【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及以胶原蛋白酶为有效成分的、用于制造胶原三肽或者分解软骨的酶剂及其用途。
技术介绍
1、可以预测已知为功能性肽的胶原肽的全球市场会增长。胶原肽中，作为胶原蛋白的最小单位的三肽gly-x-y(胶原三肽。以下，有时简称为“ctp”)在体内的吸收性高，另外具有各种功能性，因此认为其利用价值高。
2、为了高效地制造ctp，能够在胶原蛋白或明胶的gly残基位置进行特异性切割且分解至三肽的蛋白酶(胶原蛋白酶)是有用的。作为胶原蛋白酶的例子，已知有来自梭菌属(clostridium)、弧菌属(vibrio)的胶原蛋白酶、蜡样芽孢杆菌胶原蛋白酶(属于微生物胶原蛋白酶(ec.3.4.24.3))，但胶原蛋白酶生产菌为生物安全等级2(bsl2)，担忧其安全性，因此可以说不适合制造食品用途、医疗用途等所使用的ctp。
3、作为可用于食品用途的胶原蛋白酶，已知有来自链霉菌属(streptomyces)的胶原蛋白酶(专利文献1)，但并不清楚是否可利用于制造ctp。另外，现有的胶原蛋白酶通常稳定性差。作为被认为稳定性优异且比活性也高的来自微生物的胶原蛋白酶，已知有来自霍利斯弧菌(vibrio hollisae)的胶原蛋白酶(专利文献2中的来自弧菌属(vibrio sp)1706b菌株的胶原蛋白酶)(专利文献2、专利文献3)。但是，来自霍利斯弧菌(vibrio hollisae)的胶原蛋白酶的热稳定性为30℃以下，在实用上并不充分。
4、另外，已知存在性质不同的各种胶原蛋白酶。例如，来自溶组织梭状芽胞杆菌属的胶
5、对适合由胶原蛋白制造可用于食品用途的ctp的胶原蛋白酶要求胶原蛋白酶生产菌为安全菌、具有胶原蛋白分解能力或明胶分解能力、以及具有ctp生成能力，另外，优选还要求稳定性高，但尚未知晓有满足这样的条件并实用化了的胶原蛋白酶。
6、另一方面，有时需要面向食品用途的具有高的软骨分解能力的胶原蛋白酶，但尚未知晓具有高的软骨分解能力的胶原蛋白酶。
7、现有技术文献
8、专利文献
9、专利文献1：日本特公平5-16832号公报
10、专利文献2：日本特开平8-70853号公报
11、专利文献3：日本特开2010-263880号公报
12、专利文献4：日本特表2001-510331号公报
13、专利文献5：日本特开2018-183106号公报
技术实现思路
1、在上述背景下，本专利技术的课题在于提供对制造胶原三肽或者分解软骨等食品或医疗用途有用的安全性高的蛋白酶(胶原蛋白酶)及其用途等。
2、本专利技术人等为了获得ctp生成能力高、软骨分解能力高、而且安全性高的胶原蛋白酶，广泛筛选了来自微生物的酶。其结果发现了纺缍形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillusfusiformis)的特定菌株产生与目标一致的胶原蛋白酶。该胶原蛋白酶表现出胶原蛋白酶分解能力、ctp生成能力，软骨分解能力高，产业上的利用价值高。根据本专利技术，可提供以下的专利技术。
3、＜1＞一种用于制造胶原三肽的酶剂，以由序列号1的氨基酸序列或者与其等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为有效成分。
4、＜2＞根据＜1＞所述的酶剂，其中，由等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为与序列号1的氨基酸序列具有90％以上的同源性、且由牛骨明胶生成gly-glu-arg的能力与由序列号1的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶同等的胶原蛋白酶。
5、＜3＞根据＜1＞或＜2＞所述的酶剂，其中，胶原蛋白酶来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌。
6、＜4＞一种用于制造胶原三肽的酶剂，以来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌且具有以下理化性质的胶原蛋白酶为有效成分。
7、(1)最适温度：40℃附近。
8、(2)温度稳定性：将活性最高的处理温度下的活性设为100％的相对残余活性在4℃～40℃为80％以上，在50℃为10％以下。
9、(3)最适ph：最适ph在7附近。
10、(4)ph稳定性：将活性最高的处理ph下的活性设为100％的相对残余活性在ph为6～8的范围为80％以上，在ph5为10％以下。
11、＜5＞一种用于软化食用肉和/或分解软骨的酶剂，以由序列号1的氨基酸序列或者与其等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为有效成分。
12、＜6＞根据＜5＞所述的酶剂，其中，由等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为与序列号1的氨基酸序列具有90％以上的同源性、且鸡软骨分解能力与由序列号1的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶同等的胶原蛋白酶。
13、＜7＞根据＜5＞或＜6＞所述的酶剂，其中，胶原蛋白酶来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌。
14、＜8＞一种用于软化食用肉和/或分解软骨的酶剂，以来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌且具有以下理化性质的胶原蛋白酶为有效成分。
15、(1)最适温度：40℃附近。
16、(2)温度稳定性：将活性最高的处理温度下的活性设为100％的相对残余活性在4℃～40℃为80％以上，在50℃为10％以下。
17、(3)最适ph：最适ph在7附近。
18、(4)ph稳定性：将活性最高的处理ph下的活性设为100％的相对残余活性在ph为6～8的范围为80％以上，在ph5为10％以下。
19、＜9＞一种胶原三肽的制造方法，其特征在于，使＜1＞～＜4＞中任一项所述的酶剂作用于胶原蛋白或明胶。
20、＜10＞一种软化食用肉和/或分解软骨的方法，其特征在于，使＜5＞～＜8＞中任一项所述的酶剂作用于食用肉和/或软骨。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于制造胶原三肽的酶剂，以由序列号1的氨基酸序列或者与其等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为有效成分。
2.根据权利要求1所述的酶剂，其中，由等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为与序列号1的氨基酸序列具有90％以上的同源性、且由牛骨明胶生成Gly-Glu-Arg的能力与由序列号1的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶同等的胶原蛋白酶。
3.根据权利要求1或2所述的酶剂，其中，胶原蛋白酶来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌。
4.一种用于制造胶原三肽的酶剂，以来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌且具有以下理化性质的胶原蛋白酶为有效成分，
5.一种用于软化食用肉和/或分解软骨的酶剂，以由序列号1的氨基酸序列或者与其等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为有效成分。
6.根据权利要求5所述的酶剂，其中，由等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为与序列号1的氨基酸序列具有90％以上的同源性、且鸡软骨分解能力与由序列号1的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶同等的胶原蛋白酶。
7.根据权利要求5或6所述的酶剂，其中，胶原蛋白酶来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌。
8.
9.一种胶原三肽的制造方法，其特征在于，使权利要求1～4中任一项所述的酶剂作用于胶原蛋白或明胶。
10.一种软化食用肉和/或分解软骨的方法，其特征在于，使权利要求5～8中任一项所述的酶剂作用于食用肉和/或软骨。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于制造胶原三肽的酶剂，以由序列号1的氨基酸序列或者与其等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为有效成分。
2.根据权利要求1所述的酶剂，其中，由等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为与序列号1的氨基酸序列具有90％以上的同源性、且由牛骨明胶生成gly-glu-arg的能力与由序列号1的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶同等的胶原蛋白酶。
3.根据权利要求1或2所述的酶剂，其中，胶原蛋白酶来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌。
4.一种用于制造胶原三肽的酶剂，以来自纺缍形赖氨酸芽孢杆菌且具有以下理化性质的胶原蛋白酶为有效成分，
5.一种用于软化食用肉和/或分解软骨的酶剂，以由序列号1的氨基酸序列或者与其等效的氨基酸序列构成的胶原蛋白酶为...
【专利技术属性】
技术研发人员：扫部正浩，谷内宽之，石垣佑记，
申请(专利权)人：天野酶制品株式会社，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。