【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药。更具体地，涉及猪载脂蛋白apoe在筛选抗蓝耳病猪及防治猪蓝耳病中的应用。
技术介绍
1、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，prrs)，俗称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive andrespiratory syndrome virus，prrsv)引起。猪繁殖与呼吸综合征(prrs)是影响生猪产业健康发展的重大疾病，在全球造成重大的经济损失。由于prrsv属于rna病毒，极易变异重组，遗传演化极快，不断涌现新毒株，使prrs防控难上加难。
2、prrsv的特性是导致该病难防控的根本原因。prrsv与其他病毒最大的区别在于其主要侵染免疫细胞--猪肺泡巨噬细胞，破坏免疫系统，类似hiv。该病毒具有以下特点：极易变异重组、免疫抑制性、持续性感染、抗性依赖增强性(ade)，使得该病的防控和清除非常困难，已成为养猪业中最难防控的疾病之一。
3、基于prrsv以上特点，目前研制的商品化疫苗，包括弱毒苗和灭活苗，效果均不理想，不能阻止该病的发生与流行。且这些疫苗存在以下问题：产生中和抗体慢、对异源毒株交叉保护力差、疫苗毒病毒血症时间长、与田间毒株重组产生致病力更强的重组毒。因此，有必要聚焦宿主(猪)，发掘宿主抗性基因。从宿主遗传角度开展研究，通过遗传改良和抗病育种策略培育抗病猪新品种(系)，从遗传水平提高宿主对prrs的抵抗力。
4、生物育种是种业创新的核心，构建现
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是克服现有rrsv防控上的缺陷和不足，提供猪载脂蛋白apoe在筛选抗蓝耳病猪及防治猪蓝耳病中的应用。
2、本专利技术的第一个目的是提供猪载脂蛋白apoe的新应用。
3、本专利技术的第二个目的是提供检测猪载脂蛋白apoe的试剂的应用。
4、本专利技术的第三个目的是提供过表达猪载脂蛋白apoe的试剂的应用。
5、本专利技术的第四个目的是提供一种筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病品种猪的方法。
6、本专利技术的第五个目的是提供一种培育抗猪蓝耳病品种或提高猪对蓝耳病毒抗性的方法。
7、本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
8、本专利技术通过对猪载脂蛋白(apolipoprotein e，apoe；其mrna序列号：nm_214308.1，apoe蛋白序列号：np_999473.1)研究显示apoe的表达量与prrsv复制密切相关，在prrsv感染pams细胞后，apoe mrna水平和蛋白水平显著降低，并随着感染时间延长，apoe表达量下降更明显；进一步敲低apoe显著促进prrsv复制，而过表达apoe抑制prrsv复制。同时，通过猪体内apoe表达与4种不同抗性品种猪对prrsv易感性\抗性的研究显示：猪体内apoe表达量高时对prrsv具有抗性，反之具有易感性，由此可用于筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪。综上，表明apoe基因可作为prrsv抗性分子靶标和抗病育种的重要靶点，对prrsv抗性猪的筛选和培育具有很好的临床应用价值。
9、因此，本专利技术提供与猪载脂蛋白apoe相关的下述应用：
10、猪载脂蛋白apoe作为靶点在筛选抗猪蓝耳病的药物中的应用。
11、猪载脂蛋白apoe在筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪中的应用。
12、进一步地，筛选/鉴定标准为：apoe表达量越高的猪对蓝耳病毒的抗性越强、越不易感；反之易感性越强。
13、猪载脂蛋白apoe在培育抗猪蓝耳病品种中的应用。
14、进一步地，培育抗猪蓝耳病猪品种需过表达猪体内载脂蛋白apoe。
15、检测猪载脂蛋白apoe的试剂在制备诊断猪蓝耳病产品中的应用。
16、进一步地，诊断标准为：apoe表达量异常降低则表示感染蓝耳病毒或患猪蓝耳病；这里所述的“异常降低”是以本领域技术中猪体内apoe表达量的普遍水平为依据。
17、检测猪载脂蛋白apoe的试剂在筛选/鉴定猪蓝耳病的易感性\抗性品种中的应用。
18、检测载脂蛋白apoe的试剂在筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪，或在制备筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病猪的产品中的应用。
19、作为一种可优选的实施方案，本专利技术提供了一种具体的检测载脂蛋白apoe的试剂，包含检测猪apoe表达的引物，其序列如seq id no.1～2所示。
20、过表达猪载脂蛋白apoe的试剂在制备治疗/预防猪蓝耳病的产品中的应用。
21、过表达猪载脂蛋白apoe的试剂在制备抗猪蓝耳病毒的药物中的应用。
22、过表达猪载脂蛋白apoe的试剂在提高猪对蓝耳病毒的抗性，或在制备提高猪蓝耳病抗性产品中的应用。
23、特别地，过表达猪载脂蛋白apoe的试剂包括但不限于：表达促进剂、表达激活剂、酶激活剂、化合物促进剂、质粒等。
24、本专利技术提供一种筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪的方法，采用检测猪载脂蛋白apoe的试剂，或通过检测猪体内载脂蛋白apoe基因的表达水平，来筛选/鉴定对猪蓝耳病毒的抗性或易感性。
25、具体地，本专利技术筛选/鉴定抗性、易感性的蓝耳病猪的方法为：通过检测猪体内apoe表达水平(表达量)来鉴别猪对蓝耳病毒是抗性或易感性。
26、进一步地，鉴定的标准是：apoe表达量高的猪对蓝耳病毒具有抗性；反之具有易感性。
27、具体操作时，apoe表达量的高低以本领域技术中猪体内apoe表达量的普遍水平为依据。这里所述的高低是相对的，根据apoe表达量异常较高或较低，从而判定猪是否可能对prrsv具有抗性。
28、作为一种更优选的实施方案，本专利技术提供更具体地筛选/鉴定抗性、易感性的蓝耳病猪的方法为：当apoe表达量高于5.7±0.5×10-2(相对于内参hprt1)时，猪对病毒有抗性；表达量低于5.7±0.5×10-2(相对于内参hprt1)时，易感。
29、特别地，本专利技术对于apoe表达量的检测方法不作严格限制，可以是本领域内现有的基因表达量检测方法。
30、本专利技术还提供一种培育抗猪蓝耳病品种或提本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.猪载脂蛋白APOE作为靶点在筛选抗猪蓝耳病的药物中的应用。
2.猪载脂蛋白APOE在筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪中的应用。
3.猪载脂蛋白APOE在培育抗猪蓝耳病品种中的应用，其特征在于，培育抗猪蓝耳病品种需过表达猪体内载脂蛋白APOE。
4.检测猪载脂蛋白APOE的试剂在制备诊断猪蓝耳病产品中的应用。
5.检测猪载脂蛋白APOE的试剂在筛选/鉴定猪蓝耳病的易感性\抗性品种中的应用。
6.过表达猪载脂蛋白APOE的试剂在制备治疗/预防猪蓝耳病的产品中的应用。
7.过表达猪载脂蛋白APOE的试剂在制备抗猪蓝耳病毒的药物中的应用。
8.过表达猪载脂蛋白APOE的试剂在提高猪对蓝耳病毒的抗性，或在制备提高猪蓝耳病抗性产品中的应用。
9.一种筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪的方法，其特征在于，采用检测猪载脂蛋白APOE的试剂，或通过检测猪体内载脂蛋白APOE基因的表达水平，来筛选/鉴定对猪蓝耳病毒的抗性或易感性。
10.一种培育抗猪蓝耳病品种或提高猪对蓝耳病毒抗性的
...【技术特征摘要】
1.猪载脂蛋白apoe作为靶点在筛选抗猪蓝耳病的药物中的应用。
2.猪载脂蛋白apoe在筛选/鉴定抗性、易感性的猪蓝耳病病猪中的应用。
3.猪载脂蛋白apoe在培育抗猪蓝耳病品种中的应用，其特征在于，培育抗猪蓝耳病品种需过表达猪体内载脂蛋白apoe。
4.检测猪载脂蛋白apoe的试剂在制备诊断猪蓝耳病产品中的应用。
5.检测猪载脂蛋白apoe的试剂在筛选/鉴定猪蓝耳病的易感性\抗性品种中的应用。
6.过表达猪载脂蛋白apoe的试剂在制备治疗/预防猪蓝耳病的产品中的应用。
...【专利技术属性】
技术研发人员：郭春和，严杰聪，张晓晓，陈永杰，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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