【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫分析检测，尤其涉及一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法。
技术介绍
1、目前常用的裂解毛发的方法，如酸水解或碱水解存在裂解效率低、溶液中杂质多影响检测的缺点，而有机溶剂裂解操作复杂、易造成环境污染。如公布号为cn112903852a的专利技术“毛发中10种毒品的检测方法”中毛发的前处理步骤为：将毛发用水和二氯甲烷洗涤，干燥后进行冷冻干磨，再加入提取液并进行冷冻湿磨，提取液为甲酸铵水溶液和乙腈的混合溶液，或者为乙酸铵水溶液和乙腈的混合溶液。该方法中使用了较多有机试剂，并且操作复杂还需冷冻球磨，对仪器有一定的要求且耗时较长。
技术实现思路
1、本专利技术为了克服现有技术下裂解毛发操作复杂，裂解耗时长的问题，提供了一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，该方法可快速、可靠地对毛发进行前处理，裂解效果好，便于后续对药物小分子的检测鉴定。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，包括如下步骤：
4、s1、使用清洗剂和纯水交替清洗毛发；
5、s2、将清洗后的毛发加入助解液中高温孵育，所得溶液即含药物小分子物质的毛发样本待测液。
6、本专利技术先使用清洗剂和纯水去除毛发外部污染物，确保待测液中药物小分子物质均来自毛发内部，避免因外部污染造成错误的检测结果；再通过助解液裂解毛发，裂解过程中毛发中角蛋白和黑色素的结构变化使其包裹的药物小分子物质释放，高温孵育提供的恒
7、作为优选，所述s1中，清洗剂包括功能性蛋白基表面活性剂5-15g/l、去污剂3-15g/l。
8、毛发清洗是为了去除因外界环境造成的污染，减少假阳性的发生。本专利技术的清洗剂可在不影响毛发内部结构的前提下有效去除毛发表面的油脂、杂蛋白、微粒污垢等毛发表面污染物。其中功能性蛋白基表面活性剂温和，与适当比例的去污剂配伍，可提高清洁效果。
9、作为优选，所述功能性蛋白基表面活性剂为含氟的醇醚磷酸单酯类化合物。
10、作为优选，所述s1中，去污剂为na2co3、sds、triton x-100中的一种或多种。
11、作为优选，所述s2中，助解液包括如下组分：tris-hcl 0.05-0.1m、cacl2 0.005-0.015m、na2so4 4-10g/l、tween-20 0.05-0.15wt％、尿素1.5-3g/l、耐高温蛋白酶0.2-4mg/ml、丙二醇5-30wt％，余量为纯水。
12、助解液中tris-hcl为缓冲基底，耐高温蛋白酶具有有效裂解大分子蛋白质中的肽键、降解天然蛋白的能力，在恒高温一定时间内保持酶活性，破坏毛发原有结构，使得其中的药物小分子物质得以释放；尿素可以破坏蛋白质的氢键和静电相互作用；na2so4可显著地降低有颜色毛发的放射性，进而增大药物的回收率；tween-20可促进释放出的药物小分子溶解于助解液中；丙二醇与水混溶，一方面可延缓裂解出的药物小分子物质的水解，增加裂解后所得毛发样本待测液的稳定性，另一方面可作为抗菌防霉剂延长毛发样本待测液的保存时间。
13、作为优选，所述耐高温蛋白酶为半胱氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、角蛋白酶中的一种或多种。
14、半胱氨酸蛋白酶可裂解毛发角蛋白中含量较高的半胱氨酸，丝氨酸蛋白酶可有效裂解大分子蛋白质中的肽键，角蛋白酶可专一地降解角蛋白。
15、作为优选，所述耐高温蛋白酶为蛋白酶k。
16、作为优选，所述s2中，高温孵育的温度为40-90℃，高温孵育的时间为5-20min。
17、作为优选，所述s2中，清洗后的毛发与助解液的质量体积比为100mg：(1-1.3)ml。
18、因此，本专利技术具有如下有益效果：
19、(1)本专利技术使用表面活性剂与化学去污剂的混合制剂，效果温和又具清洁力，有效去除毛发外部污染物，确保待测液中药物小分子物质均来自毛发内部，避免因外部污染造成错误的检测结果；
20、(2)本专利技术中助解液综合使用了化学制剂和生物制剂，可高效裂解毛发，促进毛发中药物小分子物质的释放；
21、(3)本专利技术在恒高温环境下使毛发中药物小分子物质释放进入助解液，由此完成毛发样本待测液的制备，可直接用于后续检测鉴定，无需将毛发研磨的复杂操作。
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1.一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述S1中，清洗剂包括功能性蛋白基表面活性剂5-15 g/L、去污剂3-15 g/L。
3.根据权利要求2所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述功能性蛋白基表面活性剂为含氟的醇醚磷酸单酯类化合物。
4.根据权利要求2或3所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述S1中，去污剂为Na2CO3、SDS、Triton X-100中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述S2中，助解液包括如下组分：Tris-HCl 0.05-0.1M、CaCl2 0.005-0.015M、Na2SO4 4-10 g/L、Tween-20 0.05-0.15 wt%、尿素1.5-3 g/L、耐高温蛋白酶0.2-4 mg/mL、丙二醇5-30wt%，余量为纯水。
6.根据权利要求5所述的一种毛发中药物小分
7.根据权利要求6所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述耐高温蛋白酶为蛋白酶K。
8.根据权利要求1或5或6或7所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述S2中，高温孵育的温度为40-90℃，高温孵育的时间为5-20 min。
9.根据权利要求8所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述S2中，清洗后的毛发与助解液的质量体积比为100mg：（1-1.3）mL。
...【技术特征摘要】
1.一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述s1中，清洗剂包括功能性蛋白基表面活性剂5-15 g/l、去污剂3-15 g/l。
3.根据权利要求2所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述功能性蛋白基表面活性剂为含氟的醇醚磷酸单酯类化合物。
4.根据权利要求2或3所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述s1中，去污剂为na2co3、sds、triton x-100中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种毛发中药物小分子物质的提取制备方法，其特征在于，所述s2中，助解液包括如下组分：tris-hcl 0.05-0.1m、cacl2 0.005-0.015m、na2so4 4...
【专利技术属性】
技术研发人员：王海剑，徐萌萌，吴彦俪，金茜茜，刘成，陆维克，
申请(专利权)人：杭州奥泰生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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