【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种血管显像剂，具体涉及一种用于小鼠动静脉血管联合显像的组合制剂，及其制备方法和应用。
技术介绍
1、脑动脉和脑静脉血管提供了大脑的血液供应，动脉携带富氧血液和养分，将其输送到大脑各个部位，经过新陈代谢的血液通过静脉回流心脏。很多神经血管相关的疾病，如脑出血和脑动静脉畸形等均与脑动脉和脑静脉有关。为了深入研究这些疾病的相关机制，人们需要以小鼠为模型进行大量血管和神经系统的研究。很多研究中需要以区分小鼠脑动脉和脑静脉为前提，因为了解小鼠脑动脉和脑静脉的分布和结构不仅可以帮助我们了解脑组织血流动力学和供应模式，而且有助于我们更深入的理解很多疾病的病理生理机制和发生发展过程，从而为探索潜在治疗干预策略提供可能。此外，脑动脉和脑静脉的网络结构与大脑功能密切相关，通过区分不同类型的血管，我们才能够深入探究血管在神经发育过程和神经退行性疾病中的作用。
2、小鼠血管显像剂是用于观察和研究小鼠体内血管结构和功能的显像物质或造影剂。现有的小鼠血管显像剂通过不同的成像技术呈现小鼠血管的结构和分布。这些成像技术主要包括乳胶灌注、明胶染色、磁共振成像、荧光成像等，尽管在一定程度上可以为研究人员提供帮助，但是仍然存在诸多局限性。
3、乳胶灌注是通过将蓝色乳胶微球颗粒注入小鼠的血管系统中，注射后乳胶会沿着小鼠的血管系统进行扩散填充，固化后可以看到血管结构。该成像技术的缺点是：因为蓝色乳胶微球颗粒直径较大，不能通过毛细血管进入静脉端，所以通过乳胶灌注只能看到动脉，不能显示静脉血管结构。
4、明胶染色是在80℃
5、磁共振血管成像是基于试验需求选择适合的脑血管成像序列，利用磁共振技术对小鼠脑血管系统进行成像和可视化。小鼠脑血管磁共振血管成像可以进一步分为磁共振动脉血管成像和磁共振静脉血管成像，经后期重建后可以显示脑血管的三维结构图像。但是这种成像方式的缺点是：①只能看到大、中型血管的形态，看不到毛细血管形态(例如毛细血管畸形)；②不能同时看到小鼠动脉和静脉结构；③需要高分辨率的成像设备和适当的图像处理方法，④小鼠磁共振扫描费用较高。
6、荧光成像是通过使用荧光染料，如血管标记抗体(抗cd31抗体)注入血管，然后荧光染料会在血液中扩散，标记血管结构，最后通过荧光显微镜分析描述血管结构。该成像技术的缺点是：因为目前缺乏小鼠动脉和静脉特异性的标记抗体/marker，所以通过该成像方式也不能区分小鼠动脉和静脉，此外该种方法成像时间长，扫描时费用也较高。
7、综上所述，由于小鼠脑动脉和静脉在解剖结构、显像特性上的相似性，导致目前的血管成像方式对于小鼠的脑部动脉和静脉均不能实现很好地区分。然而，如上所述，准确区分小鼠脑动静脉是一个非常有必要的研究前提。因此，有必要提供一种能够明确区分小鼠动脉和静脉的显像剂和成像方法，以便更清楚地了解小鼠脑组织血流动力学和供应模式和很多疾病的病理生理机制和发生发展过程。
技术实现思路
1、鉴于上述背景，本专利技术的首要目的是提供一种用于小鼠动静脉血管联合显像的组合制剂，能够用于清楚地显示小鼠脑部动脉和静脉结构，并实现动脉和静脉之间的显著区分。
2、本专利技术的另一个目的是提供制备所述的组合制剂的方法。
3、本专利技术的再一个目的是提供用于小鼠动静脉血管联合显像的试剂盒。
4、本专利技术的上述目的通过以下技术方案实现：
5、第一方面，本专利技术提供一种用于小鼠动静脉血管联合显像的组合制剂，包括制剂a和制剂b；所述的制剂a是由溶剂、明胶微粒和着色组分a混合构成的溶液；所述的制剂b是由溶剂、乳胶微粒和着色组分b混合构成的溶液；所述的着色组分a与所述的着色组分b之间存在肉眼可识别的色差。
6、本专利技术所述的组合制剂中，所述的制剂a用于静脉显像，而所述的制剂b用于动脉显像。因此制剂a的性状应有利于充分进入静脉，而制剂b的性状则应有利于保留在动脉。
7、所述的制剂a中，所述的明胶微粒指通常用于食用或药用的明胶(gelatin)在溶剂中分散形成的微粒。本专利技术方法优选的明胶的相对分子质量约为50000～100000，通常为固体形式，呈颗粒状，加热后可以熔化形成胶体样物质，在溶剂中分散形成的微粒粒径小于小鼠毛细血管内径，从而可顺利通过小鼠毛细血管进入静脉端。本专利技术最优选的方法中，所述明胶来自servicevio公司，cas：9000-70-8，lot：cr2101053。
8、所述的制剂a中，明胶的浓度会影响制剂a整体的粘度和流动性。过高的明胶浓度会导致制剂a粘度过高、流动性差，在血管内流速过慢；过低的明胶浓度会导致制剂a粘度太低、流动性太强，冷却后不易形成凝胶。因此本专利技术优选浓度方案中，所述的制剂a中明胶浓度在30.0mg/ml-50.0mg/ml；更优选在40.0mg/ml。
9、所述的制剂b中，所述的乳胶微粒指的是化学组成为橡胶烃的微型球状物，所述的橡胶烃可以是天然橡胶烃，也可以是合成橡胶烃；优选天然橡胶烃。进一步优选的乳胶微粒粒径范围在0.8-1.2μm，更优选1μm。
10、所述的制剂b中，乳胶微粒的浓度会影响制剂b整体的粘度和流动性。过高的乳胶微粒浓度会导致制剂b粘度过高、流动性差，极容易凝固成块，容易在到达动脉最远端之前发生凝固；而过低的乳胶微粒浓度又会导致制剂b粘度太低、流动性太强，导致灌注显像失败。因此本专利技术优选浓度方案中，所述的制剂b中乳胶微粒的浓度在13％-18％；更优选在16％。
11、本专利技术所述的组合制剂方案中，所述制剂a和制剂b中的溶剂没有特别的限制，凡是现有技术中能够用于血管灌注的无色透明溶剂都可以用于本专利技术的组合制剂；优选的方案中，所述的溶剂可以是生理盐水、磷酸盐缓冲液pbs等；最优选生理盐水。
12、本专利技术所述的组合制剂方案中，制剂a中所述的着色组分a和制剂b中所述的着色组分b的种类没有特别的限制，可以是现有技术中适合用于血管灌注的各种染料、颜料或其他着色剂；优选的方案中，所述的着色组分a是蓝色颜料，例如马利z6032国画颜料中国画颜料451酞菁蓝颜料；优选的方案中，所述的着色组分b是红色颜料，例如马利z6032国画颜料中国画颜料400号胭脂红颜料。
13、第二方面，本专利技术提供制备第一方面所述组合制剂的方法，包括：
14、1)将明胶、溶剂和着色组分a混合，得到混合溶液a，然后热水浴至明胶融化，搅拌至颜色均匀，控制混合溶液a中明胶的浓度为30.0-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于小鼠动静脉血管联合显像的组合制剂，包括制剂A和制剂B；所述的制剂A是由溶剂、明胶微粒和着色组分A混合构成的溶液；所述的制剂B是由溶剂、乳胶微粒和着色组分B混合构成的溶液；所述的着色组分A与所述的着色组分B之间存在肉眼可识别的色差；所述的明胶微粒的相对分子质量为50000～100000；所述的乳胶微粒粒径范围在0.8-1.2μm，更优选1.0μm；所述的制剂A中明胶浓度在30.0-50.0mg/ml；优选40.0mg/ml；所述的制剂B中乳胶微粒的质量百分比浓度在13％-18％；优选16％。
2.权利要求1所述的组合制剂，其特征在于：所述的溶剂是生理盐水或磷酸盐缓冲液；优选生理盐水。
3.权利要求1所述的组合制剂，其特征在于：所述的着色组分A是蓝色颜料，优选是酞菁蓝颜料。
4.权利要求1或3任意一项所述的组合制剂，其特征在于：所述的着色组分B是红色颜料，优选是400号胭脂红颜料。
5.制备权利要求1-4任意一项所述组合制剂的方法，包括：
6.一种用于小鼠动静脉血管联合显像的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒内分装
7.权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述的静脉灌注液原料中的溶剂、明胶和着色组分A溶液的包装剂量比为：30ml:1.2g:1ml。
8.权利要求6或7任意一项所述的试剂盒，其特征在于：所述的动脉灌注液原料中的溶剂、乳胶溶液和着色组分B溶液的包装剂量体积比为：15:13:4。
9.权利要求6-8任意一项所述的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中设有配制说明书和/使用说明书，所述的配置说明书用于指导使用者在对小鼠进行血管灌注显像前，分别使用静脉灌注液原料现场配制静脉灌注显像剂、使用动脉灌注液原料现场配制动脉灌注显像剂；所述的使用说明书用于指导使用者使用现场配制的静脉灌注显像剂和动脉灌注显像剂对小鼠进行血管灌注。
10.权利要求1-4任意一项所述的组合制剂或权利要求6-9任意一项所述的试剂盒在小鼠神经病学研究和胃肠血管显像中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种用于小鼠动静脉血管联合显像的组合制剂，包括制剂a和制剂b；所述的制剂a是由溶剂、明胶微粒和着色组分a混合构成的溶液；所述的制剂b是由溶剂、乳胶微粒和着色组分b混合构成的溶液；所述的着色组分a与所述的着色组分b之间存在肉眼可识别的色差；所述的明胶微粒的相对分子质量为50000～100000；所述的乳胶微粒粒径范围在0.8-1.2μm，更优选1.0μm；所述的制剂a中明胶浓度在30.0-50.0mg/ml；优选40.0mg/ml；所述的制剂b中乳胶微粒的质量百分比浓度在13％-18％；优选16％。
2.权利要求1所述的组合制剂，其特征在于：所述的溶剂是生理盐水或磷酸盐缓冲液；优选生理盐水。
3.权利要求1所述的组合制剂，其特征在于：所述的着色组分a是蓝色颜料，优选是酞菁蓝颜料。
4.权利要求1或3任意一项所述的组合制剂，其特征在于：所述的着色组分b是红色颜料，优选是400号胭脂红颜料。
5.制备权利要求1-4任意一项所述组合制剂的方法，包括：
6.一种用于小鼠动静脉血管联合显像的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒内分装有静脉灌注液原料和动脉灌注液原料；所述的静脉灌注液原料包括独立包装的溶剂、明胶和着色组分a溶液；所述的动脉灌注液原...
【专利技术属性】
技术研发人员：于嘉兴，张世榉，涂天琦，张彤宇，张鸿运，周原，洪韬，张鸿祺，
申请(专利权)人：首都医科大学宣武医院，
类型：发明
国别省市：
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