括三个外显子(Exon)，分 别称为Exonl、 Exon2和Exon3。图2显示了 S100A2在人体正常组织中的表达情况。所述组织包括除去红细胞 和血小板的外周血细胞、胃粘膜、心脏、肺、前列腺、脾、肾、肝、乳腺、子宫内 膜、膀胱和骨髓。图3显示了通过Real-time PCR技术评估S100A2基因在胃癌/癌旁组织中mRNA 表达比值。图4显示了通过Real-time PCR技术诊断胃镜下标本的胃癌或胃炎/正常粘膜 mRNA表达比值。图5显示了通过Real-time PCR检测胃癌在阳性淋巴结和阴性淋巴结中表达差异。图6显示了通过Real-time PCR检测外周血中游离胃癌细胞的准确度与细胞 学检测的对比。图7本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种Ｓ１００Ａ２基因的用途，其特征在于，用于制备检测胃癌或胃癌组织转移的试剂或试剂盒。
【技术特征摘要】
1. 一种S100A2基因的用途，其特征在于，用于制备检测胃癌或胃癌组织转移的试剂或试剂盒。2. —种用于检测胃癌或胃癌组织转移的试剂，其特征在于，所述的试剂选自 下组(1) S100A2基因或转录本的特异性引物；和/或(2) S100A2基因或转录本的特异性识别探针或表面固定有所述探针的芯片。3. 如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述的试剂是引物，所述的 引物是针对S100A2外显子的引物。4. 如权利要求3所述的试剂，其特征在于，所述的引物是针对S100A2基 因的外显子2和外显子3的特异性引物；或所述的引物是针对S100A2基因的外显子1和外显子2的特异性引物；或 所述的引物是针对S100A2基因的外显子1和外显子3的特异性引物。5. 如权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述的特异性引物是具有SEQID N0: 1和SEQ ID NO: 2...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈菲，
申请(专利权)人：苏州工业园区为真生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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