【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药有效成分的制备，具体为一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法。
技术介绍
1、氧杂蒽酮类化合物是一类重要的含氧杂环化合物，广泛存在多种高等植物和微生物中，有些氧杂蒽酮类化合物具有重要的药物活性，用于抗癌、抗菌、抗氧化、降血压、抑制hiv-1等，例如：普草梭素(psorospermin)和paecil oxanthone具有独特的抗肿瘤特性，β-mangostin和calozeyloxanthone在抗菌方面有特殊功效。
2、柘木为桑科柘属植物cudraniatricuspidata(carr.)bur.落叶灌木或小乔木，柘木药用部位主要为其干燥的根及藤茎，在1977版中国药典中被收录在穿破石项下，味甘性温无毒，具清热、凉血、通络之功效，主治肺结核，湿热黄疸等。
3、关于氧杂蒽酮类化合物的合成已有文献报道，例如[1]grover，p.k.；shah，g.d.；shah，r.c.j.chem.soc.1955，3982.[2]gobbi，s.；rampa，a.；bisi，a.；belluti，f.；valenti，p.；caputo，a.；zampiron，a.；carrara，m.j.med.chem.2002，45，4931.[3]wang，s.z.；xie，k.；tan，z.；an，x.y.；zhou，x.j.；guo，c.c.；peng，z.h.chem.commun.2009，6469.[4]wang，p.；rao，h.h.；hua，r.m.；li，c.j.org.le
4、上述合成方法均具有一定的局限性，综合国内外相关文献报道，柘木所含成分种类多，主要包括黄酮、氧杂蒽酮、有机酸、多糖和苯丙素5类成分，其中柘木黄酮类成分和氧杂蒽酮类成分是柘木的代表性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、保护神经和保肝等作用，目前已分离鉴定出的柘木黄酮类成分157种、氧杂蒽酮类成分99种，柘木具有丰富的药理活性，加大柘木活性成分的研究和生产，有利于推动柘木资源的深层次利用和其制剂产品的开发，因此，提出一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，以方便对柘木中氧杂蒽酮类有效成分的快速提取。
技术实现思路
1、本专利技术提供的专利技术目的在于提供一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法。通过快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，可以制得一种新化合物1，并且，化合物2和化合物3均为首次在柘木中发现，经过试验，3种化合物均具有良好的抗炎活性，化合物对dpph的清除呈浓度依赖性，在样品浓度为60μm时，3个化合物对dpph的清除率均达到了80％以上，显示出良好的抗氧化活性，并且，3个化合物对h2o2导致的hepg2细胞损伤具有一定的保护作用。
2、为了实现上述抗炎活性良好、抗氧化活性良好和细胞损伤保护的问题，本专利技术提供如下技术方案：一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，包括以下步骤：
3、步骤一、取柘木药材：通过提取溶剂获取柘木药材中可用成分，得到柘木提取液。
4、步骤二、物料处理：将所述柘木提取液进行处理，得到浸膏，进行备用。
5、步骤三、初次分离：将所述浸膏通过硅胶柱层析分离，依次进行梯度洗脱，共得到七部分石油醚-乙酸乙酯洗脱液，进行备用。
6、步骤四、去除主成分：将所述石油醚-乙酸乙酯洗脱液第三部分采用反溶剂沉淀法除去大部分主成分，得到棕红色母液。
7、步骤五、二次分离：将所述棕红色母液浓缩后通过硅胶柱层析分离，依次进行梯度洗脱，将洗脱液分别标记为a1和a2。
8、步骤六、分离a1：将所述a1浓缩后采用快速洗脱hplc制备法分离，收集可制备得到化合物1、化合物2和一个混合组分c1。
9、步骤七、分离c1：将所述c1浓缩后采用套针进样hplc制备法分离，得到化合物3。
10、进一步的，在步骤一中，所述提取溶剂为80％～95％的乙醇，提取四次，料液比分别为6:1、3:1、3:1和3:1，每次提取时间均为2h。
11、进一步的，在步骤二中，所述柘木提取液的处理包括过滤、减压浓缩、收集乙酸乙酯萃取液、浓缩和干燥，所述浓缩液分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。
12、进一步的，在步骤三中，所述浸膏进行梯度洗脱的配比依次为9:1、10:2、10:4、10:8和0：1(v/v)，所述梯度洗脱的试剂为石油醚-乙酸乙酯，收集10:2(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液，收集10:4(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液，按照洗脱顺序依次等量收集七份，分别标记为洗脱液第一部分、洗脱液第二部分、洗脱液第三部分、洗脱液第四部分、洗脱液第五部分、洗脱液第六部分和洗脱液第七部分，收集10:8(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液。
13、进一步的，在步骤四中，所述石油醚-乙酸乙酯洗脱液的第三部分减压浓缩至干得浅棕色固体，所述浅棕色固体用适量10:2～4(v/v)的石油醚-乙酸乙酯溶解后，继续往溶液中滴加甲醇，直至有大量的白色沉淀析出，过滤除掉白色沉淀即可。
14、进一步的，在步骤五中，所述棕红色母液浓缩后进行梯度洗脱的配比为10:3和10:4(v/v)，所述梯度洗脱的试剂为石油醚-乙酸乙酯。
15、进一步的，在步骤六中，所述快速洗脱hplc制备法分离即采用高比例的有机相将分离度大的化合物1和化合物2快速制备得到，分离度小的化合物3以混合组分得到，再进行二次分离。
16、进一步的，所述步骤六中，色谱柱为unisil5-120c18ultra，流速为：10ml/min，流动相为55:45(v/v)乙腈-0.1％甲酸水，在出峰时间段，即13～14min时，收集可制备得到1,3,6,7-四羟基-4-异戊烯基氧杂蒽酮，即化合物1，纯度≥98％，在出峰时间段，即17～18min时，收集可制备得到1,3,6,7-四羟基-2-异戊烯基氧杂蒽酮，即化合物2，纯度≥97％。
17、进一步的，所述步骤六中，由于是快速洗脱，在出峰时间段，即13～14min时，收集可制备得到化合物1；在出峰时间段，即17～18min时，收集可制备得到化合物2；在出峰时间段，即19.5～21min时，收集可制备得到一个混合组分c1。
18、进一步的，所述步骤七中，色谱柱为unisil5-120c18ultra，流速为：10ml/min，流动相为4本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述提取溶剂为80％～95％的乙醇，提取四次，料液比分别为6:1、3:1、3:1和3:1，每次提取时间均为2h。
3.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述柘木提取液的处理包括过滤、减压浓缩、收集乙酸乙酯萃取液、浓缩和干燥，所述浓缩液分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。
4.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤S3中，所述浸膏进行梯度洗脱的配比依次为9:1、10:2、10:4、10:8和0：1(v/v)，所述梯度洗脱的试剂为石油醚-乙酸乙酯，收集10:2(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液，收集10:4(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液，按照洗脱顺序依次等量收集七份，分别标记为洗脱液第一部分、洗脱液第二部分、洗脱液第三部分、洗脱液第四部分、洗脱液第
5.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤S4中，所述石油醚-乙酸乙酯洗脱液的第三部分减压浓缩至干得浅棕色固体，所述浅棕色固体用适量10:2～4(v/v)的石油醚-乙酸乙酯溶解后，继续往溶液中滴加甲醇，直至有大量的白色沉淀析出，过滤除掉白色沉淀即可。
6.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤S5中，所述棕红色母液浓缩后进行梯度洗脱的配比为10:3和10:4(v/v)，所述梯度洗脱的试剂为石油醚-乙酸乙酯。
7.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤S6中，所述快速洗脱HPLC制备法分离即采用高比例的有机相将分离度大的化合物1和化合物2快速制备得到，分离度小的化合物3以混合组分得到，再进行二次分离。
8.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，所述步骤S6中，色谱柱为UniSil5-120C18Ultra，流速为：10ml/min，流动相为55:45(v/v)乙腈-0.1％甲酸水，在出峰时间段，即13～14min时，收集可制备得到1,3,6,7-四羟基-4-异戊烯基氧杂蒽酮，即化合物1，纯度≥98％，在出峰时间段，即17～18min时，收集可制备得到1,3,6,7-四羟基-2-异戊烯基氧杂蒽酮，即化合物2，纯度≥97％。
9.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，所述步骤S6中，由于是快速洗脱，在出峰时间段，即19.5～21min时，收集可制备得到一个混合的组分C1。
10.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，所述步骤S7中，色谱柱为UniSil5-120C18Ultra，流速为：10ml/min，流动相为48:52(v/v)乙腈-0.1％甲酸水，在每次进样后的第36～39min收集色谱峰可制备得到1,3,6,7-四羟基-8-异戊烯基氧杂蒽酮，即化合物3，纯度≥95％。
...【技术特征摘要】
1.一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤s1中，所述提取溶剂为80％～95％的乙醇，提取四次，料液比分别为6:1、3:1、3:1和3:1，每次提取时间均为2h。
3.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤s2中，所述柘木提取液的处理包括过滤、减压浓缩、收集乙酸乙酯萃取液、浓缩和干燥，所述浓缩液分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。
4.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤s3中，所述浸膏进行梯度洗脱的配比依次为9:1、10:2、10:4、10:8和0：1(v/v)，所述梯度洗脱的试剂为石油醚-乙酸乙酯，收集10:2(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液，收集10:4(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液，按照洗脱顺序依次等量收集七份，分别标记为洗脱液第一部分、洗脱液第二部分、洗脱液第三部分、洗脱液第四部分、洗脱液第五部分、洗脱液第六部分和洗脱液第七部分，收集10:8(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱液。
5.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构体化合物的方法，其特征在于，在步骤s4中，所述石油醚-乙酸乙酯洗脱液的第三部分减压浓缩至干得浅棕色固体，所述浅棕色固体用适量10:2～4(v/v)的石油醚-乙酸乙酯溶解后，继续往溶液中滴加甲醇，直至有大量的白色沉淀析出，过滤除掉白色沉淀即可。
6.根据权利要求1所述的一种快速提取柘木中氧杂蒽酮类同分异构...
【专利技术属性】
技术研发人员：王晓，宋祥云，董红敬，耿岩玲，纪文华，
申请(专利权)人：山东省分析测试中心，
类型：发明
国别省市：
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