【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程领域，具体地，涉及一种人工非编码rna分子、一种dna分子、一种重组表达载体、一种转化体以及人工非编码rna分子和/或dna分子在提高合成甜菜碱生物合成量中的应用。
技术介绍
1、甜菜碱(三甲基甘氨酸)是甘氨酸的三甲基化衍生物，几乎存在于所有的生物体中。甜菜碱富含氮、磷、钾等元素，能够促进土壤中微生物的活性，提高土壤肥力和植物养分吸收能力，因此甜菜碱作为添加剂在生物肥料领域具有相当大的应用前景和商业价值。
2、甜菜碱可从天然植物的根，茎，叶中提取或采用三甲胺和氯乙烯为原料化学合成。目前甜菜碱合成主要是通过化工合成的方法。但化工合成法存在危险性，且废物的排出会污染环境。因此，人工设计标准化、智能化的信号响应元件及功能模块，通过在微生物底盘中构建甜菜碱高效合成途径，是实现低耗能、高环保地提高甜菜碱产量的新策略和新途径。文献(洪青等."中度嗜盐细菌halomonas sp.bys-1甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆和表达."微生物学报44.1(2004):3)公开了，通过pcr的方法克隆了甜菜碱醛脱氢酶基因(betb)，测序后在大肠杆菌中进行了高效表达，表达产物占菌体总蛋白的31.5％，酶活为38.5u/mg，为构建耐盐的转基因植物提供了材料。cn101880678b公开了一种红树甜菜碱醛脱氢酶基因及其在耐盐、耐旱、耐低温植物新品种培育研究中的应用。用所述红树甜菜碱醛脱氢酶基因构建原核表达载体和双元植物表达载体，分别转化大肠杆菌和烟草，对转badh基因大肠杆菌进行高盐培养，对转badh基因阳性烟草进行逆境胁迫
3、但是，现有技术中仍存在构建工程菌的甜菜碱合成效率较低的缺陷。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中构建工程菌的甜菜碱合成效率较低的问题，本专利技术提供了一种人工非编码rna分子、一种dna分子、一种重组表达载体、一种转化体以及人工非编码rna分子和/或dna分子在提高合成甜菜碱生物合成量中的应用。
2、本专利技术第一方面提供了一种人工非编码rna分子，所述rna分子的核苷酸序列如seq id no：1所示。
3、本专利技术第二方面提供了一种dna分子，该dna分子转录得到上述rna分子，所述dna分子的核苷酸序列如seq id no：2所示。
4、本专利技术第三方面提供了一种重组表达载体，该重组表达载体插入有上述dna分子。
5、可选地，所述重组表达载体包括所述dna分子和位于其5’端上游的渗透胁迫诱导型启动子。
6、可选地，所述渗透胁迫诱导型启动子的核苷酸序列如seq id no：3的1-176位所示。
7、可选地，所述重组表达载体通过将seq id no：3所示的核苷酸序列插入到pflaα3表达载体的多克隆位点构建。
8、本专利技术另一方面提供了上述人工非编码rna分子和/或上述dna分子在提高甜菜碱生物合成量中的应用。
9、优选地，所述应用包括将所述dna分子插入微生物底盘菌中，构建高效合成甜菜碱的转化体。
10、本专利技术另一方面提供了一种转化体，所述转化体导入有上述的重组表达载体。
11、优选地，所述转化体的宿主菌为微生物，所述微生物包括固氮施氏假单胞菌(pseudomonas stutzeri)a1501、大肠杆菌(escherichia coli)和费氏中华根瘤菌(sinorhizobium fredii)中的至少一种。
12、通过上述技术方案，在渗透胁迫条件下，本专利技术提供的人工非编码rna分子及利用该rna分子构建的重组表达载体能够显著提高不同重组工程菌的甜菜碱醛脱氢酶活性，明显增强微生物底盘的甜菜碱合成能力。本专利技术的提供的人工非编码rna分子和/或dna分子可以在不同微生物底盘中有效表达，可应用于不同微生物底盘中人工高效甜菜碱合成途径的构建。
13、本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种人工非编码RNA分子，其特征在于，所述RNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一种DNA分子，其特征在于，该DNA分子转录得到权利要求1所述的RNA分子，所述DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，该重组表达载体插入有权利要求2所述的DNA分子。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其中，所述重组表达载体包括所述DNA分子和位于其5’端上游的渗透胁迫诱导型启动子。
5.根据权利要求3或4所述的重组表达载体，其中，所述渗透胁迫诱导型启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：3的1-176位所示。
6.根据权利要求3-5中任意一项所述的重组表达载体，其中，所述重组表达载体通过将SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列插入到pFLAα3表达载体的多克隆位点构建。
7.权利要求1所述的人工非编码RNA分子和/或权利要求2所述的DNA分子在提高甜菜碱生物合成量中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其中，所述应用包括将所述DNA分子插
9.一种转化体，其特征在于，所述转化体导入有权利要求3-5中任意一项所述的重组表达载体。
10.根据权利要求9所述的转化体，其中，所述转化体的宿主菌为微生物，所述微生物包括固氮施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501、大肠杆菌(Escherichia coli)和费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)中的至少一种。
...【技术特征摘要】
1.一种人工非编码rna分子，其特征在于，所述rna分子的核苷酸序列如seq id no：1所示。
2.一种dna分子，其特征在于，该dna分子转录得到权利要求1所述的rna分子，所述dna分子的核苷酸序列如seq id no：2所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，该重组表达载体插入有权利要求2所述的dna分子。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其中，所述重组表达载体包括所述dna分子和位于其5’端上游的渗透胁迫诱导型启动子。
5.根据权利要求3或4所述的重组表达载体，其中，所述渗透胁迫诱导型启动子的核苷酸序列如seq id no：3的1-176位所示。
6.根据权利要求3-5中任意一项所述的重组表达载体，其中，所述重组表达载体通过将...
【专利技术属性】
技术研发人员：林敏，战嵛华，燕永亮，李超，张玉涵，柯秀彬，
申请(专利权)人：中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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