【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于胆红素提取，具体涉及一种牛源胆红素的提取方法。
技术介绍
1、胆红素是一种资源依赖型产品，主要原料是动物胆汁。动物胆汁是一种历史悠久的传统中药，其性味苦寒，无毒，具有清热解毒、止咳、平喘、利胆明目等功效。其药用价值早在《本草纲目》、《中国大药典》等中草药经典文献中均有记载。其中蛇胆、猪胆、牛胆、鸡胆等更具有活性强，疗效显著，副作用小等特性而广泛用于临床实践中。
2、为了提高生物制药产业化的技术水平和提高畜产品加工副产物的附加值，针对目前胆红素的提取和纯化中存在的问题，以中药制取的传统经验与现代科学技术相结合的方法，筛选出一条高效低成本、高纯度的提取方法。
3、专利cn 106631966 b提供一种从牛胆汁中提取胆红素的方法，该方法包括以下步骤：（1）牛胆汁预处理（2）母液预处理（3）二次酸化（4）萃取；通过该方法可以有效提高牛胆汁中胆红素的收率，提高品质，有效地满足目前市场对胆红素的需求，但是通过该方法获得的牛源胆红素的纯度以及提取率仍有提高的空间。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种牛源胆红素的提取方法，用于解决现有技术中牛源胆红素的纯度以及提取率不佳的技术问题。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、本专利技术提供一种牛源胆红素的提取方法，包括以下步骤：
4、步骤（1）：将从屠宰场收集的牛胆用去离子水清洗干净，用不锈钢剪刀将牛胆剪开，将胆汁倒入容器中，用纱布过滤后置于超声
5、步骤（2）：将氢氧化钠加入至牛胆汁粗提取液中，调节ph，搅拌，然后加入盐酸调节ph，将处理后的牛胆汁粗提取液与复合吸附树脂进行混合，静态吸附，冲洗，洗脱，旋蒸，得到胆红素粗品，所述步骤（2）中，利用氢氧化钠调节ph=11，搅拌时间为15-25min，加入盐酸调节ph=4.8，静态吸附时间为2-3天，用去离子水、甲醇和乙醇分别对复合吸附树脂进行冲洗；
6、步骤（3）：用二氯甲烷对胆红素粗品进行充分溶解，利用改性超滤膜对其进行减压过滤，旋蒸，浓缩，结晶，得到牛源胆红素。
7、作为优选，所述步骤（2）中，复合吸附树脂的制备方法，包括以下步骤：
8、q1：将杨梅素加入至置于冰水浴中的容器中，再加入氯化亚砜，磁力搅拌后，加热回流，随后，减压蒸馏，得到氯代杨梅素，所述q1中，杨梅素和氯化亚砜的用量比为（3-5）g：（18-22）ml，加入氯化亚砜后，在容器中装上带有氯化钙干燥管的回流冷凝管，磁力搅拌时间为30-40min，加热回流温度为60-70℃，时间为1-2h；
9、q2：将氯代杨梅素溶于去离子水中，加入碳酸钾，常温搅拌溶解后，缓慢滴加聚丙烯亚胺三胺树枝状聚合物，加热反应，过滤，滤渣用盐酸溶液进行浸泡，随后用去离子水洗涤至中性，干燥，得到复合吸附树脂，所述q2中，氯代杨梅素、去离子水、碳酸钾和聚丙烯亚胺三胺树枝状聚合物的用量比为（2-3）g：（6-9）ml：（0.3-0.4）g：（3-4）g，常温搅拌时间为15-20min，加热温度为60-70℃，加热时间为4-6h，盐酸溶液的浓度为0.1mol/l，浸泡时间为3-5h，干燥温度为70-90℃，干燥时间为8-10h。
10、以上过程中，将杨梅素结构中碳环的醇羟基用氯取代制备氯代杨梅素，然后用聚丙烯亚胺三胺树枝状聚合物与氯代杨梅素交联制备复合吸附树脂，其中，复合吸附树脂的合成过程如下所示：
11、
12、作为优选，所述改性超滤膜的制备方法，包括以下步骤：
13、s1：将多壁碳纳米管浸泡在稀盐酸溶液中，超声处理后，抽滤，洗涤，干燥，得到纯化多壁碳纳米管，将纯化多壁碳纳米管置于硫酸和硝酸的混合溶液中，随后加入碳酸钠，使混合溶液呈中性，浸泡，洗涤，干燥，得到氧化多壁碳纳米管，所述s1中，多壁碳纳米管和稀盐酸溶液的用量比为（8-12）g：1000ml，稀盐酸溶液的浓度为0.5mol/l，超声处理时间为30-50min，纯化多壁碳纳米管、硫酸和硝酸的用量比为（5-7）g：（100-120）ml：（300-400）ml；
14、s2：将1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和n-羟基琥珀酰亚胺加入至去离子水中，搅拌溶解后加入氧化多壁碳纳米管，超声震荡，然后加入磺胺脒，搅拌溶解，反应，过滤，洗涤，得到复合产物1，所述s2中，1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n-羟基琥珀酰亚胺、去离子水、氧化多壁碳纳米管和磺胺脒的用量比为（10-12）g：（2.5-3）g：500ml：（10-12）g：（20-22.8）g，超声震荡时间为30-40min，反应时间为8-10h；
15、s3：将复合产物1继续加入至溶有1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和n-羟基琥珀酰亚胺的去离子水中，超声处理，再加入乙二酸，搅拌溶解后，反应，过滤，洗涤，得到复合产物2，所述s3中，复合产物1、1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n-羟基琥珀酰亚胺、去离子水和乙二酸的用量比为（9-10）g：（10-12）g：（2.5-3）g：500ml：（9-10）ml，超声处理时间为30-40min，反应时间为8-10h；
16、s4：将复合产物2加入至溶有1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和n-羟基琥珀酰亚胺的去离子水中，超声处理后，加入磺胺脒，搅拌溶解，反应，过滤，洗涤，得到复合产物3，所述s4中，复合产物2、1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n-羟基琥珀酰亚胺、去离子水和磺胺脒的用量比为（8-10）g：（10-12）g：（2.5-3）g：500ml：（42-43.8）g，超声处理时间为20-30min，反应时间为8-9h；
17、s5：将复合产物3加入至盛有n-甲基吡咯烷酮的容器中，超声处理，随后加入聚偏二氟乙烯和聚乙烯吡咯烷酮至容器中，搅拌得到铸膜液，静置后，利用台式涂布机进行刮膜，成型脱落后，浸泡，干燥，得到改性超滤膜，所述s5中，复合产物3、n-甲基吡咯烷酮、聚偏二氟乙烯和聚乙烯吡咯烷酮的用量比为（0.3-0.6）g：（81.4-81.7）ml：15g：3g，超声处理时间为20-30min，搅拌时间为12-14h，静置时间为10-12h，浸泡时间为10-12h。
18、以上过程中，首先使用稀盐酸溶液清洗多壁碳纳米管，随后利用混酸处理，使其表面富含羧基，氧化多壁碳纳米管含有的羧基与磺胺脒中的氨基反应，将磺胺脒接枝到多壁碳纳米管表面，再通过乙二酸的加入，使更多的磺胺脒接枝至多壁碳纳米管表面，从而得到复合产物3，利用复合产物3、聚偏二氟乙烯和聚乙烯吡咯烷酮反应，得到改性超滤膜。
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1.一种牛源胆红素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种牛源胆红素的提取方法，其特征在于，所述步骤（2）中，复合吸附树脂的制备方法，包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的一种牛源胆红素的提取方法，其特征在于，所述改性超滤膜的制备方法，包括以下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种牛源胆红素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种牛源胆红素的提取方法，其特征在于，所述步骤（2）中，复...
【专利技术属性】
技术研发人员：殷金龙，王绪敏，李雪，曲江勇，宋岩，
申请(专利权)人：吉林浩泰健康产业发展股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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