【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及dna传感器检测领域，具体涉及一种基于dna传感器的lamp检测方法。
技术介绍
1、环介导等温扩增（lamp）是一种在等温条件下对少量目标dna快速特异扩增的技术。
2、相关技术中的lamp检测技术都是基于变色反应和荧光染料探针技术。变色反应主要依赖于lamp扩增反应过程中释放了副产物---氢离子，引起反应体系ph的变化，从而致使ph指示剂颜色的改变。这是一种间接的判断方法，判断结果仅依赖于肉眼颜色的变化，在反应过程中若因外界因素或样本溶液ph稳定性的破坏，会出现非扩增而产生的颜色变化，严重影响结果。荧光染料探针中的自发光荧光染料与ph指示剂原理大致相同，都依赖于反应过程中的副产物。另一种荧光染料探针是基于自身与lamp扩增产物产生的dna嵌入式结合，从而释放荧光信号，这是一种较为直接的对扩增dna的检测方法，但lamp反应会出现非特异性和非模板性的扩增产生dna，嵌入式荧光探针无法区分。
3、上述问题是目前亟待解决的。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种基于电化学dna传感器的lamp检测方法。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种基于电化学dna传感器的lamp检测方法，包括：
3、电化学dna传感器制备；
4、通过核酸外切酶ⅲ对lamp产物进行预处理；
5、通过电化学dna传感器制备对预处理后的lamp产物进行电信号检测。
6、进一步的，所述电化学dna传感
7、进一步的，所述封闭剂为6-巯基己醇mch、巯基己烷ht、二乙基二硫代氨基甲酸钠dedtc中的任意一种。
8、进一步的，所述通过核酸外切酶ⅲ对lamp产物进行预处理的步骤包括：
9、制备lamp产物；
10、配置核酸外切酶ⅲ反应液；
11、将核酸外切酶ⅲ反应液与lamp产物1：1混合，对lamp产物的双链dna进行切割，完成预处理。
12、进一步的，所述配置核酸外切酶ⅲ反应液，即，将无酶水、核酸外切酶ⅲ缓冲液以及核酸外切酶ⅲ按照19：5：1的比例进行混合，完成核酸外切酶ⅲ反应液的制备。
13、进一步的，所述将核酸外切酶ⅲ反应液与lamp产物1：1混合，对lamp产物的双链dna进行切割，完成预处理的步骤中，将所述将核酸外切酶ⅲ反应液与lamp产物1：1混合，将混合液在35-40℃下反应30-60分钟。
14、进一步的，所述通过电化学dna传感器制备对预处理后的lamp产物进行电信号检测的步骤包括：
15、在预处理后的lamp产物加入信号探针，混匀溶液；
16、将溶液滴在电化学dna传感器的电极检测区域，杂交培育；
17、电极冷却至室温，通过适配器连接至电化学工作站，进行数据测量。
18、进一步的，所述在预处理后的lamp产物加入信号探针，混匀溶液的步骤中，溶液的浓度为15um。
19、进一步的，所述将溶液滴在电化学dna传感器的电极检测区域，杂交培育的步骤中，杂交培育的温度为30-50℃，时间为20-50分钟。
20、进一步的，所述电极冷却至室温，通过适配器连接至电化学工作站，进行数据测量的步骤中，数据测量的方法为循环伏安法、线性伏安法、方波伏安法中的任意一种。
21、本专利技术的有益效果是，本专利技术提供了一种基于电化学dna传感器的lamp检测方法，包括：电化学dna传感器制备；通过核酸外切酶ⅲ对lamp产物进行预处理；通过电化学dna传感器制备对预处理后的lamp产物进行电信号检测。应用核酸外切酶ⅲ对lamp扩增产物进行处理，使得lamp产物中靶标区域单链dna暴露出来，增强电化学dna传感器检测的灵敏度，整个检测过程无需洗涤，避免了复杂的操作，减少误差。
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1.一种基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，
3.如权利要求2所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，
4.如权利要求1所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，
5.如权利要求1所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，
6.如权利要求1所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，所述通过电化学DNA传感器制备对预处理后的LAMP产物进行电信号检测的步骤包括：
7.如权利要求6所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，所述在预处理后的LAMP产物加入信号探针，混匀溶液的步骤中，溶液的浓度为15uM。
8.如权利要求6所述的基于电化学DNA传感器的LAMP检测方法，其特征在于，所述将溶液滴在电化学DNA传感器的电极检测区域，杂交培育的步骤中，杂交培育的温度为30-50℃，时间为20-50分钟。
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...【技术特征摘要】
1.一种基于电化学dna传感器的lamp检测方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的基于电化学dna传感器的lamp检测方法，其特征在于，
3.如权利要求2所述的基于电化学dna传感器的lamp检测方法，其特征在于，
4.如权利要求1所述的基于电化学dna传感器的lamp检测方法，其特征在于，
5.如权利要求1所述的基于电化学dna传感器的lamp检测方法，其特征在于，
6.如权利要求1所述的基于电化学dna传感器的lamp检测方法，其特征在于，所述通过电化学d...
【专利技术属性】
技术研发人员：关国良，王立新，贾瑶瑶，
申请(专利权)人：常州先趋医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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