【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及切片检查领域，具体涉及一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法。
技术介绍
1、手术中冰冻切片快速病理检查(简称“冰冻切片”)，是通过临床手术医师切除病变组织，病理医生切取具有代表性的组织块冻结于零下20度左右，在经过he染色、制片等多个环节后，在显微镜下观察并做出病理诊断。一般情况下30分钟内要求作出冰冻病理诊断，其主要特点就是及时、快速。它是外科手术科室与病理科之间就与术中处理方案有关的疾病诊断问题而进行的一种急会诊方式。冰冻切片快速病理检查适用以下几种情况：1、手术过程中需要确定病变性质(如肿瘤或非肿瘤/良性肿瘤或恶性肿瘤等)，以即时决定手术方案，决定是就此结束手术，还是进一步大范围切除；2、了解恶性肿瘤的扩散情况，包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋巴结转移等；3、确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留，即判断切缘干净与否，如果切缘干净，就到此为止，如果不干净，则继续扩切。
2、病理诊断的正确与否直接关系到手术台上处理患者的下一个步骤，对手术治疗有重大帮助和指导意义，诊断要力求正确、迅速和可靠。但是快速冰冻病理诊断不是万能的，它是一把“双刃剑”，虽然它及时快速，但由于时间紧迫、送检标本局限性、新鲜标本水分对细胞形态的影响、有些病例需要做进一步检查(如免疫组化)等因素，导致冰冻病理诊断报告的准确性远不如常规石蜡病理诊断报告。因此冰冻检查只能作为术中指导手术方案的参考诊断，最终诊断仍以常规石蜡病理诊断为准。所以有一些病检标本需要进行常规石蜡切片进一步检查，但是在冰冻取材中的病变组织极少
技术实现思路
1、本专利技术提供一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，旨在克服现有技术中存在的上述不足。
2、本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其包括如下步骤：
3、s1.将he染色冰冻切片浸入至to试剂中3-5分钟，然后褪下盖玻片，随后再浸入无水乙醇中洗去to试剂，备用；
4、s2.使用梯度酒精溶液进行浸洗后再水洗，完成褪苏木素和褪胞浆，最后进行水化，备用；
5、s3.使用抗原修复液进行抗原修复，然后进行血清封闭及免疫组化染色，染色完毕后即可进行免疫组化检测。
6、在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下进一步的具体选择。
7、具体的，步骤s1中浸入无水乙醇中持续时间为1-2min。
8、具体的，步骤s2中的梯度酒精溶液依次为体积分数95％酒精、85％酒精和75％酒精，浸洗次数依次为2次、1次和1次，三种浓度的酒精中每次浸洗时间依次为2-3min、5-15min和3-5min。
9、具体的，步骤s2中的水洗为浸入清水中1-2min后取出。
10、具体的，步骤s3中的抗原修复液为柠檬酸盐缓冲液或tris缓冲液。
11、具体的，步骤s3中的血清封闭采用3％双氧水对组织切片进行画圈处理。
12、具体的，步骤s3中免疫组化染色的步骤如下：一抗4℃过夜孵育，二抗室温孵育，dab显色，苏木素复染，脱水、透明并封片。
13、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
14、本专利技术提供的方法对于一些病变组织较少的病例的诊断十分有益，其成本低，操作简单迅速，可更快更准的得到检测结果，提高了诊断的准确性，便于临床尽快给患者进行下一步治疗，对患者的伤害降到最低，有利于提高其生命质量。
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1.一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤S1中浸入无水乙醇中持续时间为1-2min。
3.根据权利要求1所述的一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤S2中的梯度酒精溶液依次为体积分数95％酒精、85％酒精和75％酒精，浸洗次数依次为2次、1次和1次，三种浓度的酒精中每次浸洗时间依次为2-3min、5-15min和3-5min。
4.根据权利要求1所述的一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤S2中的水洗为浸入清水中1-2min后取出。
5.根据权利要求1所述的一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤S3中的抗原修复液为柠檬酸盐缓冲液或Tris缓冲液。
6.根据权利要求1所述的一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤S3中的血清封闭采用3％双氧水对组织切
7.根据权利要求1至6任一项所述的一种将HE染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤S3中免疫组化染色的步骤如下：一抗4℃过夜孵育，二抗室温孵育，DAB显色，苏木素复染，脱水、透明并封片。
...【技术特征摘要】
1.一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤s1中浸入无水乙醇中持续时间为1-2min。
3.根据权利要求1所述的一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的方法，其特征在于，步骤s2中的梯度酒精溶液依次为体积分数95％酒精、85％酒精和75％酒精，浸洗次数依次为2次、1次和1次，三种浓度的酒精中每次浸洗时间依次为2-3min、5-15min和3-5min。
4.根据权利要求1所述的一种将he染色冰冻切片褪色处理再进行免疫组化检测的...
【专利技术属性】
技术研发人员：王昀，吴玲敏，秦添，邓辉，余银辉，任婵君，周艳，
申请(专利权)人：武汉金域医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：
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