【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及一种生物标志物，具体涉及β-连环蛋白(又称β-catenin蛋白或者β-catenin)作为预测肿瘤细胞对wnt/β-catenin通路抑制剂化合物治疗方法反应或敏感性的生物标记物及其应用。
技术介绍
1、wnt通路是用来调控细胞增殖，细胞极性，以及控制细胞命运的基础通路，能够维持胚胎和组织发育的内稳态(homeostasis)。在肿瘤发生过程中wnt信号下游关键分子β-catenin得以在细胞内稳定聚集，入核后可与tcf转录因子结合调控细胞增殖相关因子的表达诱发肿瘤异常增生。此过程中wnt与frizzled受体结合或者后，wnt信号的关键分子将激活相邻的lrp5/6蛋白，通路进入“启动”状态。接下来，蛋白激酶cki和gsk3将与lrp尾部结合。随后dishevelled也将结合到frizzled和lrp的尾部，并使dishevelled磷酸化。这个复合物十分稳定，从而阻止了能够使β-catenin磷酸化的调控复合物形成。这样一来，非磷酸化的β-catenin(活性β-catenin，或者activeβ-catenin)就不会被泛素化降解。
2、wnt通路作为调控肿瘤细胞增殖的关键通路，被发现存在于多种肿瘤中，其由于突变而导致信号通路异常活化，因此使得肿瘤细胞恶性增殖。目前的wnt抑制剂有潜力作为泛癌种治疗药物，但是目前临床针对wnt通路的抑制剂临床药效不佳，主要有两方面原因；其一是早期开发的wnt通路抑制剂主要针对wnt ligands合成分泌、wnt ligands与wntreceptor
技术实现思路
1、针对上述问题，本发提供了一种使用非磷酸化β-catenin(即活性β-catenin)作为敏感且特异性的生物标志物用于预测肿瘤细胞是否对wnt抑制剂响应的方法，以及该生物标记物的应用。wnt/β-catenin通路作为调控肿瘤细胞增殖的关键通路，在多种肿瘤存在突变而导致信号通路异常活化，因此使得肿瘤细胞恶性增殖。调控β-catenin磷酸化而降解的通路被异常阻断是wnt信号通路异常活化的关键之一，其引发非磷酸化的β-catenin(活性/activeβ-catenin)在细胞内持续稳定聚集，非磷酸化β-catenin参与持续入核转录调控，因此导致肿瘤细胞异常扩增而加剧肿瘤进展。
2、专利技术人记载在pct/cn2021/126539、cn202210114025.9、cn202210115506.1以及cn202210924700.4中的内容公开了一系列wnt/β-catenin通路抑制剂化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体和其制备工艺，其以全文引用方式并入本文中。
3、在一个方面，本专利技术提供一种肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为预测所述肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的生物标记物的应用。
4、在一个方面，本专利技术提供一种预测肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的方法，包括使用所述肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物。具体地，该方法包括：检测肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量；比较非磷酸化β-catenin蛋白的检测值与参照值；如果检测值高于参照值，认为所述肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂有反应或者敏感；反之，则认为所述肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂没有反应或者不敏感。
5、在一个方面，本专利技术提供一种肿瘤患者的肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为预测所述肿瘤患者对wnt通路抑制剂治疗方法的反应或敏感性的生物标记物的应用。
6、在一个方面，本专利技术提供一种预测肿瘤患者对wnt通路抑制剂治疗方法反应或敏感性的方法，包括使用所述肿瘤患者的肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物。具体地，该方法包括：检测患者肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量；比较非磷酸化β-catenin蛋白的检测值与参照值；如果检测值高于参照值，认为肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂治疗方法有反应或者敏感；反之，则认为肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂治疗方法没有反应或者不敏感。该方法还可以包括首先采集患者肿瘤细胞样本。
7、在一个方面，本专利技术提供一种肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物在制作用于预测所述肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的产品中的应用，该产品可以例如是检测试剂盒或者检测液。
8、在一个方面，本专利技术提供一种治疗肿瘤患者的方法，包括：使用上述方法预测所述肿瘤患者是否对wnt通路抑制剂治疗方法有反应或敏感；如果有反应或者敏感，则对所述肿瘤患者使用所述wnt通路抑制剂治疗方法。
9、在一个方面，本专利技术提供一种治疗对其有需要的肿瘤患者的方法，包括：对所述肿瘤患者使用wnt通路抑制剂治疗方法，其中，所述患者肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量高于参照值。
10、在一个方面，本专利技术提供一种治疗对其有需要的肿瘤患者的方法，包括：对所述肿瘤患者使用wnt通路抑制剂治疗方法，其中，所述患者肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量被检测或者被确定高于参照值。
11、在又一个方面，在上述预测肿瘤细胞或者肿瘤患者对wnt通路抑制剂治疗方法反应或敏感性的方法或者治疗肿瘤患者的方法中，肿瘤细胞中的或者肿瘤组织中肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin含量通过免疫组织化学(ihc)分析检测或者确定。
12、在一个方面，本专利技术提供一种用于检测肿瘤组织或肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin含量的方法，包括对所述肿瘤细胞或者所述肿瘤组织中肿瘤细胞进行免疫组织化学(ihc)检测非磷酸化β-catenin含量。进一步地，该方法可被用于上述预测肿瘤细胞或者肿瘤患者对wnt通路抑制剂治疗方法反应或敏感性的方法或者治疗肿瘤患者的方法，以检测或者确定肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin含量。
13、在一个方面，本专利技术前述应用或者方法中，wnt通路抑制剂治疗方法包括施用治疗有效量的wnt通路抑制剂，其可以与第二治疗剂联合施用。优选地，第二治疗剂包括选自放疗和/或化疗药物和/或小分子靶向抗肿瘤药物和/或免疫治疗药物和/或大分子抗体药物的一种或者多种。
14、在一个方面，本专利技术前述应用或者方法中，wnt通路抑制剂通过降低肿瘤细胞及肿瘤组织中非磷酸化β-catenin蛋白含量而抑制肿瘤细胞及肿瘤组织中wnt通路的活化。优选地，wnt通路抑制剂为化学小分子抑制剂。进一步优选地，所述wnt通本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为预测所述肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的生物标记物的应用。
2.预测肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的方法，包括使用所述肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物。
3.如权利要求2所述的方法，包括：检测肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量；比较非磷酸化β-catenin蛋白的检测值与参照值；如果检测值高于参照值，认为所述肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂有反应或者敏感；反之，则认为所述肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂没有反应或者不敏感。
4.肿瘤患者的肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为预测所述肿瘤患者对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的生物标记物的应用。
5.预测肿瘤患者对wnt通路抑制剂反应或敏感性的方法，包括使用所述肿瘤患者的肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物。
6.如权利要求4所述的方法，包括：检测患者肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量；比较非磷酸化β-catenin蛋白的检测值与参照值；
7.肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物在制作用于预测所述肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的产品中的应用。
8.如权利要求1或者4所述的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物的应用、如权利要求2或3所述的预测肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的方法、或者如权利要求5或6所述的预测肿瘤患者对wnt通路抑制剂反应或敏感性的方法，其中，肿瘤细胞中的或者肿瘤组织中肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin含量通过免疫组织化学(IHC)分析检测或者确定。
9.用于检测肿瘤组织或肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin含量的方法，包括对所述肿瘤细胞或者所述肿瘤组织中肿瘤细胞进行免疫组织化学(IHC)分析检测或者确定非磷酸化β-catenin含量。
10.如权利要求9所述的方法，用于如权利要求1或者4所述的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物的应用、如权利要求2或3所述的预测肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的方法、或者如权利要求5或6所述的预测肿瘤患者对wnt通路抑制剂反应或敏感性的方法。
11.如前述任一权利要求所述的应用或者方法，其中所述Wnt通路抑制剂可以与第二治疗剂联合施用。
12.如权利要求11所述的应用或者方法，其中第二治疗剂包括选自放疗和/或化疗药物和/或小分子靶向抗肿瘤药物和/或免疫治疗药物和/或大分子抗体药物的一种或者多种。
13.如前述任一权利要求所述的方法或者应用，其中，所述Wnt通路抑制剂通过降低肿瘤细胞及肿瘤组织中非磷酸化β-catenin蛋白含量而抑制肿瘤细胞及肿瘤组织中Wnt通路的活化。
14.如权利要求13所述的方法或者应用，其中，所述Wnt通路抑制剂为化学小分子抑制剂。
15.如权利要求13所述的方法或者应用，其中，所述wnt通路抑制剂选自以下化合物或其药学上可接受的盐、同位素衍生物、立体异构体：
16.如权利要求15所述的方法或者应用，其中，所述wnt通路抑制剂选自以下化合物或其药学上可接受的盐、同位素衍生物、立体异构体：
...【技术特征摘要】
1.肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为预测所述肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的生物标记物的应用。
2.预测肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的方法，包括使用所述肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物。
3.如权利要求2所述的方法，包括：检测肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量；比较非磷酸化β-catenin蛋白的检测值与参照值；如果检测值高于参照值，认为所述肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂有反应或者敏感；反之，则认为所述肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂没有反应或者不敏感。
4.肿瘤患者的肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为预测所述肿瘤患者对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的生物标记物的应用。
5.预测肿瘤患者对wnt通路抑制剂反应或敏感性的方法，包括使用所述肿瘤患者的肿瘤细胞中的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物。
6.如权利要求4所述的方法，包括：检测患者肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白的含量；比较非磷酸化β-catenin蛋白的检测值与参照值；如果检测值高于参照值，认为肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂有反应或者敏感；反之，则认为肿瘤细胞对所述wnt通路抑制剂没有反应或者不敏感。
7.肿瘤细胞中非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物在制作用于预测所述肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的产品中的应用。
8.如权利要求1或者4所述的非磷酸化β-catenin蛋白作为生物标记物的应用、如权利要求2或3所述的预测肿瘤细胞对wnt通路抑制剂的反应或敏感性的方法、或者如权利要求5或6所述的预测肿瘤患者对w...
【专利技术属性】
技术研发人员：何南海，王友平，刘志红，陈宇锋，
申请(专利权)人：杭州阿诺生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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