【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测领域，具体涉及一种脱氧核酶的铅离子化学发光检测方法及应用。
技术介绍
1、由于工农业生产等因素，铅是一种生物毒性显著的重金属，会对环境造成污染。这些重金属污染物不能被生物降解，相反却能在食物链的生物放大作用下，成千上百倍地的富集，最后进入人体。重金属在人体内能和蛋白质及酶等发生强烈的相互作用，使它们失去活性，也可能在人体的某些器官中累积，造成慢性中毒，从而导致很多疾病。因此检测水体中的重金属含量，对于控制重金属污染和减少重金属相关的疾病发生有重要的意义。
2、检测水体中的铅离子通常使用原子发射光谱法，原子吸收光谱法，原子荧光光谱法，电感耦合等离子体质谱法，电化学方法等传统方法。传统重金属检测法具有预处理复杂，仪器费用高，需要专业人员操作，难于实现现场测定等缺点。
3、化学发光检测方法所用的仪器结构简单、成本低，且其检测灵敏度要优于比色法，同荧光法相当。化学发光法已经广泛用于医疗诊断检测中，用于检测各种免疫标志物。但化学发光法在检测重金属时，选择性不佳，易受到干扰等因素难于实用。
4、现在的检测体液中重金属所用的设备仪器造价很高，不仅造成检测成本高，而且通量小，不适合在日常检测中推广。研制基于化学发光法的体液中重金属检测试剂盒结合医学检测中常用的化学发光检测仪器可以显著降低检测成本，扩大体液中重金属检测的使用范围，对因重金属引起的人体疾病的预防和早期诊断具有重要的意义。
技术实现思路
1、专利技术旨在利用铅特异性识别的脱氧核酶
2、本专利技术所采取的技术方案为：一种基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法，具体步骤如下：
3、步骤一：cu/ag纳米粒子的合成
4、首先将100 ml浓度为5g/l的聚乙烯吡咯烷酮（分子量为5800）、1 ml 浓度为0.2mol/l的agno3和1ml浓度为0.1mol/l的 cu(no3)2搅拌混合，接着，加入100 ml浓度为0.05mol/l的l-抗坏血酸、13ml浓度为5×10-4mol/l的naoh和30μl体积分数为35%的肼，继续搅拌3 min，然后，将上述混合液离心15 min，离心转速为6000rpm每分钟，用乙醇洗涤3次，最后，将获得的样品在50℃下干燥过夜，即可得到cu/ag纳米粒子；
5、步骤二：铅离子检测
6、将2μl浓度为1μmol/l的酶链和2μl浓度为1μmol/l的底物链室温孵育1 h，然后加入100μl不同浓度的铅离子溶液于上述溶液中，在35℃水浴孵育30 min，接着将混合液转移到10ml烧杯中，加入30μl浓度为0.2mg/ml的cu/ag纳米粒子、280μl浓度为0.5mmol/l的鲁米诺、50μl浓度为0.05mmol/l的过氧化氢以及适量的去离子水，使其最后体积为500μl，然后，将溶液混合均匀，放入到暗室中，用超微弱化学发光检测仪记录化学发光信号；
7、其中：铅特异性识别的脱氧核酶的序列如下：
8、酶链：5’-atcatctctgaagtagcgccgccgtatagtgagacaga-3’
9、底物链：5’-gtctgtctcactatraggaagagatgat-3’。
10、优选的，所述步骤二中100μl不同浓度的铅离子溶液指的是用硝酸处理掉尿素、尿酸、肌酐的尿液。
11、本专利技术还提供了：本专利技术所述的基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法在铅离子检测中的应用。
12、本专利技术的有益效果：
13、本专利技术的检测结构灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低，实用性强。
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1.一种基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法，其特征在于：具体步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法，其特征在于：所述步骤二中100μL不同浓度的铅离子溶液指的是用硝酸处理掉尿素、尿酸、肌酐的尿液。
3.权利要求1 ~ 2中任一项所述的基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法在铅离子检测中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法，其特征在于：具体步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种基于脱氧核酶的化学发光铅离子检测方法，其特征在于：所述步骤二中1...
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