【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业，具体为一种收集植物小叶片冻样的方法。
技术介绍
1、植物叶片在植物次生代谢和植物抗逆中有重要作用。因此叶片的取材对于转录组、代谢组、蛋白组检测和研究次生代谢产物的种类、合成路径显得尤为重要。为了减少蒸腾作用且保持体内水分，大多数干旱地区植物的叶片形态较小，不利于短时间内大量收集取样。
2、目前植物叶片取样的方法主要是物理机械法，运用较简单的工具机械分离叶片，这种方法比较适用于叶片形态较大且单一、生长位置方便操作的植物，但这种方法存在效率低的问题，无法短时间内获得足够的数量的叶片冻样进行后续实验。
3、鉴于现有技术的上述缺陷，如何提供一种收集植物小叶片的方法以克服现有小叶片收集过程中存在的问题，受到了越来越多的关注。
4、因此，本专利技术提供一种收集植物小叶片冻样的方法以解决上述提出的问题。
技术实现思路
1、解决的技术问题
2、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种收集植物小叶片冻样的方法，具备收集效率高，可短时间内得到大量小叶片冻样，且适用于多种植物等优点，解决了目前方法效率低的问题，无法短时间内获得足够的数量的叶片冻样进行后续实验的问题。
3、技术方案
4、为实现上述收集效率高，可短时间内得到大量小叶片冻样，且适用于多种植物目的，本专利技术提供如下技术方案：
5、一种收集植物小叶片冻样的方法，可短时间内大量获得难以批量收集的植物小叶片，包括以下步骤：
6、步骤一
7、步骤二：用镊子夹出冷冻后茎段，置于液氮预冷后的保温桶圆盘盖上；
8、步骤三：用镊子轻轻敲打茎段，使所有小叶片均掉落于圆盘盖中；
9、步骤四：全部集中倒入下端连有预冷后的离心管的漏斗中；
10、步骤五：待收集完毕迅速将50cm棉线绳一端放入离心管口1.5cm后盖好盖子，放入液氨罐中。
11、优选的，所述步骤一中所选植物为四合木或狭叶锦鸡儿中的一种。
12、优选的，当所述植物为四合木时，所述成熟植物茎段为3年生健康的带叶片的四合木茎段；当所述植物为狭叶锦鸡儿时，所述成熟植物茎段为1-2年生健康的带叶的狭叶锦鸡儿茎段。
13、优选的，所述步骤一中得到植物带叶茎段，具体包括：
14、使用枝剪在植物枝条部位剪下数段长度为10cm左右的茎段，迅速将其全部浸入盛满液氮的不锈钢保温桶内部10s-15s。
15、优选的，所述步骤三中用镊子将冷冻叶片以外的杂质挑出并去除。
16、优选的，所述圆盘盖为不锈钢保温桶配套盖子。
17、优选的，所述步骤四中离心管提前放入液氮中预冷10s-15s。
18、优选的，所述步骤五中离心管规格为50ml离心管，将棉线绳另一端拴系在液氮罐盖子外部提手上，方便后续取出承装冻样的离心管。
19、与现有技术相比，本专利技术提供了一种收集植物小叶片冻样的方法，具备以下有益效果：
20、1、该收集植物小叶片冻样的方法，通过液氮冷冻后分离植物茎段上小叶片，可短时间内得到大量小叶片冻样；同时该方法适用于多种植物，为探索小叶片植物的叶片中次生代谢产物及其相关合成路径等研究提供了实验条件。
21、2、该收集植物小叶片冻样的方法，通过使用液氮预冷后工具，在不损伤小叶片细胞结构和不添加外源化学试剂的条件下，完整的保留并收集得到植物小叶片冻样，很大程度保留了小叶片的完整性和特异性。
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1.一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于可短时间内大量获得难以批量收集的植物小叶片，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述步骤一中所选植物为四合木或狭叶锦鸡儿中的一种。
3.根据权利要求2所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，当所述植物为四合木时，所述成熟植物茎段为3年生健康的带叶片的四合木茎段；当所述植物为狭叶锦鸡儿时，所述成熟植物茎段为1-2年生健康的带叶的狭叶锦鸡儿茎段。
4.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述步骤一中得到植物带叶茎段，具体包括：
5.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述步骤三中用镊子将冷冻叶片以外的杂质挑出并去除。
6.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述圆盘盖为不锈钢保温桶配套盖子。
7.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述步骤四中离心管提前放入液氮中预冷10s-15s。
8.根据权利要求1
...【技术特征摘要】
1.一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于可短时间内大量获得难以批量收集的植物小叶片，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述步骤一中所选植物为四合木或狭叶锦鸡儿中的一种。
3.根据权利要求2所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，当所述植物为四合木时，所述成熟植物茎段为3年生健康的带叶片的四合木茎段；当所述植物为狭叶锦鸡儿时，所述成熟植物茎段为1-2年生健康的带叶的狭叶锦鸡儿茎段。
4.根据权利要求1所述的一种收集植物小叶片冻样的方法，其特征在于，所述步骤一中得到植物带叶茎段，具...
【专利技术属性】
技术研发人员：王超，徐军，李国婧，王瑞刚，王茜，王娟，刘斯颖，冯天雨，李兴朝，王博文，
申请(专利权)人：包头华泰水土保持生态技术咨询有限公司，
类型：发明
国别省市：
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