【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一株耐低温产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040及其在环境消毒中的应用。
技术介绍
1、产气荚膜梭菌(clostridiumperfringens)是一种厌氧杆菌，革兰氏染色呈阳性。起初是由美国病理学家w.h.welchii等从一高度腐烂的尸体血管组织中分离获得，人们便以他的名字来命名，故又被称为魏氏梭菌。后来因国际细菌命名法规的变动其学名历经多次修订，并最终更名为产气荚膜梭菌。本菌菌体长为3μm-9μm，宽为0.6μm-2.4μm，两端钝圆呈粗杆状，边缘笔直。菌体形态并不固定，往往在菌体生长的早期呈球状，而到生长末期，由于培养基营养成分的耗尽，常出现蝌蚪状、丝状和颗粒状。镜下可见单个或成短链排列，有时也会成对分布。
2、该菌能够产生多种强烈的外毒素，目前已知的有α、β、ε、γ、η、δ、ι、θ、k、λ、μ，和v十二种。其中最重要的是α、β、ε、ι这四种外毒素，且均为蛋白质，具有酶活性、抗原性。它们是最主要的致死性毒素和分型毒素。根据分泌的主要外毒素不同，可以将产气荚膜梭菌分为：a-e 5个毒素型，各毒素及菌型都可不同程度地引发动物和人发病。
3、噬菌体又称细菌病毒，是一种在细菌体内完成增殖，通过裂解细菌将自身释放到环境中的微生物。与抗生素治疗相比，噬菌体治疗具有代谢效率低、杀死细菌的最低剂量低、高度的特异性、高效的杀菌效果、筛选速度快等优势。
4、近年来，有关噬菌体的研究有了巨大的发展，国内外对噬菌体的应用研究范围很广，包括针对人类疾病的防治、动物疾病的防治、食品
5、在临床上，治疗产气荚膜梭菌病的基本方法是采用抗生素。近些年，随着抗菌药物的大量使用，尤其在我国，抗生素作为饲料添加剂长期添加于饲料中，使得致病菌产生耐药性，而且耐药谱不断扩大，传播速度也越来越快，严重威胁着人们的健康和公共卫生安全。
6、目前尚未出现能够有效预防和治疗产气荚膜梭菌病的耐低温、能够杀灭细菌芽孢且适合用于环境消毒的噬菌体产品，因此，研发一种可耐低温，兼具预防和治疗，且杀灭芽孢效果较好，稳定遗传，能够适用于环境消毒的噬菌体产品用于预防和治疗产气荚膜梭菌病迫在眉睫。
技术实现思路
1、本专利技术旨在针对现有技术的不足，提供一株耐低温产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040及其在环境消毒中的应用。本专利技术提供的一株产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040，可以用于制备预防和/或治疗产气荚膜梭菌所引起的家禽疾病的产品，可以用于制备杀灭或抑制产气荚膜梭菌或其芽孢的产品。具体的，不仅可以制备用于预防和治疗产气荚膜梭菌所引起的家禽疾病噬菌体药物制剂，还可以制备用于杀灭或抑制产气荚膜梭菌的消毒剂。该噬菌体及其噬菌体组合物使用安全、无副作用，用于解决因产气荚膜梭菌造成的感染。
2、本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
3、第一方面，本专利技术提供了一株产气荚膜梭菌噬菌体(clostridiumperfringensbacteriophage)rdpcp23040，该噬菌体从山东某发病养殖场的病禽盲肠中分离得到的，已于2023年06月12日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.45583。本专利技术实验所用的产气荚膜梭菌cp-20032，从山东某发病养殖场病鸡盲肠中分离得到，与本专利技术的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040一起保藏。
4、通过电镜观察到：该噬菌体rdpcp23040有一个多面体立体对称的头部，包裹着核酸，直径约42nm，有一个长约31nm的尾，有尾鞘，颈部连着头部和尾部。根据病毒分类国际委员会(ictv)的分类标准鉴定，该噬菌体归类为有尾病毒目，短尾病毒科。
5、该噬菌体rdpcp23040在moi＝0.01条件下培养8h，其效价高达9.01×108pfu/ml。
6、该噬菌体rdpcp23040在ph5.0-11.0范围能维持较好的活性，噬菌体能保持较高的效价。
7、该噬菌体rdpcp23040在传代30次的过程中，始终保持较高的效价，没有出现明显波动，说明该噬菌体可以稳定遗传，适宜于大规模工业生产。
8、该噬菌体rdpcp23040对产气荚膜梭菌有较好的裂解作用，经过实验证明，其对产气荚膜梭菌的裂解率高达100％，且能裂解a型、b型、c型、d型、e型多种血清型的宿主。
9、该噬菌体rdpcp23040在4℃环境中放置7天，始终保持较高的效价，没有出现明显波动，可在低温下稳定存放。
10、产气荚膜梭菌芽孢(以下简称“产气芽孢”)是在环境胁迫(如低温、干燥或营养缺乏等)下形成的一种微生物休眠体，且其芽孢对各种胁迫因素(如高温、高压、有毒化学物质和辐射)具有极强的抗逆性，不易杀死，能在适宜条件下萌发并产生毒性，致病性极强，常规的消毒处理以及大多数噬菌体往往难以有效杀灭。而经本专利技术的噬菌体rdpcp23040处理后的产气芽孢具有较明显的失活现象，实验结果显示，噬菌体可以使产气芽孢数量下降3个数量级，这说明噬菌体对该产气芽孢有很好的杀灭作用，在食品安全、临床医疗、生物防治等方面具有很好的应用前景。
11、第二方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术提供了一种噬菌体组合物，其特征在于，包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040。
12、第三方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040或如上所述的噬菌体组合物在制备预防和/或治疗产气荚膜梭菌所引起的家禽疾病的产品中的应用。
13、第四方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040或根据如上所述的噬菌体组合物在制备杀灭或抑制产气荚膜梭菌或其芽孢的产品中的应用。
14、第三方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种噬菌体药物制剂，有效成分包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040或者如上所述的噬菌体组合物。
15、优选的，所述产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040的浓度至少为108pfu/ml。
16、第四方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种消毒剂，有效成分包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040或者如上所述的噬菌体组合物。
17、优选的，所述产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040的使用浓度至少为108pfu/ml。
18、优选的，所述消毒剂可通过喷雾、浸泡对禽类养殖环境进行产气荚膜梭菌的消毒。
19、优选的，所述禽类养殖环境为禽类体内、禽类体表、禽类养殖场所在地面、禽类养殖场所空气、饲料、饮水以及饲养器具，包括不限于鸡笼、鸡舍地面、水线、料槽、养殖人员行走地面、自本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株产气荚膜梭菌噬菌体(Clostridium perfringens bacteriophage)RDPCP23040，其特征在于，该产气荚膜梭菌噬菌体于2023年06月12日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.45583。
2.一种噬菌体组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040。
3.如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040或如权利要求2所述的噬菌体组合物在制备预防和/或治疗产气荚膜梭菌所引起的家禽疾病的产品中的应用。
4.如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040或如权利要求2所述的噬菌体组合物在制备杀灭或抑制产气荚膜梭菌或其芽孢的产品中的应用。
5.一种噬菌体药物制剂，其特征在于，有效成分包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040或者如权利要求2所述的噬菌体组合物。
6.根据权利要求5所述的噬菌体药物制剂，其特征在于，所述产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040的浓度至少为108pfu/m
7.一种消毒剂，其特征在于，有效成分包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040或者如权利要求2所述的噬菌体组合物。
8.根据权利要求7所述的消毒剂，其特征在于，所述产气荚膜梭菌噬菌体RDPCP23040的使用浓度至少为108pfu/mL。
9.根据权利要求7或者8所述的消毒剂在环境消毒中的应用，其特征在于，所述消毒剂可通过喷雾、浸泡对禽类养殖环境进行产气荚膜梭菌的消毒。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述禽类养殖环境为禽类体内、禽类体表、禽类养殖场所在地面、禽类养殖场所空气、饲料、饮水以及饲养器具。
...【技术特征摘要】
1.一株产气荚膜梭菌噬菌体(clostridium perfringens bacteriophage)rdpcp23040，其特征在于，该产气荚膜梭菌噬菌体于2023年06月12日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.45583。
2.一种噬菌体组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040。
3.如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040或如权利要求2所述的噬菌体组合物在制备预防和/或治疗产气荚膜梭菌所引起的家禽疾病的产品中的应用。
4.如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23040或如权利要求2所述的噬菌体组合物在制备杀灭或抑制产气荚膜梭菌或其芽孢的产品中的应用。
5.一种噬菌体药物制剂，其特征在于，有效成分包括如权利要求1所述的产气荚膜...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜新永，刘长太，王立坤，潘秭琪，李爽，
申请(专利权)人：青岛润达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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