【技术实现步骤摘要】
：本专利技术属于抗体，涉及人galectin-3功能抑制性全人源抗体及其在制备抗肿瘤免疫治疗药物中的应用。
技术介绍
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技术介绍
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1、肝癌的发病率在全球范围内仍呈上升趋势，且已成为全球人类健康的一大威胁。以手术治疗为主的临床治疗手段虽然取得了较好的疗效，但是术后复发率仍然很高。近年来，单克隆抗体药物在抗肿瘤治疗中取得良好的疗效，如阿特珠单抗(atezolizumab)、贝伐珠单抗(bevacizumab)、雷莫芦单抗(ramucirumab)等。由此可见开发具有潜在治疗价值的单克隆抗体在抗肿瘤治疗中具有重大意义。
2、半乳糖凝集素家族(galectin family)在进化上较为保守，该家族成员中都含有碳水化合物识别域(carbohydrate-recognition domain，crd)，且各成员之间的crd基序具有高度的结构同源性。galectins可以通过其crd结构域与含n-乙酰乳糖胺的糖缀合物特异性结合，从而发挥功能。该家族根据结构分为3种类型：1)原型半乳凝集素(prototypegalectins)通常只含有一个crd结构域且可以形成同源二聚体，包括galectin-1、galectin-2、galectin-5、galectin-7、galectin-10、galectin-11、galectin-13、galectin-14以及galectin-15；2)嵌合型半乳凝集素(chimera-type galectins)，只有galectin-3属于该类型，galectin-3具有一
3、galectin-3在多种肿瘤组织中表达上调，如肝癌、胆管癌、胰腺癌、甲状腺癌等。另外galectin-3在肿瘤患者血清中的含量也显著升高，例如前列腺癌、胰腺癌、结直肠癌、乳腺癌等。而galectin-3已被认为是甲状腺癌、胃癌、结直肠癌以及某种程度上的胰腺癌的诊断和/或预后标志物。galectin-3可以通过非经典分泌途径如囊泡释放或外泌体等转运到细胞表面和细胞外基质中。肿瘤细胞可以上调galectin-3的表达，并将其分泌到细胞外基质中。而在肿瘤微环境中galentin-3可以结合到细胞表面从而促进肿瘤的生长、侵袭性、转移潜力，同时抑制免疫细胞的活性进而促进免疫逃逸。galectin-3可以与t细胞表面受体(tcell receptor，tcr)结合从而导致tcr表达下调，并通过tcr信号通路抑制t细胞的早期活化。胞外的galectin-3可以结合糖蛋白受体cd45和cd71诱导人胸腺细胞和t细胞的凋亡。由此可见，galectin-3不仅促进肿瘤进展，还可以抑制机体免疫反应从而促进免疫逃逸。另一方面，galectin-3还可以作为心血管疾病的标志物和治疗靶标。在患有急性心肌梗死、急性缺血性脑卒中、心力衰竭、缺血性心肌病及扩张型心肌病患者的血清中，galectin-3的含量也显著升高。
4、fab(fragment antigen-binding)即抗原结合片段，作为小分子单克隆抗体含有完整的抗体轻链(l链)和含有可变区和部分恒定区的重链fd片段，l链与fd片段通过链间二硫键连接形成fab分子。l链与fd片段分别含有3个互补决定区(complementarity-determining region，cdr)，包括lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2、hcdr3。与完整的igg抗体分子相比，fab分子量较小，约为55kda，表达量较高且组织穿透力强，适合制备临床治疗药物；此外fab还可以与药物偶联用于疾病的治疗。
5、本专利技术所涉及到的靶向人galectin-3的单克隆抗体，为全新的抗体序列，可以特异性地识别galectin-3，并且可以抑制galectin-3的促肿瘤进展作用，具有临床抗肿瘤治疗的潜在价值。
技术实现思路
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1、本专利技术目的在于提供靶向人galectin-3的全人源小分子单克隆抗体及其在抗肿瘤治疗中的应用。
2、本专利技术所述单克隆抗体含有轻链和重链，轻链可变区氨基酸序列如seq no.1所示，重链可变区氨基酸序列如seq no.2所示。
3、所述的抗体轻链序列含有cdr1、cdr2、cdr3，分别由lcdr1、lcdr2、lcdr3表示，其氨基酸序列分别如seq no.3、seq no.4、seq no.5所示。
4、所述的抗体重链序列含有cdr1、cdr2、cdr3，分别由hcdr1、hcdr2、hcdr3表示，其氨基酸序列分别如seq no.6、seq no.7、seq no.8所示。
5、本专利技术还提供编码所述抗体的核酸分子，编码轻链可变区和重链可变区的核苷酸序列分别由seq no.9、seq no.10所示。
6、本专利技术是通过噬菌体抗体展示技术所获得的靶向人galectin-3的全人源单克隆抗体，可以用于制备抗肿瘤免疫治疗药物。
7、所述单克隆抗体能够特异性地识别人galectin-3并且可以抑制galectin-3的功能，所述单克隆抗体可以抑制galectin-3与细胞膜表面的糖蛋白结合，促进cd133+肝癌干细胞的细胞分裂以及抗凋亡作用，并能够抑制galectin-3诱导的jurkat(永生化t细胞系)细胞凋亡的作用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种抗人Galectin-3的全人源单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包括：如SEQ IDNO.3所示的轻链CDR1，如SEQ ID NO：4所示的轻链CDR2，如SEQ ID NO：5所示的轻链CDR3；
2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的轻链可变区序列如SEQ ID NO：1所示。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，所述的抗体重链可变区序列如SEQ IDNO：2所示。
4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-3所述的抗体。
5.根据权利要求4所述所述的核酸分子，其特征在于，编码所述抗体的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示。
6.根据权利要求4或5所述的核酸分子，其特征在于，编码所述抗体的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示。
7.含有如权利要求4-6所述核酸分子的生物材料，其特征在于，所述生物材料为质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。
8.一种可用于检测Galectin-3的试剂盒，特征在于，所述试剂盒包
9.如权利要求1-3所述抗体在制备治疗Galectin-3相关疾病的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种抗人galectin-3的全人源单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包括：如seq idno.3所示的轻链cdr1，如seq id no：4所示的轻链cdr2，如seq id no：5所示的轻链cdr3；
2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的轻链可变区序列如seq id no：1所示。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，所述的抗体重链可变区序列如seq idno：2所示。
4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-3所述的抗体。
5.根据权利要求4所述所述的核酸分子，其特征在于，编码所述抗体的轻链可变区...
【专利技术属性】
技术研发人员：江建海，魏湲颜，吴冰蕊，陈启航，黄思敬，吉致，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：
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