【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物浸出，尤其涉及一种分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法。
技术介绍
1、生物浸出工艺，也叫微生物浸矿，是利用微生物实现矿石浸出的一种技术，主要是借助微生物在生命活动中的氧化和还原特性实现矿石中有价元素的溶解和分离。针对传统工艺难以经济浸出的矿石，利用生物浸出工艺可在较低成本和低试剂消耗的条件下实现资源的回收利用。由于微生物浸矿过程是包括微生物生长以及圣物化学反应、电化学、动力学现象的复杂过程，与传统工艺大量使用浓硫酸、过氧化氢等相比，微生物浸矿工艺具有经济环保、投资少、能耗低、试剂消耗少等特点，对低品位难处理的矿产资源的有效开发利用有着十分广阔的应用前景。
2、嗜酸硫杆菌属(acidithiobacillus)是浸出过程的主力微生物之一。浸矿微生物大多是化能无机自养型菌株，营养需求简单，以亚铁和(或)硫为能源底物，并以此驱动其他元素的生物化学循环。浸矿微生物通过氧化浸出体系中的fe2+或无机硫化物，并以此进行能量代谢，促进矿石中目的元素的浸出反应。
3、在常规培养和浸出过程中容易产生黄钾铁矾沉淀，该类沉淀结构致密，会包裹菌种细胞，进而阻碍菌种对矿石的持续附着作用，降低浸出效率。菌种定量分析可为探明生物浸出过程中菌种的变化趋势提供直接技术保障，浸出过程中若发现菌种含量降低，可及时补充菌种，以增强生物浸出性能，因此分离菌体与黄钾铁矾沉淀进而提取菌种dna尤为重要。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是：提供一种分离嗜酸硫杆菌菌体与黄
2、本专利技术提供了分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，包括以下步骤：
3、步骤一：选取嗜酸硫杆菌在含铁培养基中培养至对数期；
4、步骤二：初步离心，得到含杂质黄色沉淀；
5、步骤三：用洗脱液悬浮沉淀后，进行1～2次100×g～200×g的低速离心；取上清液进行1～2次10000×g～12000×g的高速离心，弃上清；
6、步骤四：重复步骤三1～3次，清洗，获得纯净的菌体。
7、优选地，所述嗜酸硫杆菌的保藏编号为dsmz 100412或者cicc 25106。
8、优选地，所述含铁培养基包括按照质量份数混合的a液、b液、c液；
9、a液、b液、c液的质量份数比为：(40～60)：(20～30)：(20～30)；
10、a液的制备方法为：mgso4·7h2o、(nh4)2hpo4、kcl、ca(no3)2按照质量份数分别为5～15、60～80、5～15、0.1～1的比例混合，添加蒸馏水、h2so4得到培养基a质量浓度为0.2％～0.8％的溶液，灭菌，冷却后得到a液；
11、b液的制备方法为：取适量feso4·7h2o溶解于蒸馏水中，得到质量浓度为5％～15％的溶液，过滤除菌后得到b液；
12、c液的制备方法为：酵母粉用蒸馏水溶解，配置质量浓度为8g/l～15g/l的溶液，灭菌，冷却后得到c液。
13、优选地，所述步骤三和步骤四中，利用相同浓度的洗脱液进行菌体悬浮。
14、优选地，所述洗脱液为灭菌的氯化钠溶液。
15、优选地，所述洗脱液为15～20wt％的氯化钠溶液。
16、优选地，所述初步离心的转速为5000×g～8000×g。
17、优选地，所述低速离心的时间为2～5分钟，所述高速离心的时间为2～5分钟。
18、优选地，所述步骤三：用洗脱液悬浮沉淀后，进行1次100×g～200×g的低速离心；取上清液进行2次10000×g～12000×g的高速离心，弃上清；
19、步骤四：低速离心1次，取上清液进行2次高速离心，弃上清，使用ddh2o清洗两次离心得到菌体，获得纯净的菌体。
20、与现有技术相比，本专利技术的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，针对生物浸出过程中黄钾铁矾的产生会阻碍菌种细胞对矿石的作用等问题，结合菌种的生长条件和与黄钾铁矾产生的条件以及菌体与黄钾铁矾的密度差，通过低速离心配合高速离心，有效去除了沉淀，并且保证了菌体的完整，实现了嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀有效分离，而且分离效率高。进而对培育的嗜酸硫杆菌进行实时荧光定量pcr研究，为探明生物浸出过程中微生物群落的变化趋势提供直接技术保障，从而为浸矿过程中对优势浸矿菌株条件优化，提高其竞争力，增强生物浸出性能与效果提供支撑。
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1.一种分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述嗜酸硫杆菌的保藏编号为DSMZ 100412或者CICC 25106。
3.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述含铁培养基包括按照质量份数混合的A液、B液、C液；
4.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述步骤三和步骤四中，利用相同浓度的洗脱液进行菌体悬浮。
5.根据权利要求4所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述洗脱液为灭菌的氯化钠溶液。
6.根据权利要求5所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述洗脱液为15～20wt％的氯化钠溶液。
7.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述初步离心的转速为5000×g～8000×g。
8.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法
9.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述步骤三：用洗脱液悬浮沉淀后，进行1次100×g～200×g的低速离心；取上清液进行2次10000×g～12000×g的高速离心，弃上清；
...【技术特征摘要】
1.一种分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述嗜酸硫杆菌的保藏编号为dsmz 100412或者cicc 25106。
3.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述含铁培养基包括按照质量份数混合的a液、b液、c液；
4.根据权利要求1所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述步骤三和步骤四中，利用相同浓度的洗脱液进行菌体悬浮。
5.根据权利要求4所述的分离嗜酸硫杆菌菌体与黄钾铁矾沉淀的方法，其特征在于，所述洗脱液为灭菌的氯化钠溶液。
【专利技术属性】
技术研发人员：赵霞，李梁，卢阳，黄蔷薇，刘辉，孟运生，
申请(专利权)人：核工业北京化工冶金研究院，
类型：发明
国别省市：
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