【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物分析检测，具体涉及一种高效分离并测定依拉替片中有关物质的方法。
技术介绍
1、依拉替片是由依非韦伦、拉米夫定与富马酸替诺福韦二吡呋酯三种药物组成的三联方片(化合物结构式如下)，为鸡尾酒疗法制剂，用于治疗h iv。由于依拉替片中三个主成分、各已知杂质及未知杂质检测成分较多，分离难度较大，需要研究开发灵敏度高、简便、快捷的方法检测依拉替片中有关物质含量，以保障药品的安全有效性。
2、
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种高效分离并测定依拉替片中有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相由a相和b相组成，a相中的醋酸铵溶液：甲醇的体积比为80-98:20-2，b相中的醋酸铵溶液：(甲醇-乙腈)的体积比为10-30:90-70，其中甲醇和乙腈的体积比为1-5:1。
2、本专利技术优选的技术方案中，所述依拉替片的有效成分为拉米夫定、替诺福韦二吡呋酯和依非韦伦。
3、本专利技术优选的技术方案中，所述有关物质选自拉米夫定杂质ⅰ、腺嘌呤、替诺福韦杂质、拉米夫定杂质ⅱ、替诺福韦单吡呋酯、替诺福韦单poc二聚体、替诺福韦混合二聚体、依非韦伦杂质a、替诺福韦二吡呋酯二聚体、依非韦伦杂质c中的任一种或其组合。
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6、本专利技术优选的技术方案中，流动相a中醋酸铵溶液的浓度为30-150mm，优选为40-80mm。
7、本专利技术优选的技术方案中，流动相a中醋酸铵溶液与甲
8、本专利技术优选的技术方案中，流动相b中醋酸铵溶液的浓度为10-100mm，优选为10-50mm。
9、本专利技术优选的技术方案中，流动相b中甲醇与乙腈的体积比为1-4:1，优选为1-2:1。
10、本专利技术优选的技术方案中，流动相b中醋酸铵溶液与甲醇-乙腈的体积比为20-25:80-75。
11、本专利技术优选的技术方案中，流动相a与流动相b中醋酸铵溶液的ph值3.0-5.0，优选为3.6-3.8。
12、本专利技术优选的技术方案，所述ph调节剂选自冰醋酸、甲酸、三氟乙酸、磷酸、磷酸盐的任一种或其组合。
13、本专利技术优选的技术方案中，所述流动相a的配置方法为：(1)称取醋酸铵，加入纯化水使溶解，混匀，用醋酸调节ph，得醋酸铵溶液；(2)在步骤(1)制得的醋酸铵溶液中加入甲醇，混匀，滤过，超声10-30min，即得。
14、本专利技术优选的技术方案中，所述流动相b的配置方法为：(1)量取甲醇，加乙腈，混匀，作为有机相；(2)称取醋酸铵，加入纯化水使溶解，混匀，用醋酸调节ph，得醋酸铵溶液；(3)将步骤(1)制得的有机相与步骤(2)制得的醋酸铵溶液混匀，滤过，超声10-30min，即得，其中，所述步骤(1)与(2)没有先后顺序之分。
15、本专利技术优选的技术方案中，流动相梯度洗脱条件为：
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18、本专利技术优选的技术方案中，流动相的梯度洗脱条件为：
19、 时间(分钟) 流动相a(％) 流动相b(％) 0 100 0 15 100 0 50 40 60 60 20 80 75 0 100
20、本专利技术优选的技术方案，所述色谱柱的直径为3-5mm，色谱柱的长度150-300mm，色谱柱中的填料粒径为2-5μm。
21、本专利技术优选的技术方案，所述色谱柱选自phenomenex c18。
22、本专利技术优选的技术方案中，检测器选自二极管阵列检测器或紫外检测器的任一种。
23、本专利技术优选的技术方案中，柱温为25-40℃，优选为30℃-35℃。
24、本专利技术优选的技术方案中，流动相的流速为0.8-1.2m l/min，优选为0.9-1.0m l/min。
25、本专利技术优选的技术方案中，检测波长为255-265nm，优选为260-262nm。
26、本专利技术优选的技术方案，控制待检测样品温度为4-12℃，优选为5-10℃。
27、本专利技术优选的技术方案，待检测样品的进样量为3-15μl，优选为5-10μl。
28、本专利技术优选的技术方案，采用稀释溶剂溶解拉米夫定杂质ⅰ、腺嘌呤、替诺福韦杂质、拉米夫定杂质ⅱ、拉米夫定、替诺福韦单吡呋酯、替诺福韦单poc二聚体、替诺福韦二吡呋酯、替诺福韦混合二聚体、依非韦伦杂质a、依非韦伦、替诺福韦二吡呋酯二聚体、依非韦伦杂质c的对照品，作为系统适用性溶液。
29、本专利技术优选的技术方案，稀释溶剂用于配置、溶解、稀释供试品溶液、对照溶液、对照品溶液的任一种。
30、本专利技术优选的技术方案，所述稀释溶剂选自水、甲醇、乙腈、乙腈水溶液、流动相的任一种或其组合。
31、本专利技术优选的技术方案，稀释溶剂中的甲醇与水的体积比为55-75:45-25。
32、本专利技术优选的技术方案，供试品溶液浓度：以依非韦伦计1-4mg/m l，优选为2-3mg/m l。
33、本专利技术优选的技术方案，所述色谱柱选自十八烷基硅烷键合硅胶反相柱，a相由浓度为60mm醋酸铵溶液：甲醇按照体积比为95:5混合而成，并用冰醋酸调节醋酸铵溶液的ph值至3.8，b相由浓度为25mm醋酸铵溶液-(甲醇-乙腈)按照体积比为20:80混合而成，其中甲醇和乙腈的体积比为2:1，并用冰醋酸调节醋酸铵溶液的ph值至3.8，柱温为30℃，流速为1.0m l/min，进样量为5μl；检测波长：260nm；流动相的梯度洗脱条件为：
34、 时间(分钟) 流动相a(％) 流动相b(％) 本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种高效分离并测定依拉替片中有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相由A相和B相组成，A相中的醋酸铵溶液：甲醇的体积比为80-98:20-2，B相中的醋酸铵溶液：(甲醇-乙腈)的体积比为10-30:90-70，其中甲醇和乙腈的体积比为1-5:1。
2.如权利要求1所述的方法，所述依拉替片的有效成分为拉米夫定、替诺福韦二吡呋酯和依非韦伦。
3.如权利要求1-2任一项所述的方法，所述有关物质选自拉米夫定杂质Ⅰ、腺嘌呤、替诺福韦杂质、拉米夫定杂质Ⅱ、替诺福韦单吡呋酯、替诺福韦单POC二聚体、替诺福韦混合二聚体、依非韦伦杂质A、替诺福韦二吡呋酯二聚体、依非韦伦杂质C中的任一种或其组合。
4.如权利要求1-3任一项所述的方法，流动相A中醋酸铵溶液的浓度为30-150mM，优选为40-80mM。
5.如权利要求1-4任一项所述的方法，所述流动相A的配置方法为：(1)称取醋酸铵，加入纯化水使溶解，混匀，用醋酸调节pH，得醋酸铵溶液；(2)在步骤(1)制得的醋酸铵溶液中加入甲醇，混匀，滤过，超声10-30min，即得。>
6.如权利要求1-5任一项所述的方法，所述流动相B的配置方法为：(1)量取甲醇，加乙腈，混匀，作为有机相；(2)称取醋酸铵，加入纯化水使溶解，混匀，用醋酸调节pH，得醋酸铵溶液；(3)将步骤(1)制得的有机相与步骤(2)制得的醋酸铵溶液混匀，滤过，超声10-30min，即得，其中，所述步骤(1)与(2)没有先后顺序之分。
7.如权利要求1-6任一项所述的方法，流动相梯度洗脱条件为：
8.如权利要求1-7任一项所述的方法，所述色谱柱的直径为3-5mm，色谱柱的长度150-300mm，色谱柱中的填料粒径为2-5μm。
9.如权利要求1-8任一项所述的方法，采用稀释溶剂溶解拉米夫定杂质Ⅰ、腺嘌呤、替诺福韦杂质、拉米夫定杂质Ⅱ、拉米夫定、替诺福韦单吡呋酯、替诺福韦单POC二聚体、替诺福韦二吡呋酯、替诺福韦混合二聚体、依非韦伦杂质A、依非韦伦、替诺福韦二吡呋酯二聚体、依非韦伦杂质C的对照品，作为系统适用性溶液。
10.如权利要求1-9任一项所述的方法，所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱，A相由浓度为60mM醋酸铵溶液：甲醇按照体积比为95:5混合而成，并用冰醋酸调节醋酸铵溶液的pH值至3.8，B相由浓度为25mM醋酸铵溶液-(甲醇-乙腈)按照体积比为20:80混合而成，其中甲醇和乙腈的体积比为2:1，并用冰醋酸调节醋酸铵溶液的pH值至3.8，柱温为30℃，流速为1.0ml/min，进样量为5μl；检测波长：260nm；流动相的梯度洗脱条件为：
...【技术特征摘要】
1.一种高效分离并测定依拉替片中有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相由a相和b相组成，a相中的醋酸铵溶液：甲醇的体积比为80-98:20-2，b相中的醋酸铵溶液：(甲醇-乙腈)的体积比为10-30:90-70，其中甲醇和乙腈的体积比为1-5:1。
2.如权利要求1所述的方法，所述依拉替片的有效成分为拉米夫定、替诺福韦二吡呋酯和依非韦伦。
3.如权利要求1-2任一项所述的方法，所述有关物质选自拉米夫定杂质ⅰ、腺嘌呤、替诺福韦杂质、拉米夫定杂质ⅱ、替诺福韦单吡呋酯、替诺福韦单poc二聚体、替诺福韦混合二聚体、依非韦伦杂质a、替诺福韦二吡呋酯二聚体、依非韦伦杂质c中的任一种或其组合。
4.如权利要求1-3任一项所述的方法，流动相a中醋酸铵溶液的浓度为30-150mm，优选为40-80mm。
5.如权利要求1-4任一项所述的方法，所述流动相a的配置方法为：(1)称取醋酸铵，加入纯化水使溶解，混匀，用醋酸调节ph，得醋酸铵溶液；(2)在步骤(1)制得的醋酸铵溶液中加入甲醇，混匀，滤过，超声10-30min，即得。
6.如权利要求1-5任一项所述的方法，所述流动相b的配置方法为：(1)量取甲醇，加乙腈，混匀，作为有机相；(2)称取醋酸铵，加入纯化水使溶解，混匀，用...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘光敏，王哲，朱礼根，张伟，姜宛君，江中赞，杜坤，姚磊，
申请(专利权)人：安徽贝克生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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