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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及转基因及植物病害防治领域,具体涉及一种水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因oshda706在抗南方水稻黑条矮缩病毒抗性中的应用。
技术介绍
1、南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black streaked dwarf virus,srbsdv)是斐济病毒属(fijivirus)的一员,其病毒粒体为直径75-80nm的正二十面体球状结构,具有双层衣壳,无包膜,主要由白背飞虱(sogatella furcifera)传播,但是不经卵传播。srbsdv的基因组由10条双链rna组成,共编码13种蛋白,包括6种结构蛋白(p1、p2、p3、p4、p8、p10)和7种非结构蛋白(p5-1、p5-2、p6、p7-1、p7-2、p9-1、p9-2)。结构蛋白p1为病毒rna依赖的rna聚合酶;p2为病毒内核的组分;p3为加帽酶;p4为病毒外壳的b刺突蛋白;p8和p10分别为病毒的核心衣壳蛋白,外层衣壳蛋白;非结构蛋白p5-1是病毒原质的组分,呈丝状结构分布,参与病毒粒体的复制与装配;p6具有沉默抑制子功能;p7-1可以在非寄主细胞内独立装配形成小管结构,且能够参与病毒的扩散;p9-1是病毒原质的组分,与病毒的复制有关。
2、南方水稻黑条矮缩病于2001年发生在我国广东省阳西县的一种新的水稻病毒,且近几十年来常有大面积爆发,无特效药可以防治,对我国水稻生产危害极大,研究能够防治srbsdv的转基因材料具有极为重要的现实意义。
3、茉莉酸(jasmonate,ja)及其衍生物是一类含氧化合物脂基激素,
4、组蛋白去乙酰化酶(hdacs)是存在于真核生物中在进化上高度保守的一类蛋白,对染色体的结构修饰和基因表达调控发挥着重要作用。在一般情况下,组蛋白的乙酰化有利于dna与组蛋白八聚体的解离,导致核小体结构松弛,从而使各种转录因子和协同转录因子能与dna结合位点特异性结合,激活基因的转录。而组蛋白的去乙酰化则发挥相反的作用。核小体的基本单位是组蛋白八聚体(h2a、h2b、h3和h4)和dna分子,其中组蛋白h3结合位点有k9、k14、k18和k23,组蛋白h4结合位点有k5、k8、k12、k16和k20。组蛋白乙酰转移酶(hats)和组蛋白去乙酰化酶(hdacs)分别催化组蛋白的乙酰化和脱乙酰化,以调节基因表达。这一过程对于调节各种植物细胞过程至关重要,包括应激反应、激素信号传导以及生长发育。除组蛋白外,越来越多的研究表明非组蛋白的乙酰化和去乙酰化在真核生物的多种细胞进程中也发挥了重要作用。
5、水稻基因组中至少含有19个hdac家族蛋白。之前的研究发现oshda701通过调节组蛋白h4乙酰化水平和防御基因的表达来负调控水稻的先天免疫,然而,hdac家族蛋白是否可以增加水稻对srbsdv的抗性仍不清楚。
6、基于现有技术的上述缺陷,本专利技术通过构建组蛋白去乙酰化酶基因oshda706的过表达载体,利用农杆菌介导法导入水稻品种(日本晴)中,获得可稳定遗传的两个转基因水稻,分别命名为oshda706-oe#1和oshda706-oe#2,通过qrt-pcr技术检测过表达oshda706的转基因株系ja信号转导通路相关基因的表达,发现在水稻中过表达oshda706基因能够激活ja信号转导通路。
7、通过人工接种南方水稻黑条矮缩病毒(srbsdv),发现在水稻中过表达oshda706基因,能显著增强水稻对srbsdv侵染的抗性,表现为植株发病症状减轻,病毒含量减少等。本专利技术为针对南方水稻黑条矮缩病毒的抗性植物育种、选育水稻抗病毒新品种提供新的思路,为确保我国农业水稻作物不断增产提供技术保障。
技术实现思路
1、本专利技术涉及一种水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因oshda706及其编码蛋白。
2、一方面,所述oshda706基因,其核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、另一方面,所述oshda706基因,其编码蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
4、在一些实施方案,水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因oshda706的核酸序列(seq idno:1)如下:
5、atggcctcttccgcgccgtccgcggcggcgggggcgaccccgccggaccccctccgccgcgaccgcatcctctccagcaagctctacctcgacgtcccgggctccaaggctccggtggtgtactcgccggcgtacgacatcgccttcct cgggatcgagaagctgcacccgttcgattcctccaaatggggccgcatatgcaagttcctcaccaaggaagggcacctggagaagaaccgagtggtggagccattggaagcgaccaaggacgatttgctggtggtgcactcggagtcgtacttgaacagcctcaagagcagcctgaaggttgcgtccattgtagagcttcctcctgtggcattcattcctaattggcttgtgcagcaaaagctactgtaccctttcaggaaacaggtgggtgggtcgattctatcggccaagcttgcacttgagagaggatgggccattaatgttggcggagggtttcaccattgttcggcagagcaagggggcgggttttgtgcatatgctgatatttctctctgcattcagtttgcttttgtccgtctaaatatttcaagagtgatgatcatagatctggatgcccaccaaggaaatggccatgaaaaggatttcgctaatgatggaagagtttacactttggatatgtacaatgctggaatatatccctatgatcatgttgctaagcggtatattgatcaaaaagtcgagctagttagtgggacaaagacagaagactacttggatcaacttgacaaggctcttaaggttgcagaaagtagatttcagcctcagttgattgtttaca本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因OsHDA706在抗南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)的水稻育种中的应用,所述水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因OsHDA706的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述的应用,所述水稻为日本晴。
3.权利要求1所述的应用,所述水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因OsHDA706的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种抗南方水稻黑条矮缩病毒转基因植物的制备方法,其步骤包括:
5.权利要求4所述的制备方法,所述诱导培养基包含:N6培养基24.1g/L、2mg/L 2,4-D、PH=5.8。
6.权利要求4所述的制备方法,所述继代培养基包含:N6培养基24.1g/L、2mg/L 2,4-D、50mg/L潮霉素、300mg/mL头孢霉素、PH=5.8。
7.权利要求4所述的制备方法,所述生根培养基包含:1/2MS 39.45g/L、0.5mg/L NAA、50mg/L潮霉素、PH=5.8。
8.权利要求4所述的制备方法,所述共培养基包含:N6培养基
9.一种提高水稻对南方水稻黑条矮缩病毒抗性的方法,将水稻组蛋白去乙酰化酶OsHDA706基因转入水稻中,所述OsHDA706基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
...【技术特征摘要】
1.一种水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因oshda706在抗南方水稻黑条矮缩病毒(srbsdv)的水稻育种中的应用,所述水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因oshda706的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.权利要求1所述的应用,所述水稻为日本晴。
3.权利要求1所述的应用,所述水稻组蛋白去乙酰化酶编码基因oshda706的氨基酸序列如seq id no.2所示。
4.一种抗南方水稻黑条矮缩病毒转基因植物的制备方法,其步骤包括:
5.权利要求4所述的制备方法,所述诱导培养基包含:n6培养基24.1g/l、2mg/l 2,4-d、ph=5.8。
6.权利要求4所述的制...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙宗涛,杨子航,张合红,李雁军,魏中艳,陈剑平,
申请(专利权)人:宁波大学,
类型:发明
国别省市:
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