【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学工程领域，特别涉及一种抗ki-67蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、ki-67是一种核蛋白质由mki-67基因编码，又称之为mki-67。mki67的蛋白大小为350-400kda，属于染色体有丝分裂相关蛋白的成员。与核糖体rna转录有关，ki-67的失活会抑制核糖体rna的合成。mki67可以作为一个细胞增殖的标记物。ki-67在细胞增殖的各期(g1，s，g2和m)中均有表达，但在细胞静止期g0期不表达。新近发现ki-67基因在多种肿瘤发生发展过程中起着重要作用，在病理报告中ki-67指数高低与许多肿瘤分化程度、浸润、转移及预后密切相关。
2、ki-67蛋白是所有人类增生细胞核中普遍存在的标志性抗原，国内外已有研究表明ki-67基因在正常的组织中不表达，而在癌变组织中表达强烈，恶变初期就有微弱表达，表达水平与病变程度成正相关。ki-67在肿瘤的转移中也起到促进作用。它可以降低同质性细胞间的粘附力，促进肿瘤血管生成，重塑细胞外基质。在临床上，ki-67往往与结肠癌、胃癌、膀胱癌、肾癌等多种癌症密切相关，同时ki-67可以作为相关癌症预后治疗的指标之一。
技术实现思路
1、专利技术人提供了一种抗ki-67蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seq id no.2所示的氨基酸序列。
2、seq id no.1：
3、
4、isktsttvdlkitsptmedtatyfcsdlkiwgpgtlvtvslgqpkapsvfplapccgdtpsstvtlgclvkgylpepvtvtwnsgt
5、ltngvrtfpsvrqssglyslssvvsvtsssqpvtcnvahpatntkvdktvapstcskpmcpppelpggpsvfifppkpkdtlmisr
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7、qplepkvytmgppreelssrsvsltcmingfypsdisvewekngkaednykttptvldsdgsyflysklsvptsewqrgdvftcsv
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9、seq id no.2：
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12、evdgttqttgiensktpqnsadctynlsstltltstqynshkeytckvtqgttsvvqsfnrgdc
13、进一步的，所述单克隆抗体的重链可变区的编码dna序列为seq id no.3所示的核苷酸序列，所述单克隆抗体的轻链可变区的编码dna序列为seq id no.4所示的核苷酸序列。
14、seq id no.3：
15、atggagactgggctgcgctggcttctcctggtcgctgtgctcaaaggtgtccagtgtcagtcgctggaggagtccgggggtcgcct
16、ggtcacgcctgggacaccgctgacactcacctgcacagtctctggaatcgacctcagtaccaattcattgacctgggtccgccagg
17、ctccagggaaggggctggaatacatcggaatcattgatagatatggcagcacatactacgcgacctgggcaaaaggccgattcacc
18、atctccaaaacctcgaccacggtggatctgaaaatcaccagtccgacaatggaggacacggccacttatttctgtagtgatttgaa
19、gatttggggcccaggcaccctggtcaccgtctccttagggcaacctaaggctccatcagtcttcccactggccccctgctgcgggg
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21、ctcaccaatggggtacgcaccttcccgtccgtccggcagtcctcaggcctctactcgctgagcagcgtggtgagcgtgacctcaag
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23、ccatgtgcccaccccctgaactcccggggggaccgtctgtcttcatcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcacgc
24、acccccgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccaggatgaccccgaggtgcagttcacatggtacataaacaacgagcaggt
25、gcgcaccgcccggccgccgctacgggagcagcagttcaacagcacgatccgcgtggtcagcaccctccccatcgcgcaccaggact
26、ggctgaggggcaaggagttcaagtgcaaagtccacaacaaggcactcccggcccccatcgagaaaaccatctccaaagccagaggg
27、cagcccctggagccgaaggtctacaccatgggccctccccgggaggagctgagcagcaggtcggtcagcctgacctgcatgatcaa
28、cggcttctacccttccgacatctcggtggagtgggagaagaacgggaaggcagaggacaactacaagaccacgccgaccgtgctgg
29、acagcgacggctcctacttcctctacagcaagctctcagtgcccacgagtgagtgg本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗Ki-67蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQID NO.2所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的编码DNA序列为SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列，所述单克隆抗体的轻链可变区的编码DNA序列为SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别Ki-67蛋白。
4.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为兔单克隆抗体，克隆号为10G1。
5.一种抗Ki-67蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，选取Ki-67蛋白中SEQ IDNO.5所示的氨基酸序列,在其羧基端添加了一个半胱氨酸后，与载体蛋白KLH进行偶联作为免疫原。
6.一种Ki-67蛋白免疫检测试剂，其特征在于，所述免疫检测试剂含有权利要求1所述抗Ki-67蛋白单克隆抗体为其有效成分。
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【技术特征摘要】
1.一种抗ki-67蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seqid no.2所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的编码dna序列为seq id no.3所示的核苷酸序列，所述单克隆抗体的轻链可变区的编码dna序列为seq id no.4所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别ki-67蛋白。
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈惠玲，杨清海，陈泳，
申请(专利权)人：福州迈新生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：
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