System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种分离纯化的枸杞多糖及其在神经炎症防治中的应用制造技术_技高网

一种分离纯化的枸杞多糖及其在神经炎症防治中的应用制造技术

技术编号:41555591 阅读:14 留言:0更新日期:2024-06-06 23:41
本发明专利技术提供了一种基于双水相体系的高速逆流色谱分离纯化枸杞多糖的方法,筛选出了乙醇‑饱和硫酸铵‑水‑异丙醇为最佳的双水相体系,确定高速逆流色谱转速为900r/min,流动相流速为0.8mL/min,在此条件下固定相保留率为64%。褐色的枸杞粗多糖经过HSCCC分离得到3个白色的多糖组分LBPs‑1、LBPs‑2和LBPs‑3,并且通过分子量、单糖组成、红外光谱特征、热稳定性和微观形貌对3个多糖组分进行了初步的结构分析,生物活性研究表明不同分子量的枸杞多糖可能通过抑制炎症因子分泌调控神经炎症。本发明专利技术为高速逆流色谱技术在多糖分离纯化中的应用提供了科学依据,通过本研究制备的枸杞多糖具有抑制神经炎症的作用,为枸杞多糖作为神经炎症的保护剂或治疗剂奠定理论与实验基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于功能性多糖制备,具体涉及一种分离纯化的枸杞多糖及其在神经炎症防治中的应用


技术介绍

1、枸杞子为茄科植物宁夏枸杞(lycium barbarum l.)的干燥成熟果实,也是第一批列入“药食同源”物质名单的中药。枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,lbps)是枸杞子的主要活性成分,由半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖等单糖单元通过脱水缩合以糖苷键聚合而成,分子量分布在8-2400kda之间。宽泛的分子量和丰富的单糖组成导致枸杞多糖具有复杂的化学结构和空间构象,进而表现出众多生理活性。

2、多糖的生理活性与其分子量的大小有密切的关系,相同来源不同分子量的多糖片段表现出不同的生物活性和药理作用。目前,分步沉淀法是将粗多糖初步分离成不同分子量片段多糖组分的通用方法,该方法是根据多糖在不同浓度的有机低级醇中溶解度不同的性质,逐级达到分步沉淀。多糖的分子量范围与有机醇的浓度呈负相关,随着有机醇加入量的增加,不同分子量的多糖依次被沉淀出来。但是近年来研究发现,在多糖溶液中加入有机醇时,由于分子内氢键的增强,多糖分子开始脱水,进而发生构象转变和重新组装,这为多糖本身结构、活性及其构效关系的研究带来阻碍。凝胶渗透色谱法和超滤膜分离法都是基于分子排阻原理的分离方法,该类方法也能够将枸杞多糖分离成不同的分子量片段,但是存在死吸附现象。

3、通常枸杞多糖在提取过程中夹带有蛋白质和色素等杂质,需要在进一步分离之前将杂质去除。传统脱除蛋白质的方法有sevage法、三氟三氯乙烷法、三氯乙酸法和酶法,脱除色素的方法有h2o2氧化法、活性炭吸附法和离子交换树脂法等,上述方法在实际应用过程中会出现破坏多糖结构、多糖回收率低等缺陷。

4、高速逆流色谱(high speed countercurrent chromatography,hsccc)是一种连续的液-液分配色谱法,具有无不可逆吸附、制备量大、分离速度快、样品回收率高等优势,广泛应用于天然产物分离中。hsccc对目标组分的分离是根据其在两相溶剂中分配系数的不同而实现的。因此,溶剂系统的选择很大程度上取决于被分离物质的溶解性。常用于hsccc的溶剂系统为ito开发的一种四元或五元溶剂体系,然而大极性化合物在这些溶剂体系中常常倾向于分配到下相,使分配系数太小(k<0.5),因而并不能满足分离制备的要求。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种分离纯化的枸杞多糖及其在神经炎症防治中的应用,从而提高枸杞多糖制备的精细化和开发高附加值的制品。

2、本专利技术首先提供一种分离纯化枸杞多糖的方法,所述的方法是通过高速逆流色谱从枸杞粗多糖中分离纯化枸杞多糖;其中高速逆流色谱使用乙醇、饱和硫酸铵、水和异丙醇作为溶剂系统,且乙醇:饱和硫酸铵:水:异丙醇的重量比为1.4:1.0:2.58:0.3。

3、更进一步的,所述的方法,其中进行高速逆流色谱分离纯化时,设定转速为900r/min、流动相流速为0.5ml/min。

4、所述的枸杞粗多糖,是对枸杞子的水提取液进行过滤制备的。

5、本专利技术还提供上述方法纯化分离的三种枸杞多糖,所述的枸杞多糖由不同摩尔百分比的甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其中枸杞多糖lbps-1的单糖组成摩尔比为1.9:4.9:1.3:8.1:7.6:32.6:41.8;枸杞多糖lbps-2的摩尔比为2.1:4.3:1.5:8.3:5.1:28.6:37.9;枸杞多糖lbps-3的摩尔比为5.9:4.6:1.1:0.7:13.8:66.8:5.3。lbps-1和lbps-2中均含有较高的半乳糖和阿拉伯糖;

6、更进一步的,所述的三种枸杞多糖lbps-1~lbps-3的分子量分别为7.40×104da、2.73×104da和1.47×104da。

7、本专利技术所分离的枸杞多糖可用于制备用于缓解小胶质细胞炎症或神经炎症的制品;

8、本专利技术再一个方面提供一种用于缓解小胶质细胞炎症或神经炎症的制品,所述的制品中包含有上述分离纯化的枸杞多糖。

9、本专利技术构建了双水相体系偶联高速逆流色谱分离纯化枸杞多糖的新方法,为植物多糖高效分离纯化提供了技术支撑,为枸杞多糖在抑制神经炎症相关疾病中的应用提供了科学依据。

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【技术保护点】

1.一种分离纯化枸杞多糖的方法,其特征在于,所述的方法是通过高速逆流色谱来从枸杞粗多糖中分离纯化枸杞多糖;其中高速逆流色谱使用乙醇、饱和硫酸铵、水和异丙醇作为溶剂系统,且乙醇:饱和硫酸铵:水:异丙醇的重量比为1.4:1.0:2.58:0.3。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法,在进行高速逆流色谱分离纯化时,设定转速为900r/min、流动相流速为0.5mL/min。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的枸杞粗多糖,是对枸杞子的水提取液进行过滤制备的。

4.一种枸杞多糖,其特征在于,所述的枸杞多糖是通过权利要求1所述的方法分离纯化的。

5.如权利要求4所述的枸杞多糖,其特征在于,所述的枸杞多糖由不同摩尔百分比的甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成。

6.如权利要求4所述的枸杞多糖,其特征在于,所述的枸杞多糖,其中一种枸杞多糖中甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的摩尔比为1.9:4.9:1.3:8.1:7.6:32.6:41.8;另一种的摩尔比为2.1:4.3:1.5:8.3:5.1:28.6:37.9;第三种的摩尔比为5.9:4.6:1.1:0.7:13.8:66.8:5.3。

7.如权利要求6所述的枸杞多糖,其特征在于,所述的枸杞多糖的分子量分别为7.40×104Da、2.73×104Da和1.47×104Da。

8.权利要求4所述的枸杞多糖在制备用于缓解小胶质细胞炎症或神经炎症的制品中的应用。

9.一种用于缓解小胶质细胞炎症或神经炎症的制品,其特征在于,所述的制品中包含有权利要求4所述的枸杞多糖。

10.如权利要求9所述的制品,其特征在于,所述的制品为功能性食品或药品。

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【技术特征摘要】

1.一种分离纯化枸杞多糖的方法,其特征在于,所述的方法是通过高速逆流色谱来从枸杞粗多糖中分离纯化枸杞多糖;其中高速逆流色谱使用乙醇、饱和硫酸铵、水和异丙醇作为溶剂系统,且乙醇:饱和硫酸铵:水:异丙醇的重量比为1.4:1.0:2.58:0.3。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法,在进行高速逆流色谱分离纯化时,设定转速为900r/min、流动相流速为0.5ml/min。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的枸杞粗多糖,是对枸杞子的水提取液进行过滤制备的。

4.一种枸杞多糖,其特征在于,所述的枸杞多糖是通过权利要求1所述的方法分离纯化的。

5.如权利要求4所述的枸杞多糖,其特征在于,所述的枸杞多糖由不同摩尔百分比的甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成。

6.如权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘建飞郝高峰邸多隆王万龙
申请(专利权)人:中国科学院兰州化学物理研究所
类型:发明
国别省市:

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