【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种制备原花青素c1的方法，具体涉及一种从山楂中制备原花青素c1的方法，属于。
技术介绍
1、山楂是我国的特有果树，山楂果实自古便是一种食药兼用的植物资源，在东晋的《肘后急备方》、明代的《本草纲目》等医学药方中均记载了其药用方法，具有活血化瘀、理气通脉、化浊降脂之功效。
2、现代研究发现，山楂果实提取物中含有丰富的原花青素，具有调节脂代谢紊乱、血管内皮功能和舒张动脉血管的作用。并且，研究发现山楂提取物中的原花青素组分主要为表儿茶素的聚合体，低聚原花青素主要为表儿茶素、原花青素b2和原花青素c1，成分简单，有利于进一步的分离富集和原花青素的标准化应用。
3、原花青素(proanthocyanidins，pc)是广泛存在于各类植物中的一类具有较好的抗衰老抗氧化作用的多酚类化合物，其是由儿茶素、表儿茶素等单体的不同聚合体构成的一类混合物。通常将五聚体以下称为低聚原花青素(opcs)，将五聚体以上称为高聚原花青素(ppcs)。原花青素具有抗氧化、抗炎、降血脂、抗衰老等多种生物活性，这使得原花青素成为营养学界关注的热点。目前的研究证明opcs组分生物利用率相对高，易被人体吸收，被认为是原花青素中对人体健康发挥有益作用的活性组分，而ppcs组分分子量过大，口服难吸收，造成大量的资源浪费。因此，如何高效利用ppcs组分成为一个关键问题。
4、已有研究发现，原花青素b型三聚体c1具有很好的抗氧化、抗衰老的作用。xuqixia在nature metabolism杂志上发表的文章显示原花青素c1(p
5、迄今为止，已有大量文献和专利对高聚原花青素组分的降解方法进行了探索。如：
6、专利cn109943605a公布了一种均一组分的低聚原花青素制备方法，通过将原花青素物料粉末与米曲霉、黑曲霉等微生物中的一种混合发酵，发酵后经提取液提取，并脱脂、萃取、干燥得原花青素粗品，然后将粗品过树脂柱、洗脱、冻干从而得到均一组分得低聚原花青素。
7、专利cn111138401a公布了一种从荔枝皮中制备低聚原花青素的方法，通过将荔枝皮粉末与水和糖源混合，接种乳酸菌、酵母菌、醋酸杆菌进行两道发酵，发酵产物经浓缩萃取、纯化、干燥获得低聚原花青素。
8、虽然这两种专利技术均能得到低聚原花青素，但是其低聚原花青素产物成分复杂，有效成分及其含量不明确，应用安全性差，群众接受成度低，不利于原花青素的标准化大规模应用。
技术实现思路
1、为解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种从山楂中制备原花青素c1的方法。
2、为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：
3、一种从山楂中制备原花青素c1的方法，包括以下步骤：
4、s1、将山楂破碎、过筛，制得山楂粉末；
5、按一定质量比，将山楂粉末加入乙醇溶液中浸提、离心，旋蒸上清液后使用乙酸乙酯萃取，得下层水相中的高聚原花青素组分和上层乙酸乙酯相中的低聚原花青素组分；
6、s2、将步骤s1所得的高聚物组分，过滤膜灭菌后，与水和糖源混合均匀，组成发酵基质；接种乳酸菌和酵母菌进行发酵，得到发酵液；
7、s3、浸提步骤s2所得的发酵液，离心、浓缩、旋蒸、萃取后，得到低聚原花青素的粗提物；
8、s4、复溶粗提物，稀释后使用液质联用法，检测粗提物和上层乙酸乙酯相中的低聚原花青素组分中原花青素c1的含量。
9、上述步骤s1，过筛为30-100目。
10、上述发酵基质，还包括步骤s1中山楂粉末经离心后的沉淀物。
11、上述步骤s2，按照山楂质量1：10-15(m/v)的比例加入水；按照山楂质量1：0.18-0.22(m/m)的比例加入葡萄糖；
12、所述发酵基质的ph为3。
13、上述步骤s2，酵母菌的接种浓度为2*10^5cfu/ml，接种量为发酵基质体积的1-3％；
14、植物乳杆菌的接种浓度为1*10^7cfu/ml，接种量为发酵基质体积的1-3％；
15、所述发酵的温度为25-37℃，发酵时间为12-24h。
16、上述浸提，使用质量浓度为60％乙醇，用量按照山楂粉末质量1：13-18(m/v)的比例加入；
17、浸提温度为50-55℃，时间为1h。
18、上述离心，转速为4500rpm，时间为20min。
19、上述旋蒸，
20、步骤s1中的旋蒸温度为50℃，旋蒸至原体积的20％-30％；
21、步骤s3中的旋蒸温度为38-40℃，旋蒸至干。
22、上述萃取，乙酸乙酯的用量为按浸提产物体积1：1.25-2(v/v)的配比加入，萃取时间为15-25min。
23、上述复溶使用hplc级甲醇，上述稀释倍数为50-500倍，使用液质联用hplc-ms/ms检测法。
24、本专利技术的有益之处在于：
25、本专利技术的一种原花青素c1的制备方法，以原花青素c1作为目标产物，致力于提高原花青素c1的产量，降低其生产成本，从而推动原花青素的标准化大规模应用。其以山楂为原材料，以60％乙醇为浸提试剂，成本低廉，安全性较高，萃取所用试剂为乙酸乙酯，能够很好地将山楂中的低聚原花青素和高聚物组分分开，并分别提取，以提高产量，安全有效，成本低。
26、本专利技术以山楂作为原料，山楂中低聚原花青素组分组成简单，易于后续分离提纯和标准化应用。且山楂是我国的一种特有果树，自古以来便是一种药食两用的植物，在多种古方书籍中均记载其药效，其社会接受程度较高，具有较好的发展前景。相比目前市面上流通的原花青素制品均为原花青素混合物，常用的原花青素制品原料主要为葡萄籽、蔓越莓、黑枸杞等，原料来源较为单一，所得原花青素组分成分复杂，故而仅用作保健品和日常食品。
27、本专利技术针对已有研究显示原花青素b型三聚体c1具有较好的抗衰老，抗肿瘤活性，具有极高的药用价值，有效克服了其存在的原料中含量极低，导致原花青素c1价格高昂，难以推广使用的问题，具有很强的实用性和广泛地适用性。
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1.一种从山楂中制备原花青素C1的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S1，过筛为30-100目。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵基质，还包括步骤S1中山楂粉末经离心后的沉淀物。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2，按照山楂质量1：10-15（m/v）的比例加入水；按照山楂质量1：0.18-0.22（m/m）的比例加入葡萄糖；
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2，酵母菌的接种浓度为2*10^5CFU/ml，接种量为发酵基质体积的1-3%；
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述浸提，使用质量浓度为60%乙醇，用量按照山楂粉末质量1：13-18（m/v）的比例加入；
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离心，转速为4500rpm，时间为20min。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述旋蒸，
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取，乙酸乙酯的
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述复溶使用HPLC级甲醇，所述稀释倍数为50-500倍，使用液质联用HPLC-MS/MS检测法。
...【技术特征摘要】
1.一种从山楂中制备原花青素c1的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s1，过筛为30-100目。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵基质，还包括步骤s1中山楂粉末经离心后的沉淀物。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s2，按照山楂质量1：10-15（m/v）的比例加入水；按照山楂质量1：0.18-0.22（m/m）的比例加入葡萄糖；
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s2，酵母菌的接种浓度为2*10^5cfu/ml，接种量为发酵基质体积的1-3%；
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：许伟，章水鑫，李建梅，王珺函，谢鹏飞，李敏，
申请(专利权)人：南京华永信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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