【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物能力验证，具体地说，是关于一种沙门氏菌能力验证样品及其制备方法。
技术介绍
1、能力验证是实验室外部质量控制的有效措施之一，是监测分析方法误差的一种有效的质量控制技术，也是计量认证和实验室认可的必备条件。实施微生物能力验证能够有效评估所参与实验室进行相关微生物检验的技术能力，对实验室质量控制有着非常重要的意义。
2、沙门氏菌是食源性致病菌中危害最大、最广泛的肠道致病菌之一，是引起食源性疾病的主要致病菌。从现行的食品安全国家标准来看，几乎所有食品类别的致病菌指标均包括对沙门氏菌项目的检验要求。但现有的沙门氏菌能力验证样品仍然存在样品中菌种稳定性较差、菌种的存活率不高、菌种组成属类单一、背景菌干扰能力不强而造成能力验证样品的检测难度不高等问题，从而使得沙门氏菌能力验证的作用大打折扣。
3、制备微生物能力验证样品的关键是保证样品的均匀性和稳定性，尽可能降低目标菌的变化(繁殖或死亡)，利用真空冷冻干燥技术能够在最大程度上防止干燥物质化学和生物性质的变化，对于细胞体损伤较少，减少活菌体的死亡，有效地保持了样品中微生物的数量及其生物学特性。沙门氏菌能力验证样品的均匀性和稳定性与冻干菌种的类别、冻干保护剂的组成、冻干的工艺条件等均有密切的关系。
技术实现思路
1、有鉴于现有沙门氏菌能力验证样品所存在的一些问题，本专利技术的目的在于提供一种目标菌存活率高、背景菌干扰能力强、均匀性和稳定性符合要求且制备工艺简单有效的沙门氏菌能力验证样品。
2、
3、所述目标菌为鼠伤寒沙门氏菌(salmonella typhimurium)；
4、所述背景菌群由奇异变形杆菌(proteus mirabilis)、产气肠杆菌(enterobacteraerogenes)和铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)组成。
5、进一步的，所述能力验证样品中，目标菌的目标浓度为1～3×102cfu/ml，背景菌群的目标浓度为1～3×104cfu/ml。
6、根据本专利技术，所述能力验证样品以大分子类、寡糖类、以及抗氧化剂类三类物质为冻干保护剂。
7、优选的，所述大分子类物质为脱脂乳粉，所述寡糖类物质为海藻糖，所述抗氧化剂类物质为抗坏血酸钠。
8、更优选的，按质量百分比计，所述冻干保护剂的组成如下：
9、脱脂乳粉：6～14wt％，海藻糖：3～7wt％，抗坏血酸钠：1～3wt％，余量为无菌水。
10、本专利技术的第二个方面，提供了所述的沙门氏菌能力验证样品的制备方法，包括以下步骤：
11、步骤一：菌株的复苏增菌
12、将目标菌和背景菌标准菌株分别接种到营养肉汤培养基中，在36℃±1℃下使其复苏、生长、增菌，再将增菌培养物分别划线于营养琼脂培养基上，在36℃±1℃下培养以获得纯化单菌落，并对复苏纯化的菌株进行鉴定；
13、步骤二：菌悬液配制及与冻干保护剂的混合
14、分别从上述营养琼脂培养基上刮取适量目标菌和背景菌标准菌株的单菌落于无菌生理盐水中，获得浓度为1.0～1.5mcf的初始菌悬液；
15、将目标菌和3个背景菌的初始菌悬液分别进行10倍梯度稀释后与冻干保护剂混合，使混合液中目标菌的浓度控制在1～3×102cfu/ml，背景菌群的浓度控制在1～3×104cfu/ml；
16、步骤三：分装与冻干
17、将混合液定量分装至无菌干燥的西林瓶中，于-80℃预冻16h，然后放入冻干机中冷冻干燥24h；样品冷冻干燥结束真空压盖成型；
18、步骤四：储存
19、将冷冻干燥的样品放置在-20℃条件下避光保存，备用。
20、本专利技术具有以下有益效果：
21、本专利技术的沙门氏菌能力验证样品，样品中目标菌存活率高，背景菌添加种类多且生化特征与目标菌高度相似，检测过程干扰能力强，制备工艺简单，成功率高，其均匀性和稳定性符合能力验证要求，适合于沙门氏菌(定性)能力验证项目的考核，能够有效评估所参与实验室进行沙门氏菌检验的技术能力。
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1.一种沙门氏菌能力验证样品，包括目标菌和背景菌群，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的能力验证样品，其特征在于，所述能力验证样品中，目标菌的目标浓度为1～3×102CFU/mL，背景菌群的目标浓度为1～3×104CFU/mL。
3.根据权利要求1或2所述的能力验证样品，其特征在于，所述能力验证样品以大分子类、寡糖类、以及抗氧化剂类三类物质为冻干保护剂。
4.根据权利要求3所述的能力验证样品，其特征在于，所述大分子类物质为脱脂乳粉，所述寡糖类物质为海藻糖，所述抗氧化剂类物质为抗坏血酸钠。
5.根据权利要求4所述的能力验证样品，其特征在于，按质量百分比计，所述冻干保护剂的组成如下：
6.权利要求1～5中任一项所述的沙门氏菌能力验证样品的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种沙门氏菌能力验证样品，包括目标菌和背景菌群，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的能力验证样品，其特征在于，所述能力验证样品中，目标菌的目标浓度为1～3×102cfu/ml，背景菌群的目标浓度为1～3×104cfu/ml。
3.根据权利要求1或2所述的能力验证样品，其特征在于，所述能力验证样品以大分子类、寡糖类、以及抗氧化剂类三类物质为...
【专利技术属性】
技术研发人员：王志伟，徐琼，宋春宏，范晗之，胡雪莲，曲勤凤，林琳，
申请(专利权)人：上海市质量监督检验技术研究院，
类型：发明
国别省市：
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