【技术实现步骤摘要】
本申请涉及肿瘤免疫，特别涉及一种靶向cd81的嵌合抗原受体及其应用。
技术介绍
1、嵌合抗原受体(cars)的过继性免疫治疗是血液学的一种变革性治疗方法，针对b细胞白血病和淋巴瘤的cd19-car-t已得到临床认可，目前成为全球范围癌症中心实施的“常规”治疗手段。2017年，cd19-car-t细胞被美国fda批准为用于治疗复发或难治性b细胞急性淋巴细胞白血病(b-all)的细胞治疗产品，这在免疫治疗领域带来了一场巨大的革命，因为它在多种血液相关恶性肿瘤中的完全缓解率很高。但是，cd19-car-t的不足也非常明显，安全性不足是主要原因之一，如引发b细胞再生障碍，具体是因为cd19在所有b细胞中表达，目前不可能根据cd19构象的差异选择性地靶向静止或长期激活的恶性b细胞，cd19-car-t细胞杀死所有健康b细胞和恶性b细胞，b细胞再生障碍导致低丙种球蛋白血症和由于体液免疫丧失而反复感染。
2、因此，在血液学和肿瘤学中，开发新的car靶抗原，提高疗效及促进car-t细胞的生产以增加患者的适用性，具有重要意义。
技术实现思路
1、基于此，本申请至少提供一种靶向cd81的嵌合抗原受体及其应用。可通过如下技术方案实现。
2、在本申请的第一方面，提供一种靶向cd81的嵌合抗原受体，其包括靶向cd81的单链抗体可变区。
3、在一些实施方式中，提供一种靶向cd81的嵌合抗原受体，其包括依次连接的信号肽、靶向cd81的抗原结合结构域、铰链区、跨膜区、共刺激结构
4、所述靶向cd81的抗原结合结构域包括氨基酸序列依次如seq id no.1中第24～40位、第56～62位以及第95～102位所示的轻链互补决定区l-cdr1、l-cdr2和l-cdr3，还包括氨基酸序列依次如seq id no.2的第31～35位、第50～66位和第99～108位所示的重链互补决定区h-cdr1、h-cdr2和h-cdr3。
5、在一些实施方式中，所述靶向cd81的抗原结合结构域包括氨基酸序列如seq idno.1所示的轻链可变区和氨基酸序列如seq id no.2所示的重链可变区。
6、在本申请的第二方面，提供一种核酸，其核苷酸序列包括如下任一种：
7、第一编码序列，其为本申请第一方面所述的靶向cd81的嵌合抗原受体的编码序列；和
8、第二编码序列，其为与所述第一编码序列互补的核苷酸序列。
9、在本申请的第三方面，提供一种表达载体，其包括本申请第二方面所述的核酸的核苷酸序列。
10、在本申请的第四方面，提供一种宿主细胞，所述宿主细胞中含有如本申请第三方面所述的表达载体，或者，所述宿主细胞的染色体中整合有外源的本申请第二方面所述的核酸。
11、在本申请的第五方面，提供一种car-t细胞，其具有如下特征中的一项或多项：
12、所述car-t细胞表达本申请第一方面所述的靶向cd81的嵌合抗原受体；
13、所述car-t细胞的基因组中整合有本申请第二方面所述的核酸；
14、所述car-t细胞包括本申请第三方面所述的表达载体。
15、在本申请的第六方面，提供一种car-t细胞的制备方法，可用于制备本申请第五方面所述的car-t细胞，所述的制备方法包括如下步骤：将本申请第一方面所述的靶向cd81的嵌合抗原受体的编码基因转导入t细胞，获得所述car-t细胞。
16、在本申请的第七方面，提供一种药物组合物，其包括免疫活性组分和药学上可接受的载体；
17、其中，所述免疫活性组分包括本申请第一方面所述的靶向cd81的嵌合抗原受体、本申请第二方面所述的核酸、本申请第三方面所述的表达载体和本申请第五方面所述的car-t细胞中的至少一种。
18、在本申请的第八方面，提供本申请第一方面所述的靶向cd81的嵌合抗原受体、本申请第二方面所述的核酸、本申请第三方面所述的表达载体、本申请第四方面所述的宿主细胞、本申请第五方面所述的car-t细胞以及本申请第七方面所述的药物组合物在制备抑制b细胞系恶性肿瘤的制剂或药物中的应用。
19、本申请中所提供的靶向cd81的嵌合抗原受体(可记为cd81-car)能够特异性识别表达cd81抗原的肿瘤细胞，具有较强的抗肿瘤活性，还可能防止正常b细胞衰竭，从而降低复发风险，提高b细胞系恶性肿瘤治疗效果。
20、本申请构建的cd81-car载体的car-t细胞(可记为cd81-car-t细胞)展现出非常好的体外杀伤效果，而且，经细胞因子实验证明了cd81-car-t细胞可以被天然表达的cd81抗原的肿瘤细胞特异性激活。
21、本申请构建的cd81-car载体的car-t细胞可用于靶向表达cd81抗原的b细胞系恶性肿瘤。
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1.一种靶向CD81的嵌合抗原受体，其特征在于，包括依次连接的信号肽、靶向CD81的抗原结合结构域、铰链区、跨膜区、共刺激结构域和胞内信号传导肽；
2.根据权利要求1所述的靶向CD81的嵌合抗原受体，其特征在于，满足如下特征中的一项或多项：
3.根据权利要求1所述的靶向CD81的嵌合抗原受体，其特征在于，满足如下特征中的一项或多项：
4.根据权利要求1～3中任一项所述的靶向CD81的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向CD81的抗原结合结构域的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示。
5.根据权利要求1所述的靶向CD81的嵌合抗原受体，其特征在于，氨基酸序列如SEQ IDNo.10所示。
6.一种核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列包括如下至少一种：
7.根据权利要求6所述的核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列包括SEQ ID No.11所示的核苷酸序列；
8.一种表达载体，其特征在于，包括权利要求6或7所述的核酸的核苷酸序列。
9.根据权利要求8所述的表达载体，其特征在于，所述的表
10.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞中含有如权利要求8或9所述的表达载体，或者，所述宿主细胞的染色体中整合有外源的如权利要求8所述的核酸。
11.一种CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞具有如下特征中的一项或多项：
12.权利要求11所述的CAR-T细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求1-5任一项中所述的靶向CD81的嵌合抗原受体的编码基因转导入T细胞，获得所述CAR-T细胞。
13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求6或7所述的核酸和权利要求8或9所述的表达载体中的至少一种转导入T细胞，获得所述CAR-T细胞。
14.一种药物组合物，其特征在于，包括免疫活性组分和药学上可接受的载体；
15.权利要求1-5任一项中所述的靶向CD81的嵌合抗原受体、权利要求6或7所述的核酸、权利要求8或9所述的表达载体、权利要求10所述的宿主细胞、权利要求11所述的CAR-T细胞以及权利要求14所述的药物组合物在制备抑制B细胞系恶性肿瘤的制剂或药物中的应用。
16.根据权利要求15所述的应用，其特征在于，所述B细胞系恶性肿瘤至少包括非霍奇金淋巴瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞急性淋巴细胞白血病和B细胞淋巴瘤中至少一种；
...【技术特征摘要】
1.一种靶向cd81的嵌合抗原受体，其特征在于，包括依次连接的信号肽、靶向cd81的抗原结合结构域、铰链区、跨膜区、共刺激结构域和胞内信号传导肽；
2.根据权利要求1所述的靶向cd81的嵌合抗原受体，其特征在于，满足如下特征中的一项或多项：
3.根据权利要求1所述的靶向cd81的嵌合抗原受体，其特征在于，满足如下特征中的一项或多项：
4.根据权利要求1～3中任一项所述的靶向cd81的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向cd81的抗原结合结构域的氨基酸序列如seq id no.9所示。
5.根据权利要求1所述的靶向cd81的嵌合抗原受体，其特征在于，氨基酸序列如seq idno.10所示。
6.一种核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列包括如下至少一种：
7.根据权利要求6所述的核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列包括seq id no.11所示的核苷酸序列；
8.一种表达载体，其特征在于，包括权利要求6或7所述的核酸的核苷酸序列。
9.根据权利要求8所述的表达载体，其特征在于，所述的表达载体为慢病毒载体、逆转录病毒载体和腺相关病毒载体中的一种或多种。
10.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：林戈，吴静，罗孝宇，邵梦思，郝建军，周英，卢光莹，陈濂生，卢光琇，
申请(专利权)人：湖南光琇高新生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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