【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及动物疫病检测领域，具体涉及一种禽流感np蛋白单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、禽流感（avian influenza，ai）是禽流感病毒（aiv）感染家禽后的一种传染性综合征疾病，临床症状主要表现为不同程度的呼吸症状、产蛋下降、水肿腹泻，甚至急性感染的禽只会死亡，感染该病毒后死亡率100%。根据禽类个体的发病症状分为高致病性禽流感（hpai）和低致病性禽流感（lpai）。同时，根据病毒粒子表面的血凝素（ha）和神经氨酸酶（na）抗性的不同，进一步划分为不同的亚型，目前以鉴定的ha亚型有16余种h1-h16、na亚型有9种，n1-n9。禽流感病毒的ha和na特别容易变异，且能通过交换基因片段实现病毒重新组合，从而产生各种亚型病毒，并且各亚型之间不存在交叉保护的作用。
2、aiv在电镜下观察其形态为球形，直径约为20-120nm，表面有囊膜和纤突。囊膜上有呈辐射状密集排列棒状纤突：血凝素和神经氨酸酶。基因组为含有８个片段的单股负链rna，每个片段的rna基因都含有高度保守的5’和3’核苷酸编码序列，这些保守序列中的部分核苷酸序列通过反相互补，形成杆状结构的rna聚合酶结合位点，８个rna片段编号1-8分别编码10种蛋白质（pb2、pb1、pa、ha、np、na、m1、m2、ns1和ns2）。
3、核蛋白np（nucleoprotein）是由rna编码，基因长度1565bp，分子质量约60kda。np蛋白为单体磷酸化多肽，富含精氨酸，是病毒粒子核衣壳的主要构成部分，np蛋白与病毒rna结合形成核
4、自1878年在意大利北部的某个养殖场首次报道了一种引起家禽群体死亡的疾病，在1901年确定该病是一种病毒性的疾病，直至1955年才鉴定为流感病毒。禽流感自爆发以来，不仅给养殖业带来巨大经济损失，并对人类的健康受到威胁。高致病性的h5和h7亚型禽流感已被世界卫生组织列为a类动物传染病，我国列为一类动物传染病。目前hpai流行的主要为h5和h7两种亚型，lpai主要是h9亚型；通过对近几年的流行病学调查，高致病性毒株存在严重的病毒突变，像h5n1、h7n9、h9n2等；低致病性的主要流行在国内的活禽市场。病毒的突变，不断地给防疫和疫苗的研制，带来了巨大挑战，同时将检测方法凸显的尤为重要。
5、目前对于禽流感病毒的检测方法，主要有三大类，病原学诊断、血清学诊断和分子生物诊断。传统的病原学诊断方法，主要是鸡胚分离。该方法对于试验周期和实验人员的操作十分重要，必须在三级实验室内操作进行。血清学检测实验目前在临床实验上主要应用的有ha和hi、elisa、试纸卡等。ha和hi可以较准确的确定流感病毒亚型，试纸卡高效快速的检测对于临床紧急的普筛十分方便，而elisa具有较高的敏感性和特异性，在科研和生产中都是应用极高的。
技术实现思路
1、为此，本专利技术提供了一种禽流感np蛋白单克隆抗体及其应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术实施例提供如下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体含有名称为vh的重链可变区和名称为vl的轻链可变区；
4、所述单克隆抗体的vh的氨基酸序列如seq id no. 1所示；
5、所述单克隆抗体的vl的氨基酸序列如seq id no. 3所示；
6、所述vh和vl均由互补决定区和框架区组成，所述互补决定区均由cdr1、cdr2和cdr3组成；
7、所述单克隆抗体的vh的cdr1的氨基酸序列如seq id no. 5所示；
8、所述单克隆抗体的vh的cdr2的氨基酸序列如seq id no. 6所示；
9、所述单克隆抗体的vh的cdr3的氨基酸序列如seq id no. 7所示；
10、所述单克隆抗体的vl的cdr1的氨基酸序列如seq id no. 8所示；
11、所述单克隆抗体的vl的cdr2的氨基酸序列如seq id no. 9所示；
12、所述单克隆抗体的vl的cdr3的氨基酸序列如seq id no. 10所示。
13、第二方面，本专利技术提供上述禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体，其特征在于：
14、编码所述单克隆抗体的vh的核苷酸序列如序列表中seq id no. 2所示；
15、编码所述单克隆抗体的vl的核苷酸序列如序列表中seq id no. 4所示。
16、第三方面，本专利技术提供下述（a1）-（a4）中任一种生物材料：
17、（a1）含有编码上述单克隆抗体核苷酸序列的表达盒；
18、（a2）含有编码上述单克隆抗体核苷酸序列的重组载体；
19、（a3）含有编码上述单克隆抗体核苷酸序列的重组菌；
20、（a4）含有编码上述单克隆抗体核苷酸序列的转基因细胞系。
21、第四方面，本专利技术提供上述的禽流感病毒np蛋白单克隆抗体在制备禽流感病毒检测试剂盒和检测试纸条中的应用。
22、优选地，所述试纸条为胶体金检测试纸条，或荧光微球检测试纸条，或乳胶微球检测试纸条；
23、优选地，所述试剂盒竞争elisa抗体检测试剂盒。
24、第五方面，本专利技术提供一种禽流感检测试剂盒，其特征在于，活性成分包含上述禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体。
25、第六方面，本专利技术提供一种禽流感检测试纸条，其特征在于：t线包被上述禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体。
26、本专利技术的有益效果：
27、本专利技术提供了一种禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体及其应用，以应用于对np蛋白的检测，不仅特异性强、灵敏度高，而且具有良好的广谱性。所述单抗能够与不同亚型的禽流感病毒发生反应，为生产养殖、临床和实验室的快速检测提供有力工具。利用该抗体制备的禽流感病毒检测试纸条具有灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单、检测时间短、适合各种单位使用、储存简单、保质期长的优点，具有较高的实用价值和推广价值。
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1.一种禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体含有名称为VH的重链可变区和名称为VL的轻链可变区；
2.根据权利要求1所述的禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体，其特征在于：
3.下述（a1）-（a4）中任一种生物材料：
4.根据权利要求1-3任一所述的禽流感病毒NP蛋白单克隆抗体在制备禽流感病毒检测制品中的应用。
5.一种禽流感检测试剂盒，其特征在于，活性成分包含权利要求1所述的禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体。
6.一种禽流感检测试纸条，其特征在于：T线包被权利要求1所述的禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体。
【技术特征摘要】
1.一种禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体含有名称为vh的重链可变区和名称为vl的轻链可变区；
2.根据权利要求1所述的禽流感病毒np蛋白的单克隆抗体，其特征在于：
3.下述（a1）-（a4）中任一种生物材料：
4.根据权利要求1-3...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁斌，巩玉洁，赵松，赵荣茂，张琼林，周进宝，陈娟，
申请(专利权)人：北京纳百生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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