【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
提供了用于利用色谱分离技术从源液体中分离免疫球蛋白或其他蛋白质以达到纯化或分离目的的材料和方法。还提供了制备适用于此类技术的色谱材料的方法。
技术介绍
1、从源液体(例如哺乳动物体液或细胞培养物收获物或上清液)中分离蛋白质(例如免疫球蛋白或其他治疗性生物制剂)具有重要的商业利益和价值。还令人感兴趣的是用于诊断、实验室和治疗用途的充分浓缩或纯化形式的蛋白质制剂。然而，蛋白质的纯化常常受到因素影响，例如低产量、使用昂贵的分离介质(色谱介质)、分离介质(例如色谱配体)浸出到产品中以及对提取过程中使用的外来物质的安全处理的担忧。本专利技术寻求解决这些问题中至少一些。
技术实现思路
1、本公开提供了适合用于从生物来源或样品中纯化蛋白质的混合模式色谱配体和色谱基质。还提供了制备色谱基质和使用所公开的色谱配体的方法。
【技术保护点】
1.一种从源溶液纯化蛋白质的方法，所述方法包括：(a)使所述源溶液与混合模式色谱介质接触，所述混合模式色谱介质包含通过其伯胺基团与固体支持物偶联的混合模式色谱配体；和(b)从所述固体支持物上洗脱如此结合的所述蛋白质，所述混合模式介质具有下式：
2.如权利要求1所述的方法，其中X和/或Y被一个、两个或三个独立地选自C1-C10烷基、羧酸基、羰基、苄基、酚基、胺基、吲哚基、胍基、咪唑基、羟基、硫醇基、硫甲基的游离基取代，或X与相邻的氮原子形成吡咯烷。
3.如权利要求1所述的方法，其中Y是氢并且X选自下组：
4.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白质是抗体。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白质是重组蛋白质。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中步骤(a)在pH约4.5至约8.0进行，并且步骤(b)在pH约4.5至约7.5进行。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，所述固体支持物具有中值直径0.5微米或更大的孔，并且所述配体通过1至3个碳原子的链与所述固体支持物偶联。
8.如权利要求1
9.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述固体支持物是膜。
10.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述固体支持物是整料。
11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述源溶液含有浓度为约50mM至约300mM，选自碱金属和碱土金属卤化物的盐。
12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述源溶液含有浓度为约100mM至约150mM，选自碱金属和碱土金属卤化物的盐。
13.一种混合模式色谱介质，其包含与固体支持物偶联的配体，所述配体选自下组：BL431、BL432、BL433、BL434、BL435、BL436、BL438、BL439、BL441和BL442。
14.如权利要求13所述的混合模式色谱介质，其中所述固体支持物包含颗粒并且所述颗粒具有约25微米至约150微米的中值粒径。
15.如权利要求13所述的混合模式色谱介质，其中所述固体支持物包括膜。
16.如权利要求13所述的混合模式色谱介质，其中所述固体支持物包括整料。
17.一种制造混合模式色谱介质的方法，所述方法包括：(a)将二醇官能化固体支持物上的二醇基团氧化，从而将所述二醇官能化固体支持物转化为醛官能化固体支持物；以及(b)将胺官能化配体偶联至所述醛官能化固体支持物，所述胺官能化配体选自下组：BL431、BL432、BL433、BL434、BL435、BL436、BL438、BL439、BL441和BL442。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包含中值粒径为约25微米至约150微米的颗粒。
19.如权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包括膜。
20.如权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包括整料。
21.一种配体，其结构为：
22.如权利要求21所述的配体，其中所述烷基、烯烃或炔烃被一个、两个或三个独立地选自C1-C10烷基、羧酸基、羰基、苄基、酚基、胺基、吲哚基、胍基、咪唑基、羟基、硫醇基、硫甲基的游离基取代，或X与相邻的酰胺原子形成吡咯烷环。
23.如权利要求21所述的配体，其中Y是氢并且X选自下组：
24.如权利要求21-23所述的配体，其中所述配体是手性配体并且所述酰胺基团的立体碳α具有D-构型。
25.如权利要求21-23所述的配体，其中所述配体是手性配体并且所述酰胺基团的立体碳α具有L-构型。
26.如权利要求21-25中任一项所述的配体，其中所述胺基位于邻位、对位或间位。
27.一种色谱树脂，其包括：
28.如权利要求27所述的色谱树脂，其中所述胺基位于邻位、对位或间位。
29.一种混合模式色谱介质，其包含固体支持物和配体并具有下式：
30.如权利要求29所述的混合模式色谱介质，其中X和/或Y被一个、两个或三个独立地选自C1-C10烷基、羧酸基、羰基、苄基、酚基、胺基、吲哚基、胍基、咪唑基、羟基、硫醇基、硫甲基的游离基取代，或X与相邻的氮原子形成吡咯烷。
31.如权利要求29所述的混合模式色谱介质，其中Y是氢并且X选自下组：
32.如权利要求31所述的混合模式色谱介质，其中X和Y均为未取代的C1-C10烷基，其长度相同或不同，并且如果长度相同，则...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种从源溶液纯化蛋白质的方法，所述方法包括：(a)使所述源溶液与混合模式色谱介质接触，所述混合模式色谱介质包含通过其伯胺基团与固体支持物偶联的混合模式色谱配体；和(b)从所述固体支持物上洗脱如此结合的所述蛋白质，所述混合模式介质具有下式：
2.如权利要求1所述的方法，其中x和/或y被一个、两个或三个独立地选自c1-c10烷基、羧酸基、羰基、苄基、酚基、胺基、吲哚基、胍基、咪唑基、羟基、硫醇基、硫甲基的游离基取代，或x与相邻的氮原子形成吡咯烷。
3.如权利要求1所述的方法，其中y是氢并且x选自下组：
4.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白质是抗体。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白质是重组蛋白质。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中步骤(a)在ph约4.5至约8.0进行，并且步骤(b)在ph约4.5至约7.5进行。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，所述固体支持物具有中值直径0.5微米或更大的孔，并且所述配体通过1至3个碳原子的链与所述固体支持物偶联。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述固体支持物包含中值粒径为约25微米至约150微米的颗粒。
9.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述固体支持物是膜。
10.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述固体支持物是整料。
11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述源溶液含有浓度为约50mm至约300mm，选自碱金属和碱土金属卤化物的盐。
12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述源溶液含有浓度为约100mm至约150mm，选自碱金属和碱土金属卤化物的盐。
13.一种混合模式色谱介质，其包含与固体支持物偶联的配体，所述配体选自下组：bl431、bl432、bl433、bl434、bl435、bl436、bl438、bl439、bl441和bl442。
14.如权利要求13所述的混合模式色谱介质，其中所述固体支持物包含颗粒并且所述颗粒具有约25微米至约150微米的中值粒径。
15.如权利要求13所述的混合模式色谱介质，其中所述固体支持物包括膜。
16.如权利要求13所述的混合模式色谱介质，其中所述固体支持物包括整料。
17.一种制造混合模式色谱介质的方法，所述方法包括：(a)将二醇官能化固体支持物上的二醇基团氧化，从而将所述二醇官能化固体支持物转化为醛官能化固体支持物；以及(b)将胺官能化配体偶联至所述醛官能化固体支持物，所述胺官能化配体选自下组：bl431、bl432、bl433、bl434、bl435、bl436、bl438、bl439、bl441和bl442。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包含中值粒径为约25微米至约150微米的颗粒。
19.如权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包括膜。
20.如权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包括整料。
21.一种配体，其结构为：
22.如权利要求21所述的配体，其中所述烷基、烯烃或炔烃被一个、两个或三个独立地选自c1-c10烷基、...
【专利技术属性】
技术研发人员：C·贝利斯勒，廖加利，C·K·阿森辛，E·洛萨诺，
申请(专利权)人：生物辐射实验室股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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