【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及犊牛源大肠杆菌治疗，具体为一种耐药菌生物被膜抑制剂及其开发方法。
技术介绍
1、犊牛腹泻是奶牛和肉牛养殖业中常发的一种疾病，多数犊牛开始发病于出生后的2至3天，且该疾病的发病率与死亡率均较高。新生犊牛免疫力较低，一旦感染该疾病会影响犊牛的生长发育，从而降低奶牛和肉牛养殖的经济效益。大肠杆菌可引起犊牛发生腹泻。目前，国内外对于由大肠杆菌引起的犊牛腹泻病，仍主要采用抗菌药物进行治疗，但随着抗菌药物大量、不合规的使用，使犊牛源大肠杆菌的耐药水平持续升高，耐药谱逐渐变广，由于犊牛源大肠杆菌形成生物被膜后可提高自身的耐药性，因此提出了一种耐药菌生物被膜抑制剂及其开发方法。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种耐药菌生物被膜抑制剂及其开发方法，解决了上述
技术介绍
中提出的问题。
2、为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种耐药菌生物被膜抑制剂，由以下成分构成：小檗碱、米诺环素；所述抑制剂用于抑制的生物被膜为犊牛源大肠杆菌生物被膜。
3、可选的，所述小檗碱与米诺环素联合使用。
4、可选的，所述小檗碱可单独使用。
5、所述抑制剂用于抑制犊牛源大肠杆菌生物被膜，显著降低犊牛源大肠杆菌生物被膜强阳性菌株的黏附值，并降低菌株生物被膜的生长、形成，以及从分子水平上降低菌株生物被膜形成相关基因的表达，降低菌株生物被膜的产生。
6、一种耐药菌生物被膜抑制剂的开发方法，包括以下步骤：
7、s
8、s1.1：犊牛源大肠杆菌的分离纯化及初步鉴定；
9、s1.2：犊牛源大肠杆菌的生化鉴定；
10、s1.3：犊牛源大肠杆菌的分子生物学鉴定；
11、s2：犊牛源大肠杆菌生物被膜阳性菌株检测；
12、s3：犊牛源大肠杆菌的体外药物敏感性试验；
13、s4：犊牛源大肠杆菌的体外联合药物敏感性试验；
14、s4.1：小檗碱最低抑菌浓度mic测定；
15、s4.2：体外联合药物敏感性试验；
16、s5：犊牛源大肠杆菌生物被膜黏附值(b)的测定；
17、s6：犊牛源大肠杆菌生长曲线及生物被膜生长曲线的测定；
18、s6.1：犊牛源大肠杆菌生长曲线的测定；
19、s6.2：犊牛源大肠杆菌生物被膜生长曲线的测定；
20、s7：不同药物在不同作用时间下对犊牛源大肠杆菌生物被膜形成的影响；s8：不同药物对生物被膜形成相关基因表达的影响；
21、s8.1：总rna的提取；
22、s8.2：反转录反应；
23、s8.3：实时荧光定量pcr；
24、s9：获取上述试验的结果并进行分析。
25、所述s9：获取上述试验的结果并进行分析的步骤包括：
26、s9.1：犊牛源大肠杆菌的分离、鉴定；
27、s9.1.1：犊牛源大肠杆菌的分离纯化及初步鉴定；
28、s9.1.2：犊牛源大肠杆菌的生化鉴定；
29、s9.1.3：犊牛源大肠杆菌的分子生物学鉴定；
30、s9.2：犊牛源大肠杆菌生物被膜阳性菌株检测；
31、s9.3：犊牛源大肠杆菌的体外药物敏感性试验；
32、s9.3.1：犊牛源大肠杆菌耐药表型；
33、s9.3.2：犊牛源大肠杆菌多重耐药情况；
34、s9.3.3：生物被膜强阳性菌株耐药表型；
35、s9.4：犊牛源大肠杆菌的体外联合药物敏感性试验：
36、s9.5：犊牛源大肠杆菌生物被膜黏附值(b)的测定；
37、s9.5.1：小檗碱单用及联合米诺环素对犊牛源大肠杆菌生物被膜黏附值b的影响；
38、s9.5.2：米诺环素对犊牛源大肠杆菌生物被膜黏附值(b)的影响；
39、s9.6：犊牛源大肠杆菌生长曲线及生物被膜生长曲线的测定；
40、s9.7：不同药物在不同作用时间下对犊牛源大肠杆菌生物被膜形成的影响；
41、s9.8：不同药物对生物被膜形成相关基因表达的影响。
42、本专利技术提供了一种耐药菌生物被膜抑制剂及其开发方法，具备以下有益效果：
43、该耐药菌生物被膜抑制剂及其应用，通过小檗碱联合米诺环素组成的抑制剂，使用时可显著或极显著降低生物被膜强阳性菌株的黏附值，并降低菌株生物被膜的生长、形成，共同减少犊牛源大肠杆菌生物被膜的产生，进而降低菌株的耐药性，并减少大肠杆菌因形成生物被膜后出现反复、持续性感染所引起的疾病。
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1.一种耐药菌生物被膜抑制剂，其特征在于：由以下成分构成：小檗碱、米诺环素；所述抑制剂用于抑制的生物被膜为犊牛源大肠杆菌生物被膜。
2.根据权利要求1所述的一种耐药菌生物被膜抑制剂，其特征在于：所述小檗碱与米诺环素联合使用。
3.根据权利要求1所述的一种耐药菌生物被膜抑制剂，其特征在于：所述小檗碱可单独使用。
4.一种耐药菌生物被膜抑制剂的应用，其特征在于：所述抑制剂用于抑制犊牛源大肠杆菌生物被膜，显著降低犊牛源大肠杆菌生物被膜强阳性菌株的黏附值，并降低菌株生物被膜的生长、形成，以及从分子水平上降低菌株生物被膜形成相关基因的表达，降低菌株生物被膜的产生。
5.一种耐药菌生物被膜抑制剂的开发方法，其特征在于：包括以下步骤：
6.根据权利要求1所述的一种耐药菌生物被膜抑制剂的开发方法，其特征在于：所述S9：获取上述试验的结果并进行分析的步骤包括：
【技术特征摘要】
1.一种耐药菌生物被膜抑制剂，其特征在于：由以下成分构成：小檗碱、米诺环素；所述抑制剂用于抑制的生物被膜为犊牛源大肠杆菌生物被膜。
2.根据权利要求1所述的一种耐药菌生物被膜抑制剂，其特征在于：所述小檗碱与米诺环素联合使用。
3.根据权利要求1所述的一种耐药菌生物被膜抑制剂，其特征在于：所述小檗碱可单独使用。
4.一种耐药菌生物被膜抑制剂的应用，其特征在于：所述抑制剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵红霞，宋晨，毛伟，孙月，顾珂瑞，麻海澜，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：
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