【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于多糖领域，具体涉及一种从千日红(gomphrena globosa l.)中提取得到的多糖，以及该多糖的制备方法和用途。
技术介绍
1、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis)是以肝脏脂肪堆积、肝脏损伤、炎症以及肝纤维化为特征的一类肝脏异常的疾病，进展性非酒精性脂肪性肝炎最终容易演变为肝纤维化，甚至发展为不可逆转的肝硬化以及最终变为肝癌。目前，全球仍没有获批的治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物，因此，围绕非酒精性脂肪性肝炎的活性化合物开发以及药物研发十分重要。
2、千日红(gomphrena globosa l.)是苋科植物千日红的干燥花序，民间常作花茶饮用，有止咳定喘、平肝明目的功效，主治支气管哮喘、急性和慢性支气管炎、百日咳、肺结核咯血等病症。据报道千日红中含黄酮、花青素、挥发油、多酚、多糖等化学成分。
技术实现思路
1、本专利技术用一种简单有效的提取和纯化植物多糖的工艺和方法，以千日红为原料获得了一种混合多糖组分，并进一步纯化获得了均一的多糖ggl0.05s1。药理实验表明多糖ggl0.05s1可以减少原代肝实质细胞的脂质堆积，并可以与硫氧还蛋白(txn)结合，产生抑制氧化应激的效果。
2、基于此，本专利技术的目的是提供一种千日红多糖ggl0.05s1、其制备方法及其在制备用于预防和/或治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的用途。
3、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
4、第
5、具体地，所述千日红多糖ggl0.05s1主要由1，4-α-葡聚糖组成，其具有如下所示的结构：
6、
7、其中，a＜29，b＞2，且a+3b≈60；
8、聚合度n为3～20。
9、进一步地，所述千日红多糖ggl0.05s1的分子量范围为3-300kda，优选为50-110kda。
10、更进一步地，聚合度n为8，所述千日红多糖ggl0.05s1的分子量为83.9kda。
11、第二个方面，本专利技术提供第一个方面所述的千日红多糖ggl0.05s1的制备方法，其包括如下步骤：
12、(1)多糖提取：将千日红用沸水提取，得到提取液；浓缩所述提取液，所得浓缩液加入乙醇水溶液进行醇沉后，静置，分离出沉淀物，干燥得千日红粗多糖ggl；
13、(2)多糖纯化：千日红粗多糖ggl经阴离子交换柱分离，收集0.05m nacl水溶液的洗脱组份，得到千日红多糖组分ggl0.05，再经过凝胶柱进一步纯化，得到所述千日红多糖ggl0.05s1。
14、优选地，步骤(1)中，在进行沸水提取前，先用乙醇水溶液(例如体积分数为95％的乙醇水溶液)对千日红浸泡3～10天(比如7天)，然后干燥(例如，风干)。
15、优选地，步骤(1)中，千日红沸水提取中，千日红与水的用量比为3∶30～50，kg/l，优选为3∶40，kg/l；沸水提取次数为3～10次，优选为8次，每次3～5小时，优选为4小时。
16、优选地，步骤(1)中，浓缩所述提取液至未浓缩前体积的1/400～1/250，优选为1/320。
17、优选地，步骤(1)中，所述乙醇水溶液为体积分数为80～98％，优选为体积分数为95％的乙醇水溶液；沉淀所用的乙醇水溶液体积为浓缩液的3～6倍，例如4倍。
18、优选地，步骤(1)中，在对浓缩液进行醇沉前，先对浓缩液进行离心，然后将离心上清液在水中进行透析，透析时间为24～72h；之后透析内液再加入所述乙醇水溶液进行醇沉。
19、优选地，步骤(1)中，所述静置时间为6～24h，例如12h。
20、优选地，步骤(1)得到的千日红粗多糖ggl在进行步骤(2)的多糖纯化前进行洗涤，可以采用乙醇和丙酮交替洗，各洗涤2～4次。
21、优选地，步骤(2)中，所述阴离子交换柱选自以下型号：deae sepharosetm fastflow、deae cellucose-52，优选deae sepharosetm fast flow。
22、优选地，步骤(2)所述阴离子交换柱分离时依次使用去离子水和0.05m的nacl水溶液进行洗脱，收集0.05m nacl洗脱液的洗脱组份。
23、优选地，步骤(2)中，所述凝胶柱选自以下型号：sephacryl s-200 hr、sephacryls-300 hr、sephadex g-100和sephadex g-150，优选sephacryl s-200hr。
24、优选地，步骤(2)中，利用所述凝胶柱进一步纯化时，使用0.2m nacl洗脱液进行洗脱，收集得到的洗脱组分经干燥(例如冷冻干燥)得到千日红多糖ggl0.05s1。
25、第三个方面，本专利技术提供一种药物组合物，其包含第一方面所述的千日红多糖ggl0.05s1或第二方面所述的制备方法制备得到的千日红多糖ggl0.05s1，以及药学上可接受的辅料。
26、第四个方面，本专利技术提供第一方面所述的千日红多糖ggl0.05s1、第二方面所述的制备方法制备得到的千日红多糖ggl0.05s1，或第三方面所述的药物组合物在制备具有以下一种或多种作用的药物、试剂、膳食或营养补充剂中的用途：
27、a.抑制肝实质细胞中脂质累积；
28、b.结合硫氧还蛋白(trx)；
29、c.抑制氧化应激。
30、本专利技术中所述试剂是用于指用于生命科学研究、临床诊断以及医学研究用的产品。
31、优选地，上述氧化应激为肝实质细胞的氧化应激，千日红多糖ggl0.05s1可降低肝实质细胞中ros(活性氧)水平。
32、优选地，上述用途中，肝实质细胞中脂质累积、氧化应激均可由游离脂肪酸诱导产生，或由疾病，例如非酒精性脂肪性肝炎诱导产生。
33、第五个方面，本专利技术提供第一方面所述的千日红多糖ggl0.05s1、第二方面所述的制备方法制备得到的千日红多糖ggl0.05s1，或第三方面所述的药物组合物在制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝炎的药物中的用途。
34、有益效果：
35、本专利技术从千日红中提取纯化得到v日红多糖ggl0.05s1可以显著降低ffa诱导的肝实质细胞脂质堆积。靶点研究发现ggl0.05s1可能通过与硫氧还蛋白(trx)结合，kd值为3.22×10-6，进而发挥抗氧化以及抗非酒精性脂肪性肝炎的作用。
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1.一种千日红多糖GGL0.05S1，其单糖组成包括91-96％的葡萄糖和4-9％的阿拉伯糖；所述千日红多糖GGL0.05S1主要由1，4-α-葡聚糖组成，其具有如下所示的结构：
2.根据权利要求1所述的千日红多糖GGL0.05S1，其特征在于，所述千日红多糖GGL0.05S1的单糖组成包括94.87％的葡萄糖和5.13％的阿拉伯糖。
3.根据权利要求1或2所述的千日红多糖GGL0.05S1，其特征在于，所述千日红多糖GGL0.05S1的分子量范围为3-300kDa，优选为50-110kDa。
4.根据权利要求1-3任一项所述的千日红多糖GGL0.05S1，其特征在于，聚合度n为8，所述千日红多糖GGL0.05S1的分子量为83.9kDa。
5.权利要求1-4任一项所述的千日红多糖GGL0.05S1的制备方法，其包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中：
8.一种药物组合物，其包含权利要求1-4任一项所
9.权利要求1-4任一项所述的千日红多糖GGL0.05S1、权利要求5-7任一项所述的制备方法制备得到的千日红多糖GGL0.05S1，或权利要求8所述的药物组合物在制备具有以下一种或多种作用的药物、试剂、膳食或营养补充剂中的用途：
10.权利要求1-4任一项所述的千日红多糖GGL0.05S1、权利要求5-7任一项所述的制备方法制备得到的千日红多糖GGL0.05S1，或权利要求8所述的药物组合物在制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝炎的药物中的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种千日红多糖ggl0.05s1，其单糖组成包括91-96％的葡萄糖和4-9％的阿拉伯糖；所述千日红多糖ggl0.05s1主要由1，4-α-葡聚糖组成，其具有如下所示的结构：
2.根据权利要求1所述的千日红多糖ggl0.05s1，其特征在于，所述千日红多糖ggl0.05s1的单糖组成包括94.87％的葡萄糖和5.13％的阿拉伯糖。
3.根据权利要求1或2所述的千日红多糖ggl0.05s1，其特征在于，所述千日红多糖ggl0.05s1的分子量范围为3-300kda，优选为50-110kda。
4.根据权利要求1-3任一项所述的千日红多糖ggl0.05s1，其特征在于，聚合度n为8，所述千日红多糖ggl0.05s1的分子量为83.9kda。
5.权利要求1-4任一项所述的千日红多糖ggl0.05s1的制备方法，其包括如下步骤：
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【专利技术属性】
技术研发人员：丁侃，宗佳宁，陈美琳，何菲，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：
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