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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及核苷酸,具体涉及一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的新工艺。
技术介绍
1、核苷酸是由rna(核糖核酸)经过酶解得到,而单核苷酸是在层析分离得过程中得到,目前比较先进的层析分离是由梯度洗脱得到4个单核苷酸,每个单核苷酸再经过纯化,hplc测得纯度≧85%,再进行结晶制备完成。但由于梯度洗脱是单一洗脱液或两种洗脱液混合洗脱,在洗脱过程中往往会出现单核苷酸得混合。比如由于腺苷酸(amp)和尿苷酸(ump)在碱性条件下所带电荷相近,交换吸附在阴离子交换树脂上的能力相近,在梯度洗脱得过程中不容易分离开来,往往在洗脱过程中一起被洗脱下来,形成混合核苷酸,混合核苷酸再通过阳离子交换树脂或阴离子交换树脂进行再次分离。在这个过程中,一方面经过再次层析分离吸附和解析附,会使核苷酸在这个过程中损失,降低了核苷酸得收率;另一方面一次层析分离得时间是很长得,要进行一次上样、水洗、洗脱,时间在3-4天,这样就增加了时间成本。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于针对现有技术的缺陷和不足,提供一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的新工艺。
2、为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案是:一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的新工艺,其创新点在于,包括以下步骤:
3、s1、混合核苷酸浓度在30-40g/l经过3-5倍浓缩得到混合浓缩液,混合液浓度为120-200g/l,然后调ph为2.0-2.3,此时达到amp的等电点,amp的溶解度最低,在此ph下amp开始析出,养晶1h后
4、s2、将获得的过滤液再经过浓缩可得到ump的浓缩液,加入5%盐析剂,调ph为8.5-9.0,再加1倍反溶剂,可使ump析出,过滤ump晶体后浸泡、淋洗、干燥可得到ump成品。
5、进一步的,所述混合核苷酸主要为amp和ump的混合液,所占质量百分比为45%和50%,同时含有少量的cmp 2.0%和gmp 3.0%。
6、采用上述结构后,本专利技术有益效果为:
7、本专利技术是在梯度洗脱得到的混合核苷酸得基础上,利用腺苷酸和尿苷酸得特殊性质,不进行再次层析分离过程,直接进行纯化得到腺苷酸成品和尿苷酸成品的新工艺,提高了核苷酸得收率,降低了时间成本。
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1.一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的新工艺,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的新工艺,其特征在于:所述混合核苷酸主要为AMP和UMP的混合液,所占质量百分比为45%和50%,同时含有少量的CMP 2.0%和GMP 3.0%。
【技术特征摘要】
1.一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的新工艺,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种混合核苷酸中纯化腺苷酸和尿苷酸的...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈修足,邱蔚然,武琳,欧伶,
申请(专利权)人:南通秋之友生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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