【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及卵母细胞体外成熟培养，特别是柠檬苦素的用途和含有柠檬苦素的ivm培养基。
技术介绍
1、猪胚胎的体外生产(in vitro production,ivp)对于促进猪的繁殖生产、提高生产效率和改良遗传性状具有重要意义，是现代猪业发展不可或缺的技术手段。卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,ivm)是ivp早期的关键环节，在ivm期间获得的卵母细胞质量决定了早期胚胎的发育潜力。卵母细胞体外培养的成功取决于培养条件和培养基组成。因此，通过优化卵母细胞体外成熟培养体系可以提高卵母细胞质量进而提高胚胎ivp质量。
2、氧化应激(oxidative stress,os)是活性氧(reactive oxygen species,ros)和其他自由基物质的产生超过了抗氧化剂的清除能力引起的。卵母细胞成熟过程需要大量的能量供应，会产生过量活性氧(reactive oxygen species,ros)，对卵母细胞和胚胎发育产生不利影响，如线粒体功能障碍、卵母细胞减数分裂停滞、胚胎阻滞以及细胞凋亡等。目前，研究人员在ivm期间添加了各种抗氧化物质进行试验，以确保细胞内氧化还原状态平衡和卵母细胞质量良好。多项试验证实，在ivm培养基中添加抗氧化剂(如硫醇、多酚化合物、褪黑激素、类胡萝卜素、白藜芦醇等)可改善卵母细胞质量并减轻过度ros暴露引起的损害。
3、柠檬苦素(lim)通常来源于芸香科和楝树科的植物，可以从许多中药和水果提取，包括黄连、佛手柑、柑橘科果实等。研究表明，柠檬苦素具有广泛的药
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了柠檬苦素的用途和含有柠檬苦素的ivm培养基。
2、为达到上述目的，本专利技术是按照以下技术方案实施的：
3、本专利技术的目的之一是要提供一种柠檬苦素的用途，柠檬苦素用于制备猪卵母细胞体外成熟ivm培养基。
4、本专利技术的目的之二是要提供一种猪卵母细胞体外成熟ivm培养基，所述猪卵母细胞体外成熟ivm培养基中含有柠檬苦素。
5、进一步地，所述猪卵母细胞体外成熟ivm培养基中柠檬苦素的浓度为20μm。
6、更近一步地，猪卵母细胞体外成熟ivm培养基包括体外成熟ivm基础培养基，所述体外成熟ivm基础培养基中添加20μm的柠檬苦素；所述体外成熟ivm基础培养基包括m199培养基，m199培养基中添加有0.1mg/ml的半胱氨酸、10ng/ml的表皮生长因子egf、10％的猪卵泡液、10iu/ml的孕马血清促性腺激素pmsg、10iu/ml的人绒毛膜促性腺激素hcg、1％的青霉素-链霉素pen-strep、1％的l-丙氨酰-l-谷氨酰胺glutamax。
7、优选地，所述柠檬苦素配制方法为：称取100mg柠檬苦素粉末，添加2.657ml的dmso配制为80mm的浓储液，使用时用体外成熟ivm基础培养基稀释至浓度为20μm，且dmso的终浓度小于0.01％。
8、与现有技术相比，本专利技术通过在在ivm培养基中添加20μm柠檬苦素可以通过缓解猪卵母细胞的氧化应激，降低早期细胞凋亡水平，维持线粒体膜电位来提高卵母细胞质量，从而提高早期胚胎发育能力。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种柠檬苦素的用途，其特征在于：柠檬苦素用于制备猪卵母细胞体外成熟IVM培养基。
2.一种猪卵母细胞体外成熟IVM培养基，其特征在于：所述猪卵母细胞体外成熟IVM培养基中含有柠檬苦素。
3.根据权利要求2所述的猪卵母细胞体外成熟IVM培养基，其特征在于：所述猪卵母细胞体外成熟IVM培养基中柠檬苦素的浓度为20μM。
4.根据权利要求2或3所述的猪卵母细胞体外成熟IVM培养基，其特征在于，包括体外成熟IVM基础培养基，所述体外成熟IVM基础培养基中添加20μM的柠檬苦素；所述体外成熟IVM基础培养基包括M199培养基，M199培养基中添加有0.1mg/mL的半胱氨酸、10ng/mL的表皮生长因子EGF、10％的猪卵泡液、10IU/mL的孕马血清促性腺激素PMSG、10IU/mL的人绒毛膜促性腺激素hCG、1％的青霉素-链霉素Pen-Strep、1％的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺GlutaMAX。
5.根据权利要求4所述的猪卵母细胞体外成熟IVM培养基，其特征在于，所述柠檬苦素配制方法为：称取100mg柠檬苦素粉末，添加2.657mL的
...【技术特征摘要】
1.一种柠檬苦素的用途，其特征在于：柠檬苦素用于制备猪卵母细胞体外成熟ivm培养基。
2.一种猪卵母细胞体外成熟ivm培养基，其特征在于：所述猪卵母细胞体外成熟ivm培养基中含有柠檬苦素。
3.根据权利要求2所述的猪卵母细胞体外成熟ivm培养基，其特征在于：所述猪卵母细胞体外成熟ivm培养基中柠檬苦素的浓度为20μm。
4.根据权利要求2或3所述的猪卵母细胞体外成熟ivm培养基，其特征在于，包括体外成熟ivm基础培养基，所述体外成熟ivm基础培养基中添加20μm的柠檬苦素；所述体外成熟ivm基础培养基包括m199培养...
【专利技术属性】
技术研发人员：冯政，宋佳，王基沣，裴杨莉，林成鸿，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。