【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域。具体地说，本专利技术涉及表达人阿片结合细胞粘附蛋白(opcml)的复制性溶瘤痘苗病毒及其构建方法和应用。
技术介绍
1、癌症一直严重威胁着人类的生命健康，是导致人类死亡的主要原因之一。根据世界卫生组织国际癌症研究机构(iarc)发布的最新的癌症统计报告显示2020年全球估计有1929万新发癌症病例和996万癌症死亡病例，其中中国新发癌症病例数为457万，占23,7％，癌症死亡例数为300万，占30％，我国癌症的新发病例数和死亡人数均居全球第一。恶性肿瘤的传统常规治疗手段主要是手术、化疗和放疗。但是，由于多数肿瘤被发现时已是晚期和放化疗的毒副作用比较大，这些治疗方法往往收效甚微。
2、溶瘤病毒(oncolytic virus，ovs)由于可选择性地感染并杀死肿瘤细胞及释放肿瘤抗原启动机体的抗肿瘤免疫而成为肿瘤治疗的新热点。ovs领域的大量研究工作聚焦在其基因组改造以增加对肿瘤细胞的亲和力，改善病毒的选择性复制和裂解潜力，增强宿主抗肿瘤免疫，经基因修饰改造的1型单纯疱疹病毒t-vec(imlygic，安进公司)是全球首个获得fda批准用于黑色素瘤治疗的溶瘤病毒；2021年，溶瘤病毒delytact获批用于治疗恶性胶质瘤。针对溶瘤病毒开发肿瘤治疗创新药物研发具有重要意义。
3、因此，本领域需要开发抗肿瘤的溶瘤病毒药物。
技术实现思路
1、本专利技术的目的就是提供抗肿瘤的溶瘤病毒药物。
2、在本专利技术的第一方面，提供了一种重
3、在另一优选例中，所述的重组溶瘤病毒选自下组：痘苗病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒(adenovirus)。
4、在另一优选例中，所述的单纯疱疹病毒为单纯疱疹病毒1型(hsv-1)或单纯疱疹病毒2型(hsv-2)。
5、在另一优选例中，所述的痘苗病毒选自下组：痘苗病毒copenhagen株、痘苗病毒western reserve株、痘苗病毒lister株、痘苗病毒wyeth株、痘苗病毒天坛株。
6、在另一优选例中，所述重组溶瘤病毒含有外源的opcml基因。
7、在另一优选例中，所述的opcml为人opcml或修饰的人opcml。
8、在另一优选例中，所述opcml的氨基酸序列如seq id no:1所示或与seq id no:1所示序列具有≥95％、≥96％、≥97％、≥98％或≥99％的序列同一性。
9、在另一优选例中，所述痘苗病毒的功能性痘苗生长因子f3l区基因全部或部分缺失。
10、在另一优选例中，所述的f3l区基因全部或部分缺失的痘苗病毒具有肿瘤细胞特异扩增性。
11、在另一优选例中，所述痘苗病毒包含功能性f2l和/或f4l基因。
12、在本专利技术的第二方面，提供了如本专利技术第一方面所述的重组溶瘤病毒的制备方法，包括如下步骤:
13、(a)提供待改造的溶瘤病毒；
14、(b)将opcml编码核酸引入所述待改造的溶瘤病毒中，从而得到所述的重组溶瘤病毒。
15、在另一优选例中，所述的opcml为人opcml。
16、在另一优选例中，在步骤(b)中，通过重组载体将所述的opcml编码核酸引入所述待改造的溶瘤病毒中，所述的重组载体含有opcml编码核酸。
17、在另一优选例中，所述的待改造的溶瘤病毒为痘苗病毒，优选为痘苗病毒copenhagen株。
18、在另一优选例中，所述的重组载体为质粒。
19、在另一优选例中，所述的重组载体为puc57-vv质粒。
20、在另一优选例中，所述opcml编码核酸插入或替换痘苗病毒的f3l区。
21、在另一优选例中，所述痘苗病毒的f3l区基因全部或部分缺失。
22、在本专利技术的第三方面，提供了一种活性成分组合，所述的活性成分组合包括：
23、(m1)作为第一活性成分的如本专利技术第一方面所述的重组溶瘤病毒；和
24、(m2)作为第二活性成分的免疫检查点抑制剂。
25、在另一优选例中，所述的免疫检查点抑制剂为特异性结合所述免疫检查点蛋白的抗体或其片段，优选为单克隆抗体、人源化抗体、全人源抗体、或其融合蛋白、或其组合。
26、在另一优选例中，所述的免疫检查点抑制剂抑制选自下组的免疫检查点蛋白：细胞毒性t淋巴细胞抗原4(ctla4)、程序性细胞死亡蛋白1(pd-1)、pd-l1、pd-l2、b7-h3、b7-h4、疮疹病毒侵入介体(hvem)、t细胞膜蛋白3(tim3)、半乳糖凝集素9(gal9)、淋巴细胞活化基因3(lag3)、含v结构域免疫球蛋白(ig)的t细胞活化抑制剂(vista)、杀伤细胞免疫球蛋白样受体(kir)、b和t淋巴细胞衰减子(btla)、具有ig和π′iμ结构域的t细胞免疫受体(tigit)、吲哚胺2,3-二加氧酶(ido)或其组合。
27、在另一优选例中，所述免疫检查点抑制剂为特异性结合pd-1或pd-l1的单克隆抗体。
28、在另一优选例中，所述免疫检查点抑制剂选自下组：rmp1-14单抗、bms-936559、阿特朱单抗、度伐单抗(durvalumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、纳武单抗、派姆单抗(pembrolizumab)、兰洛利珠单抗(lambrolizumab)、或其组合。
29、在另一优选例中，所述的第二活性成分包括一种或多种免疫检查点抑制剂。
30、在本专利技术的第四方面，提供了如本专利技术第一方面所述的重组溶瘤病毒、或如本专利技术第三方面所述的活性成分组合在制备用于在有需要的受试者中治疗肿瘤的药物组合物或药盒中的用途。
31、在另一优选例中，所述的肿瘤选自下组：卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、结直肠癌、骨肉瘤、或其组合。
32、在另一优选例中，所述的肿瘤选自下组：卵巢癌、膀胱癌、或其组合。
33、在另一优选例中，所述的肿瘤包括转移性肿瘤和非转移性肿瘤。
34、在另一优选例中，所述的肿瘤为腹腔转移性卵巢癌。
35、在另一优选例中，所述有需要的受试者为人类或非人类哺乳动物。
36、在另一优选例中，所述的非人类哺乳动物包括猴、猩猩、牛、猪、狗、羊、兔或鼠。
37、在另一优选例中，所述有需要的对象为小鼠或人。
38、在本专利技术的第五方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含：
39、(1)治疗有效量的如本专利技术第一方面所述的重组溶瘤病毒、或如本专利技术第三方面所述的活性成分组合、或其组合；和
40、(2)药学上可接受的载体。
41、在另一优选例中，所述的药物组合物为注射剂型。
42、在另一优选例中，所述的药物组合物通过瘤内、静脉内或腹膜内注射施用。...
【技术保护点】
1.一种重组溶瘤病毒，其特征在于，所述的重组溶瘤病毒表达阿片结合细胞粘附蛋白(OPCML)。
2.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，所述的重组溶瘤病毒选自下组：痘苗病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒。
3.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，所述的痘苗病毒选自下组：痘苗病毒Copenhagen株、痘苗病毒Western Reserve株、痘苗病毒Lister株、痘苗病毒Wyeth株、痘苗病毒天坛株。
4.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，所述重组溶瘤病毒含有外源的OPCML基因。
5.一种如权利要求1所述的重组溶瘤病毒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:
6.如权利要求5述的制备方法，其特征在于，所述的待改造的溶瘤病毒为痘苗病毒，优选为痘苗病毒Copenhagen株。
7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述OPCML编码核酸插入或替换痘苗病毒的F3L区。
8.一种活性成分组合，其特征在于，所述的活性成分组合包括：
9.如权利要求8所述的活性成分组合，其特
10.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒、或如权利要求8所述的活性成分组合在制备用于在有需要的受试者中治疗肿瘤的药物组合物或药盒中的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种重组溶瘤病毒，其特征在于，所述的重组溶瘤病毒表达阿片结合细胞粘附蛋白(opcml)。
2.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，所述的重组溶瘤病毒选自下组：痘苗病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒。
3.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，所述的痘苗病毒选自下组：痘苗病毒copenhagen株、痘苗病毒western reserve株、痘苗病毒lister株、痘苗病毒wyeth株、痘苗病毒天坛株。
4.如权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，所述重组溶瘤病毒含有外源的opcml基因。
5.一种如权利要求1所述的重组溶瘤病毒的制备方法，其特...
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