【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物生产，具体涉及一种观赏类宫廷草的组织培养方法。
技术介绍
1、观赏水草色彩丰富，外观雅致，以美化环境，净化空气，具有极高的观赏价值。宫廷草是一种很容易配置的观赏水草，属于双子叶类水草，适应能力强，生长迅速，形态美丽，叶型舒展，容易成活，特别是能够在开缸初期大量吸收养分，有效抑制藻类的滋生。所以深受广大玩家的欢迎。而且具有重要的生态价值，它可以维持生物多样性，为水生生物提供了丰富的食物来源、栖息地和繁殖场所，还具有净化水质的作用。
2、植物组织培养是一种将植物体的部分细胞或组织与母体分离，在适当的条件下加以培养，使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。原理是来自植物细胞的全能性分化能力，也就是植物体内的某一类细胞，通过无菌条件下将植物的部分组织接种在专用培养基上，获得再生的完整植株，它不仅能保持原有品种的固有性状和特性，还能节约繁殖材料，繁殖速度快，节省土地，以把除去病菌，进行工厂化育苗，采用组培方法繁殖，复壮品种，使个体发育向年轻阶段转化。传统的宫廷类水草主要采用温室分株繁殖为主，温度如果在22-25℃则全年可以进行繁殖工作。但由于温室栽培的环境与水族缸的环境差异较大，使宫廷水草在转水过程中非常容易死亡。另外，温室栽培的宫廷草容易携带各种病菌、杂草、螺等，极易引进水族缸污染，影响水族缸美观，失去造景效果的同时，还会引起鱼虫病虫害，甚至死亡。因此我们对此做出改进，提出一种观赏水草宫廷草的组织培养方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于：针对目前存在
2、步骤1外植体准备，选择生长健壮的，无病虫害的植株，剪取再生能力强的含有1-2个叶芽的茎段，用肥皂水清洗，再用自来水冲洗干净，将清洗好的茎段放入超净工作台中，用75％的酒精浸泡30s，再用无菌水将冲洗1-2次，再放入0.1％的升汞溶液中浸泡15min，然后用无菌水清洗3次；
3、步骤2外植体的接种，采用ms基本培养基，添加激素为6-ba和naa，将培养基分装、高压灭菌，灭菌后冷却待用；在超净工作台中，将剪好的茎段接入灭菌后的ms培养基中，接种后放在光强2000-2500lux，光照10h，室温23-25℃的培养室内培养，培养30-35d后，获得分化幼苗；
4、步骤3继代增殖，继代培养所用培养基为ms+2mg/l6-ba+0.1mg/lnaa，切取无菌的幼苗茎段，切成1-2cm长，簇状接入继代培养基，40-45d扩繁一次，通过一个周期的继代培养，制得无菌的宫廷草；
5、步骤4生根，将增殖幼苗单株转接至生根培养基，生根所用培养基为ms+0.25mg/l6-ba+0.1mg/lnaa，诱导生根，获得组培苗，重复步骤3至4连续获得组培苗。
6、作为本专利技术优选的技术方案，步骤1所述外植体表面灭菌用75％的酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗1-2次，然后放入0.1％的升汞溶液中浸泡5min，最后用无菌水清洗3次。
7、作为本专利技术优选的技术方案，步骤1用于分化培养的试验材料为含有1-2个叶芽的生长健壮的、无病虫害的植株的茎段。
8、作为本专利技术优选的技术方案，步骤2所述分化培养基的组成为：ms+0.5mg/l 6-ba+0.1mg/l naa；所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500lux。
9、作为本专利技术优选的技术方案，步骤3所述增殖培养基的组成为：ms+2.0mg/l 6-ba+0.1mg/l naa；所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500lux。
10、作为本专利技术优选的技术方案，步骤4所述用于生根培养的试验材料为增殖幼苗单株，生根培养基为ms+0.25mg/l 6-ba+0.1mg naa，所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500lux。
11、作为本专利技术优选的技术方案，外植体表面灭菌过程中，75％的酒精浸泡时间必须严格控制在30秒±2秒内，以确保酒精能够有效消毒同时不损伤外植体。
12、作为本专利技术优选的技术方案，用于分化培养的试验材料，含有1-2个叶芽的茎段，在接种到分化培养基之前，至少三次的无菌水冲洗，确保表面无残留酒精和升汞溶液。
13、作为本专利技术优选的技术方案，步骤2中的分化培养基中，6-ba的浓度必须精确控制在0.5±0.05mg/l，而naa的浓度则必须精确控制在0.1±0.01mg/l，以确保最佳的分化效果。
14、作为本专利技术优选的技术方案，步骤3中的增殖培养基，每个周期内继代培养的次数控制在3-4次，使得培苗的质量和数量达到最佳平衡。
15、与现有技术相比，本专利技术的有益效果：在本专利技术的方案中：本申请技术方案提供了一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，包括外植体的获得、分化、增殖、生根的步骤，同时获得观赏宫廷草的组培苗和生产苗，既以用于扩大再生产，也以直接用于水草养殖，外植体来源广泛，工艺简单，培养流程简便，步骤少，繁殖系数高，能大量快速获得遗传性状一致的、无菌、无病虫和杂草的种苗，并且不受季节气候变化、自然灾害的影响，适用于大规模的工业化生产。
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1.一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤1所述外植体表面灭菌用75％的酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗1-2次，然后放入0.1％的升汞溶液中浸泡5min，最后用无菌水清洗3次。
3.根据权利要求2所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤1用于分化培养的试验材料为含有1-2个叶芽的生长健壮的、无病虫害的植株的茎段。
4.根据权利要求3所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤2所述分化培养基的组成为：MS+0.5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA；所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500Lux。
5.根据权利要求4所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤3所述增殖培养基的组成为：MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA；所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500Lux。
6.根据权利要求5所
7.根据权利要求6所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，外植体表面灭菌过程中，75％的酒精浸泡时间必须严格控制在30秒±2秒内，以确保酒精能够有效消毒同时不损伤外植体。
8.根据权利要求7所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，用于分化培养的试验材料，含有1-2个叶芽的茎段，在接种到分化培养基之前，至少三次的无菌水冲洗，确保表面无残留酒精和升汞溶液。
9.根据权利要求8所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤2中的分化培养基中，6-BA的浓度必须精确控制在0.5±0.05mg/L，而NAA的浓度则必须精确控制在0.1±0.01mg/L，以确保最佳的分化效果。
10.根据权利要求9所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤3中的增殖培养基，每个周期内继代培养的次数控制在3-4次，使得培苗的质量和数量达到最佳平衡。
...【技术特征摘要】
1.一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤1所述外植体表面灭菌用75％的酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗1-2次，然后放入0.1％的升汞溶液中浸泡5min，最后用无菌水清洗3次。
3.根据权利要求2所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤1用于分化培养的试验材料为含有1-2个叶芽的生长健壮的、无病虫害的植株的茎段。
4.根据权利要求3所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤2所述分化培养基的组成为：ms+0.5mg/l 6-ba+0.1mg/l naa；所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500lux。
5.根据权利要求4所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其特征在于，步骤3所述增殖培养基的组成为：ms+2.0mg/l 6-ba+0.1mg/l naa；所述培养条件为：光照周期10h/d，温度25±2℃，光强为2000-2500lux。
6.根据权利要求5所述的一种观赏水草宫廷草的组织培养方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩靖玲，刘海英，吴士静，张文洋，范永山，王乃红，张伟，王红丽，陈志勇，黄东海，
申请(专利权)人：唐山市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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