【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及叶植物制品检测，尤其涉及一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法。
技术介绍
1、斑兰叶，学名香露兜(pandanus amaryllifolius)，又名斑斓叶、香兰叶、板兰叶，为露兜树科多年生草本植物；叶片富含角鲨烯、亚油酸、草蒿脑和甾醇等活性成分，天然散发一种“粽子香味”；被誉为“东方香草”，具有非常高的经济开发价值。
2、斑兰叶常被用来当做食用调料配菜等或者对其进行提取并将其提取物制成食品，如斑斓叶蔬菜蛋糕等，但制品中通常或含有大量的叶绿素，而叶绿素的存在会导致斑兰叶制品保质期短，制品生产时只能在生产前对叶片提取物进行处理降低叶绿素含量，无法对制品中叶绿素含量进行测定；同时不同时间段和不同环境生长的斑兰叶中叶绿素含量不同，由此可知对制品中叶绿素的测定显得尤为重要；目前对于植物叶片的叶绿素测定技术较为成熟，但对斑兰叶片制品中的叶绿素的测定尚待开发，因此，本专利技术提出一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法以解决现有技术中存在的问题。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术的目的在于提出一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，该斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法通过对斑兰叶和斑兰叶制品中的叶绿素分为叶绿素a和叶绿素b进行精细测定，并在测定后将提取液试样进行提取处理，在精准测定叶绿素含量的同时将实验用提取试液回收利用，将叶绿素提取出来，更加直观的确定制品中的叶绿素的含量，由此测定结果对斑兰叶制品的工序进行调整，大大提升斑兰叶制品的质量。
2、为实现
3、步骤一、将斑兰叶和斑兰叶制品使用提取剂进行处理后得到提取液a和提取液b；
4、步骤二、将提取液a和提取液b分别等量分成三组试样，使用分光光度计在645nm-663nm的波长范围内分别对提取液a的三组试样和提取液b的三组试样进行吸光度测定；
5、步骤三、待吸光度测定完成后分别将提取液a和提取液b的三组试样集中回收，然后使用石油醚和蔗糖柱对提取液a和提取液b进行处理，得到两组分层的蔗糖柱，然后对蔗糖柱进行分段提取，得到叶绿素a溶液和叶绿素b溶液；
6、步骤四、根据吸光度测定数据计算叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量，同时对步骤三中提取的叶绿素a溶液和叶绿素b溶液进行浓缩提纯并称重。
7、进一步改进在于：所述步骤一中对斑兰叶的处理具体包括
8、第一步、将新鲜的斑兰叶洗净后切成1mm宽的细条，随后将其放入冰箱中冷冻1h，得到待提取样品；
9、第二步、将提取剂导入离心管中并使用水浴加热法加热到50℃后，取1g冷冻的待提取样品放入提取剂中充分振摇后放入暗柜中静置3h；
10、第三步、将静置后分层的上清液抽出，使用提取液将其定容至30ml，即得到提取液a。
11、进一步改进在于：所述步骤一中对斑兰叶制品的处理具体包括
12、第一步、称取1g的斑兰叶制品，将其切碎后放入试管中并加入提取剂，再将试管放入振荡器中进行3-5min的振荡处理后静置，得到振荡液；
13、第二步、使用滤纸对振荡液进行多次过滤，得到过滤液；
14、第三步、使用提取液冲洗漏斗，同时将其定容至30ml，即得到提取液b。
15、进一步改进在于：所述步骤一中提取剂为80％丙酮和95％乙醇中的一种，所述步骤二中进行吸光度测定时以纯提取剂为空白对照进行测试，每组试样重复两次测试并记录数据并计算平均值。
16、进一步改进在于：所述步骤三中具体处理方法为
17、第一步、将提取液a和提取液b分别加入石油醚中后轻摇，并加入蒸馏水直至分层，分出两组石油醚混合液；
18、第二步、随后使用蒸馏水净化两组石油醚混合液，并使用含有石油醚和草酸的甲醇溶液进行多次清洗，得到两组悬浮液；
19、第三步、使用无水硫酸钠对两组悬浮液进行干燥，随后将两组干燥后的悬浮液渗入蔗糖柱中再次用石油醚清洗，得到叶绿素分层的蔗糖柱；
20、第四步、将蔗糖柱上分层的两段中心部分别切下，将其分别放入醚中，然后对其进行过滤、洗提和蒸馏水清洗，然后使用硫酸钠干燥后过滤，得到叶绿素a溶液和叶绿素b溶液。
21、进一步改进在于：所述步骤四中叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量计算公式分别如下
22、ga＝(aa×v)÷(m×l)
23、gb＝(ab×v)÷(m×l)
24、g总＝ga+gb
25、其中aa和ab分别表示叶绿素a在645nm的波长下和叶绿素b在663nm的波长下的吸光度平均值，v表示提取剂稀释倍数，m表示步骤一中样品的重量，l表示提取液的体积。
26、进一步改进在于：所述步骤四中浓缩采用真空浓缩，随后进行离心和过滤的方法提取出叶绿素a和叶绿素b。
27、本专利技术的有益效果为：本专利技术通过对斑兰叶和斑兰叶制品中的叶绿素分为叶绿素a和叶绿素b进行精细测定，并在测定后将提取液试样进行提取处理，在精准测定叶绿素含量的同时将实验用提取试液回收利用，将叶绿素提取出来，更加直观的确定制品中的叶绿素的含量同时避免浪费，由此测定结果对斑兰叶制品的工序进行调整，大大提升斑兰叶制品的质量。
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1.一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于，包括以下方法：
2.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤一中对斑兰叶的处理具体包括：
3.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤一中对斑兰叶制品的处理具体包括：
4.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤一中提取剂为80％丙酮和95％乙醇中的一种，所述步骤二中进行吸光度测定时以纯提取剂为空白对照进行测试，每组试样重复两次测试并记录数据并计算平均值。
5.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤三中具体处理方法为：
6.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤四中叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量计算公式分别如下
7.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤四中浓缩采用真空浓缩，随后进行离心和过滤的方法提取出叶绿素a和叶绿素b
...【技术特征摘要】
1.一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于，包括以下方法：
2.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤一中对斑兰叶的处理具体包括：
3.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤一中对斑兰叶制品的处理具体包括：
4.根据权利要求1所述的一种斑兰叶及其制品中叶绿素的测定方法，其特征在于：所述步骤一中提取剂为80％丙酮和95％乙醇中的一种，所述步骤二中进行吸光度测定时以纯提取剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳欢，徐志军，张雪娇，张小燕，欧阳诚，张优云，陈新荣，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院湛江实验站，
类型：发明
国别省市：
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