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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物菌领域,具体涉及一株纤维素分解菌及其鉴定和应用。
技术介绍
1、纤维素是一种由连接的d-葡萄糖单元组成的复杂多糖。它是植物细胞壁的主要结构成分,并构成了膳食纤维的主要来源。与植物细胞壁中的其他复杂多糖一样,膳食纤维素不会被哺乳动物消化酶消化。纤维素分解细菌被认为是哺乳动物大肠和瘤胃中的关键物种,因为它们能够启动植物细胞壁的降解并释放其余微生物群落所依赖的能源。而对于羊等食草动物,其体内的纤维素分解菌的存在的多少对于其生长及能量获取起到关键作用。
技术实现思路
1、基于以上背景,本专利技术提供一株纤维素分解菌及其鉴定和应用,以为羊等食草动物的健康喂养提供新的思路。
2、本专利技术的技术方案为:
3、一株纤维素分解菌及其鉴定,其包括以下步骤:
4、s1:取羊粪便,放置过夜;
5、s2:采用75%酒精浸泡羊的粪便30min消毒后,将消毒后的羊的粪便浸泡在蒸馏水中10min进行制液;
6、s3:取20-30μl菌液,加入蒸馏水进行梯度稀释,得到10倍浓度梯度的不同菌液;
7、s4:将上菌液分别取0.1ml在分离培养基上进行涂布培养,每种浓度涂布3个平行板作为平行;每24小时,观察平板上的菌落的生长情况,直至有明显透明圈的形成,即完成初步筛选;
8、s5:对上筛选的的生物菌进行鉴定。
9、进一步地,步骤s4中的培养的温度控制在28℃,有氧环境培养。
10、进一步地,步
11、上述培养基要以纤维素为唯一的碳源,并加入刚果红指示剂。由于刚果红可与纤维素形成红色复合物,分解纤维素的细菌因分解纤维素后,在其周围不能形成红色复合物而呈现透明圈,只有分解纤维素的细菌才能形成透明圈。
12、进一步地,步骤s5筛选出纤维素分解菌株,其16srdnapce扩增并测定核苷酸序列如seq id.no 1。
13、进一步地,步骤s5中通过软件mega7.0进行进化树分析,mfold网络平台进行16srrna二级结构分析。
14、进一步地,所述纤维素分解菌为枯草芽孢杆菌的亚种。16srrna二级结构较16srdna序列更为保守。
15、基于同一专利技术构思,本专利技术将以上筛选鉴定的纤维素分解菌应用于制备改善动物消化的益生菌。
16、优选地,所述动物选自羊。
17、相比现有技术,本专利技术的有益效果为:
18、本专利技术从羊的粪便中筛选的纤维素分解菌经鉴定为枯草芽孢杆菌的亚种,对纤维素具有高分解活性的纤维素分解菌,将其应用于对羊等食草动物的青饲料发酵,及提高其体内的纤维素分解菌的量,以提升对植物纤维素的分解能力,提高羊等动物对纤维素的消化吸收能力,利于其生长。
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1.一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,其包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,步骤S4中的培养的温度控制在28℃,有氧环境培养。
3.根据权利要求1所述的一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,步骤S4所用的分离培养基为刚果红鉴别培养基,其具体的配方为:CMC-Na 5~10g、酵母膏1g、KH2PO4 0.25g、琼脂15g、土豆汁100mL。
4.根据权利要求1所述的一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,步骤S5筛选出纤维素分解菌株,其16SrDNA的核苷酸序列如SEQ ID.NO 1所示。
5.根据权利要求4所述的一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,所述纤维素分解菌为枯草芽孢杆菌的亚种。
6.权利要求1至5任一项所述的纤维素分解菌在制备改善动物消化的益生菌的作用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述动物选自羊。
【技术特征摘要】
1.一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,其包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,步骤s4中的培养的温度控制在28℃,有氧环境培养。
3.根据权利要求1所述的一株纤维素分解菌及其鉴定,其特征在于,步骤s4所用的分离培养基为刚果红鉴别培养基,其具体的配方为:cmc-na 5~10g、酵母膏1g、kh2po4 0.25g、琼脂15g、土豆汁100ml。
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