【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于物质提取，涉及一种从猪皮中提取胶原蛋白的方法及其产品和应用。
技术介绍
1、猪皮中主要成分包括水分、脂肪、矿物质和蛋白质，其中水分约占56％，脂肪约10％，矿物质约0.1％，蛋白质约33％。其中，猪皮中含有的大量蛋白质以胶原蛋白为主，另外含有少量的白蛋白、球蛋白和弹性蛋白。从纵断面观察猪皮结构，可分为表皮层、真皮层和皮下组织三部分，而其中真皮层占猪皮厚度的90％，是主要的组成部分。真皮层包括纤维成分与非纤维成分，纤维成分主要由胶原纤维、弹性纤维和网状纤维组成，其中胶原纤维占99％。随着科学技术的发展，人们对于猪皮的研究日益深入，猪皮在许多的领域得到了更多的尝试与应用。目前，猪皮除了应用于制革工业以外，还在食品工业、生物医学和化妆品行业等领域得到了开发应用。
2、胶原蛋白的提取方法常见有四种，分别是酸法、碱法、酶法、盐法和热水提取法。由于各种方法的提取条件不同，水解程度不同会得到不同的胶原蛋白产物。猪皮的胶原蛋白产物为胶原蛋白、明胶、胶原多肽。虽然三者之间具有同源性，但它们的结构上有着明显的差异，导致它们的性能有很大的差别。其中最明显的差异是胶原蛋白具有生物活性，能促进细胞生长，而明胶与多肽不再具有生物活性，不能促进细胞生长。
3、酶法提取胶原蛋白是目前比较理想的方法。在酶解过程种中胶原分子n和c端的非胶原性肽被蛋白酶切断，但由于其三螺旋结构没被破坏，使得更多的胶原蛋白变得可溶，而被分散的胶原分子逐步溶解于酸性环境，从而达到提取胶原蛋白的目的。酶法制备的胶原蛋白纯度更高、水溶性和理化性质更稳定
4、然而利用现有方法提取的猪皮中的胶原蛋白仍具有以下缺陷：1)动物源胶原存在潜在的病毒污染、免疫原性和致敏性风险；2)价格较高，难以达到标准化大规模生产，导致成本下降空间有限、价格较贵；3)低水溶性、对医生技术要求更高，动物提取的胶原蛋白不可溶，需要使用极端试剂溶解，存在强酸强碱的残留安全隐患，从而对医生的操作技术要求更严格。
5、因此，鉴于现有技术方法的缺陷与不足，使用一种新的方法提取猪皮中的胶原蛋白，以降低潜在的病毒污染、免疫原性与致敏性风险。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种从猪皮中提取胶原蛋白的方法及其产品和应用。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种从猪皮中提取胶原蛋白的方法，所述方法包括：
4、(1)将猪皮脱脂，冷冻干燥；
5、(2)将冷冻后的猪皮在胃蛋白酶中水解后，与辛基硫代葡萄糖苷和chaps混合，过滤取滤液；
6、(3)将滤液与氯化钠混合盐析至出现絮状沉淀；
7、(4)将沉淀复溶，在醋酸和去离子水中依次透析，冷冻干燥。
8、本专利技术所述提取胶原蛋白的方法具有较高的提取效率，并降低免疫原性与致敏性风险，拟产生一种可用于生物体内的胶原材料。辛基硫代葡萄糖苷和chaps(4-氯-2-氟苯基-1-甲基咪唑)的使用，可以提高胶原蛋白的纯度，且辛基硫代葡萄糖苷与chaps间存在一定的协同效果。
9、优选地，所述猪皮脱脂包括将猪皮在缓冲液中浸泡4-12h，例如4h、5h、6h、7h、8h、9h、10h、11h、12h等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
10、优选地，所述缓冲液包括tris-hcl。
11、优选地，所述缓冲液还包括na2co3、脂肪酶。
12、优选地，所述冷冻干燥的温度为-80～-40℃，时间为24-72h。
13、所述温度可以选择-80℃、-75℃、-70℃、-65℃、-60℃、-55℃、-50℃、-45℃、-40℃等，所述时间可以选择24h、28h、32h、36h、40h、44h、48h、52h、56h、60h、64h、68h、72h等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
14、优选地，所述水解的温度为4-37℃，时间为4-24h。
15、所述温度可以选择4℃、5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃等，所述时间可以选择4h、8h、12h、16h、20h、24h等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
16、本专利技术发现水解的温度和时间对于胶原蛋白提取的效率十分重要。
17、优选地，所述水解的ph为1.9-2.4，例如1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
18、优选地，所述胃蛋白酶的质量百分含量为1-5％，例如1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
19、优选地，步骤(2)中猪皮的浓度为1-20mg/ml，例如1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、19mg/ml、20mg/ml等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
20、优选地，与辛基硫代葡萄糖苷和chaps混合的时间为22-26h，例如22h、22.5h、23h、23.5h、24h、24.5h、25h、25.5h、26h等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
21、优选地，所述辛基硫代葡萄糖苷的浓度为0.5-1.2％，例如0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
22、优选地，所述chaps的浓度为0.3-0.8％，例如0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
23、优选地，所述氯化钠的终浓度为1-2mol/l，例如1mol/l、1.1mol/l、1.2mol/l、1.3mol/l、1.4mol/l、1.5mol/l、1.6mol/l、1.7mol/l、1.8mol/l、1.9mol/l、2mol/l等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
24、优选地，所述沉淀采用0.5-1mol/l的醋酸溶液复溶，例如0.5mol/l、0.6mol/l、0.7mol/l、0.8mol/l、0.9mol/l、1mol/l等，上述数值范围内其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
25、优选地，在醋酸中透析的时间为12-72h，醋酸的浓度为本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种从猪皮中提取胶原蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述猪皮脱脂包括将猪皮在缓冲液中浸泡4-12h；
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述冷冻干燥的温度为-80～-40℃，时间为24-72h。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述水解的温度为4-37℃，时间为4-24h；
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述氯化钠的终浓度为1-2mol/L。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述沉淀采用0.5-1mol/L的醋酸溶液复溶。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，在醋酸中透析的时间为12-72h，醋酸的浓度为0.1-0.8mol/L。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述去离子水中透析的时间为18-32h。
9.一种根据权利要求1-8中任一项所述的方法提取得到的胶原蛋白。
10.一种根据权利要求9所述的胶原
...【技术特征摘要】
1.一种从猪皮中提取胶原蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述猪皮脱脂包括将猪皮在缓冲液中浸泡4-12h；
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述冷冻干燥的温度为-80～-40℃，时间为24-72h。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述水解的温度为4-37℃，时间为4-24h；
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述氯化钠的终浓度为1-2mol/l。
...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢水林，邹芬，黄易凡，吴劲松，邹淑香，梁轩，徐菲，
申请(专利权)人：广东明珠生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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